微柱凝胶技术交叉输血对临床输血安全性的影响

曾燕娇（江西省寻乌县人民医院,江西 赣州 342200）

输血治疗是救治患者的特殊措施，可以快速提高患者红细胞及血红蛋白含量[1]，现已广泛应用于临床治疗。但输血的异源性也会导致患者出现类似过敏、发热、溶血等反应[2-3]。因此输血前应对患者进行血型鉴定、抗体筛选、交叉配血等关键措施，以避免发生输血不良反应[4]。目前常用的抗体筛查和交叉配血方法有盐水法、凝聚胺法等，但风险较大，输血不良反应较多。随着交叉配血的应用和发展，微柱凝胶技术的优势逐渐显现，其避免了传统交叉配血的弊端，且安全性、灵敏性大大提高[5]，但临床上该方法对临床输血的安全性尚未达到共识。因此，本研究通过选取2019年5月-2021年5月在本院收治的68例易发生交叉配血不合的患者，分析本院需要输血的患者采用凝聚胺法和微柱凝胶法进行不规则抗体筛查和交叉配血实验，比较这些检查方法对结果的影响，以期了解微柱凝胶技术对交叉输血对临床输血安全性的影响，以提高临床输血有效率。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年5月-2021年5月在本院收治的68例易发生交叉配血不合的患者，男39例，女29例，年龄16-76岁，平均（47.34±9.31）岁，其中白血病18例，淋巴瘤9例，自身免疫系统疾病10例，贫血15例，其他16例。纳入标准：①所有纳入患者均符合输血治疗指征[6]，需要接受临床输血治疗；②患者及家属了解研究目的并知情同意；③存在临床反复输血、肿瘤、贫血或其他易发生交叉配血不合的患者；④存在凝聚胺法和微柱凝胶技术交叉配血适应证。排除标准：①心功能不全；②急性肺水肿；③高血压；④真性红细胞增多症；⑤既往有严重输血反应史。本研究经医院伦理委员会通过。

1.2 检测方法 （1）采集所有患者静脉血标本3ml，置于4℃环境中储存待检，所有标本检测在2h内完成。所有纳入患者同时采用抗体筛选（鉴定），采用微柱凝胶法和凝聚胺法进行不规则抗体筛查和交叉配血实验。（2）抗体筛选（鉴定）：取三支试管，分别标记①、②、③，各加入患者血清2滴，再分别加入筛选细胞2滴，混匀，37℃孵育1h，离心15s。轻轻悬浮细胞，观察凝集结果并记录。依据谱细胞数量取相应数目试管，分别标记序号，各加入患者血清2滴，再分别加入谱细胞2滴，混匀，37℃孵育1h，离心15s。轻轻悬浮细胞，观察凝集结果并记录。（3）不规则抗体筛查和交叉配血实验：①凝聚胺法：首先取洁净试管2支，一支标记为主侧，向其中加入受血者的血清和献血者的红细胞悬液，另一支标记为次侧，向其中加入献血者的血清和受血者的红细胞悬液。向主侧和次侧两支试管中均加入0.65ml低离子介质，混匀，再加1滴凝聚胺混匀，离心（3500r/min，15s），倒掉上清液，轻轻摇动试管，凝集1min后在光学显微镜下观察，若无凝集则为红细胞抗原抗体结合，反之则为配血结果不合。②微柱凝胶法：先将供（受）血标本制备0.5%红细胞低离子介质悬液，取出Coombs配血卡，放于离心机离心15min，加100μl红细胞悬液，次侧加供（受）者血清或血浆各50μl，将检测卡置于温度为37℃环境下反应15min，离心（转速1500r/min，时间3min），若经肉眼可观察到红细胞全部沉积于胶底则表示阴性，其他情况均为阳性。

1.3 观察指标

1.3.1 不规则抗体筛查和配血情况 所有患者采用微柱凝胶技术和凝聚胺法进行不规则抗体筛查和检测交叉配血不合情况，比较两组患者筛查结果和交叉配血不合结果。

1.3.2 抗体鉴定 所有患者进行抗体鉴定，比较两组方法检测交叉配血不合的灵敏度和对各不规则抗体（抗-M、抗-E、抗-D、抗-S、抗-K、抗-C）的检出率。

1.4 统计学处理 采用SPSS21.0统计学软件分析所有数据，计数资料用率表示，采用χ2检验比较组间差异，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 抗体筛选（鉴定）结果 68例患者经抗体筛选（鉴定）结果显示，交叉配血不合者56例（82.35%），不规则抗体36例（52.94%）。

