5%氟氯虫双酰胺悬浮剂的高效液相色谱分析

葛家成，张永芳，闫欣欣，王丽颖，张立新*

（1.海利尔药业集团股份有限公司，山东青岛 266109；2.沈阳化工大学功能分子研究所，沈阳 110142)

氟氯虫双酰胺（Fluchlordiniliprole）是海利尔药业集团股份有限公司自主创制的一种新型的苯甲酰胺类化合物，其IUPAC中文名称为：3-溴-4′,6′-二氯-1-(3-氯-2-吡啶基)-3′-氟-2′-(甲基氨基甲酰基)-1H-吡唑-5-甲酰苯胺；CAS登录号为：2129147-03-9；分子式为：C17H10BrCl3FN5O2；结构式如图1。氟氯虫双酰胺作用机理独特，对环境友好，对哺乳动物低毒，杀虫谱广，持效期长，对害虫具有触杀、胃毒作用，对多种鳞翅目害虫高效，对缨翅目蓟马如兰花蓟马、烟蓟马、棕榈蓟马等也有较高的防治活性，并且合成工艺简单，成本低，复配效果好，具有广阔的市场前景[1-2]。有关利用高效液相色谱分析方法测定农药有效成分的研究颇多[3-5]，但目前关于氟氯虫双酰胺制剂产品的分析方法尚未见报道。本文采用高效液相色谱法对5%氟氯虫双酰胺悬浮剂中的有效成分进行含量测定。该研究对生产中氟氯虫双酰胺有效成分的质量检测具有指导意义。

图1 氟氯虫双酰胺结构式

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

氟氯虫双酰胺标样（纯度98%），海利尔药业集团股份有限公司；5%氟氯虫双酰胺悬浮剂样品，沈阳化工大学；纯净水，娃哈哈集团有限公司；甲醇（色谱纯），美国费希尔公司；冰乙酸（分析纯），国药集团化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

Agilent 1260高效液相色谱仪（具有紫外检测器），美国安捷伦公司、Diamonsil C18色谱柱（200 mm×4.6 mm（i.d.），5μm），北京迪马科技有限公司；SG520OHE型数控超声波清洗器，上海冠特超声仪器有限公司；XSR205DU/A分析天平，梅特勒-托利多公司；50 mL容量瓶，北京欣维尔玻璃仪器有限公司；0.22μm有机相针式过滤器，上海安普实验科技股份有限公司。

1.3 液相色谱操作条件

流动相：pH值3.0甲醇-酸水（70.0∶30.0，V/V）；检测波长：230 nm；流速：1.0 mL/min；进样体积：5μL；柱温：（30.0±2）℃；氟氯虫双酰胺的保留时间为5.7 min。氟氯虫双酰胺标样及5%氟氯虫双酰胺悬浮剂的高效液相色谱图分别见图2和图3。

图2 氟氯虫双酰胺标样高效液相色谱图

图3 5%氟氯虫双酰胺悬浮剂高效液相色谱图

1.4 测定步骤

1.4.1 标准溶液的配制

用分析天平称取氟氯虫双酰胺标样0.040 g（精确至0.000 2 g），将称取好的样品放置在50 mL容量瓶中，以甲醇为溶剂，并用超声波辅助使样品溶解完全，定容至刻度线，用0.22μm有机相针式过滤器过滤到进样小瓶中，备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取5%氟氯虫双酰胺悬浮剂试样0.800 g（精确至0.000 2 g）置于50 mL容量瓶中，其余操作步骤与1.4.1标准溶液配制相同。

1.4.3 测定

在1.3色谱操作条件下，等待数分钟使仪器稳定。当基线基本平稳时，首先注入标准品溶液，接连注入几次，每注入一次计算相应的响应值；当相邻2针标准品之间响应值变化小于1.5%时，再进行下一步测定。分别测定标样溶液、连续2针试样溶液、标样溶液。

1.5 数据分析

根据标样溶液和试样溶液的峰面积，按式（1）计算样品中氟氯虫双酰胺的质量分数w。

式中：A1、A2分别为标样和试样溶液中氟氯虫双酰胺峰面积的平均值，mAU·min；m1、m2分别为标样和试样的称样质量，g；P为标样中氟氯虫双酰胺的质量分数，%。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

通过对氟氯虫双酰胺进行紫外扫描，发现在230 nm的波长条件下有较强的吸收峰，同时杂质的响应值小，因此将检测波长定位为230 nm。

2.2 流动相的选择

为了得到更准确的检测结果，在反相色谱分析时采用C18色谱柱，流动相选择甲醇-水时，氟氯虫双酰胺的色谱峰发生拖尾，用冰醋酸将水的pH调节为3.0时，被测物的峰形对称性好。通过系列比例试验，流动相为pH=3.0的甲醇-酸水（70∶30，V/V），流速1.0 mL/min时，氟氯虫双酰胺的峰形较好，可以得到很好的分离。

2.3 方法线性相关性的测定

用甲醇溶解标样，分别配制0.2、0.4、0.8、1.2、1.6 mg/mL 5个浓度梯度的氟氯虫双酰胺标准溶液，在1.3描述的色谱条件下进行分析，以氟氯虫双酰胺标准溶液的质量浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标，获得氟氯虫双酰胺的标准曲线。氟氯虫双酰胺的线性方程为y=10.176 5x＋0.329 7，线性相关系数R2=0.997 6。可以看出，氟氯虫双酰胺在测定的浓度区域范围内具有良好的线性关系。

2.4 方法精密度的测定

在1.3色谱操作条件对同一样品称取6个试样，方法精密度结果见表1。氟氯虫双酰胺的标准偏差为0.0237%，变异系数为0.47%，该分析方法的重现性好、精密度高。

表1 精密度试验结果

2.5 方法准确度的测定

称取一定量的氟氯虫双酰胺标样加入已知质量的5%氟氯虫双酰胺悬浮剂样品中，在1.3的色谱操作条件，对5个氟氯虫双酰胺悬浮剂样品进行分析测定，计算回收率。试验结果见表2。可以看出，氟氯虫双酰胺的平均回收率为98.79%，则该分析方法准确度高、重复性好。

表2 氟氯虫双酰胺的准确度试验结果

3 结 论

本研究建立了高效液相色谱法快速测定氟氯虫双酰胺含量的分析方法。试验结果表明，该方法线性关系良好、准确度和精密度较高，并且操作简便、快速，是一种可行的分析方法，可以用于氟氯虫双酰胺制剂产品的有效成分的定量分析。