慢性乙肝患者血清白介素-33、转化生长因子-β1水平的表达及意义*

蒋 婧，方 向

固始县中医院检验科，河南 固始 465200

慢性乙型肝炎（CHB）是患者感染乙型肝炎病毒（HBV）后未给予积极干预而形成的慢性肝脏损伤，随着病情发展可导致肝纤维化、肝硬化，甚至肝癌，对患者生命安全构成威胁。目前，临床在抗HBV治疗中无法彻底清除HBV，仅可抑制HBV复制及增殖，且HBV感染患者疾病的转归与机体免疫功能间存在密切联系［1-2］。细胞因子是机体免疫系统的重要组成部分，并在HBV感染中具有重要的免疫作用。白介素-33（IL-33）是孤儿受体ST2的特异性配体，也是作用较强的Th2细胞诱导剂，在脑、肺、胃、皮肤组织及肝脏中均存在大量的IL-33表达［3］。转化生长因子-β1（TGF-β1）为多功能蛋白质的一种，属抗炎因子，可影响机体内多种细胞的生长、分化及凋亡，具有较强的免疫调节作用，并认为TGF-β1水平与肝硬化间联系密切［4］。鉴于此，本研究分析慢性乙肝患者血清IL-33、TGF-β1水平表达及意义，以为临床评估CHB病情提供参考，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年5月—2020年2月固始县中医院收治的100例CHB患者作为研究对象，其中男56例，女44例，年龄23～68岁，平均年龄（45.59±3.67）岁。依据患者病情分为CHB轻度组（36例）、CHB中度组（34例）、CHB重度组（30例），并依据乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阴阳性分为HBeAg阴性组71例，HBeAg阳性组29例。所有患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南（2015版）》［5］中疾病相关诊断标准，病例资料完整。参与本研究前未行抗病毒及免疫调节治疗，且6个月内未行保肝治疗。自愿参与，签署知情同意书。排除原发性肝癌、自身免疫性肝炎、药物性肝炎等其他肝部疾病。伴有其他系统严重感染。依从性差，无法完成本次研究者。另选取同期于医院行健康体检的32例志愿者作为对照组，男19例，女13例，年龄22～69岁，平均年龄（45.40±3.82）岁。本研究获医院医学伦理委员会批准。两组患者性别、年龄等一般资料具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法

采集5 mL清晨空腹肘静脉血置于EDTA试管中，将其置于离心机内以3 000 r/min速度，离心半径为10 cm，离心处理15 min后留取上层血清，对其进行编号后置于-72℃低温冰箱中保存待检。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBV血清标志物，另采用德国罗氏公司生产的MODULARP 800型全自动生化分析仪检测肝功能，包括天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、直接胆红素（DBIL）、总胆红素（TBIL）水平，采用ELISA检测血清IL-33及TGF-β1水平。检测所使用的试剂均由武汉伊莱瑞特生物科技有限公司提供，所有操作均严格遵循试剂盒要求进行。

1.3 观察指标

比较对照组及各病情程度下CHB患者IL-33及TGF-β1水平。另比较HBeAg阴性组及HBeAg阳性组患者IL-33及TGF-β1水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。计数资料用例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四组患者IL-33及TGF-β1水平

相比于对照组，CHB重度、中度、轻度组IL-33及TGF-β1水平均较高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 四组患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

表1 四组患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

a表示与对照组相比，P＜0.05。

组别CHB轻度组（n=36）CHB中度组（n=34）CHB重度组（n=30）对照组（n=32）IL-33 11.78±6.52a 12.03±6.11a 16.58±9.67a 5.13±1.02 TGF-β1 395.20±39.86a 482.71±69.79a 886.29±25.94a 293.46±25.81

2.2 两组患者IL-33及TGF-β1水平

两组患者IL-33及TGF-β1水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 两组患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

表2 两组患者IL-33及TGF-β1水平（±s） ng/L

组别HBeAg阳性组（n=29）HBeAg阴性组（n=71）t值P值IL-33 16.08±1.33 15.57±0.94 1.880 0.063 TGF-β1 590.08±294.46 538.49±173.85 0.881 0.380

3 讨论

目前，临床对于乙型肝炎的发病机制暂无明确定义。HBV感染不会直接对肝细胞造成损伤，而是经诱导机体T细胞介导的特异性细胞免疫反应在清除HBV的同时引发的肝细胞损害，实验室检查可见血清中ALT及TBIL等指标明显上升。正常情况下Th1/Th2型免疫反应处于动态平衡，若Th1/Th2及Th17/Treg类细胞因子发生失衡时，可对患者临床转归造成严重影响［6-7］。

本研究结果显示，相比于对照组，CHB重度、中度、轻度组IL-33及TGF-β1水平均较高，HBeAg阳性及阴性组IL-33及TGF-β1水平比较有可比性，表明IL-33及TGF-β1水平与CHB病情严重程度呈正相关，病情越重，IL-33及TGF-β1水平越高，且二者在肝纤维化进程及肝组织炎症活动中具有较好的协同作用。IL-33是IL-1家族成员中的一种可直接作用于Th2细胞，从而促进白介素-4（IL-4）、白介素-5（IL-5）、白介素-13（IL-13）等Th2型细胞因子分泌，并通过自然杀伤细胞（NK）及自然杀伤性T细胞（NKT）而增强Th1型细胞因子的表达。此外，IL-33的特异性受体为ST2，分为sST2及跨模性ST2（ST2L）两种，其中ST2L可选择性表达于Th2型细胞表面，当机体发生病毒感染时，IL-33可作为前炎症细胞因子释放至细胞外与靶细胞表面的ST2L相结合，并激活下游信号转导分子，影响IL-4、IL-5、IL-13等细胞因子生成及分泌，使得Th1/Th2免疫应答发生失衡，若向Th2倾斜，则可促进炎性反应发生，导致感染呈现慢性化改变［8］。TGF-β1生物学效应较为广泛，不同培养条件及细胞种类下，TGF-β1呈现出抑制与刺激的双重作用。TGF-β1还可作为一种关闭免疫应答及炎性反应的型号，因其具有抑制促炎细胞因子的功能，可在一定程度上拮抗淋巴细胞反应。研究显示［9-10］，TGF-β1为公认的纤维化关键介导因子，是促进器官纤维化的细胞因子，由于TGF-β1可活化肝星状细胞，促进纤维细胞生成，加快胶原基因表达。

综上所述，CHB患者血清IL-33、TGF-β1水平随着患者病情严重程度的增加而上升，在CHB疾病发展过程中，血清IL-33、TGF-β1起到重要作用，二者相互影响、相互调节及制约，为病情判断及预后评估提供有利依据。