2.2 微柱凝胶法和凝聚胺法交叉配血检查结果比较 微柱凝胶法检出交叉配血不合检出率为73.53%（50/68），高于凝聚胺法检测交叉配血不合检出率57.35%（39/68）（P＜0.05）。

2.3 微柱凝胶法和凝聚胺法抗体筛查阳性结果分析 经抗体鉴定，确诊交叉配血不合者56例。微柱凝胶法检出交叉配血不合者50例（89.29%），其中不规则抗体36例（64.29%），自身抗体14例（25.00%）；凝聚胺法检出交叉配血不合者39例（69.64%），其中不规则抗体24例（42.86%），自身抗体15例（26.79%）。微柱凝胶法检测交叉配血不合抗体阳性检出率为89.29%，高于凝聚胺法检测的69.64%（P＜0.05）。见表1。

表1 微柱凝胶法和凝聚胺法抗体筛查阳性结果分析[n(%)]

2.4 36例不规则抗体者用微柱凝胶法和凝聚胺法筛查阳性分型结果分析 经抗体鉴定，不规则抗体为36例，微柱凝胶法检测不规则抗体筛查中抗-M抗体（30.56%）、抗-E抗体（38.89%）和抗-C抗体（8.33%）阳性率分型比凝聚胺法的22.22%、16.67%、5.56%高。见表2。

3 讨论

输血是临床常用的通过静脉输注全血和成分血以补充血容量，改善贫血，增加机体抵抗力的治疗方法[7-8]。但输血存在过敏、溶血、发热等诸多不良反应[9]，临床输血的安全性、有效性是判断输血能否成功救治患者的标准[10]。在血型鉴定的基础上，通过交叉配血进一步证实受血者和供血者之间不存在血型不合的抗原-抗体反应，以保证受血者输血安全[11]。交叉配血两侧均无凝集反应，为配血相合，方可输血。因而交叉配血决定临床输血的可行性，能够有效保证受血者的输血安全，避免输血意外情况的发生。因此，输血前交叉配血实验对临床输血安全具有重要意义。

凝聚胺法在临床上操作简便快捷，检测所需成本低，在需紧急输血情况下具有优势，但存在较高的漏检率[12-13]。而微柱凝胶技术结合了离心和免疫反应技术[14]，漏检率低于凝聚胺法，结果更加可靠。本研究结果显示，微柱凝胶法不规则抗体检出率和交叉配血不合检出率高于凝聚胺法，提示微柱凝胶技术相比于凝聚胺法检查结果更加准确，安全性更高。分析本研究中的结果变化，可能与凝聚胺法检测结果不直观，且易受肝素、药物等影响，导致误差有关[15]。而微柱凝胶技术结合生物化学凝胶过滤技术、离心技术与免疫化学抗原抗体反应相结合的原理，结果稳定，易于观察，且受混杂因素影响较小。既往研究显示，微柱凝胶技术交叉配血的不合检出率高于凝聚胺法，能检测到弱的抗原抗体反应，并正确指导临床选择合适的输血方案[16]，本研究结果与其部分一致，提示通过微柱凝胶技术用于交叉配血具有检测影响因素少、结果准确等特点。

本研究结果显示，微柱凝胶法检测交叉配血不合抗体阳性检出率为89.29%，高于凝聚胺法检测的69.64%，且对抗-M抗体、抗-E抗体和抗-C抗体的灵敏度更高，提示微柱凝胶法相比凝聚胺法有更多弱阳性检出，灵敏度更高，误差更少。微柱凝胶法是在注有凝胶的微孔里，通过离心，将其血液中的红细胞特异性抗体是否形成复合物浮于胶体表面而进行判定[17]。既往研究显示，微柱凝胶技术更加标准化，重复性更高，误差更小[18]，与本研究结果部分一致，分析其原因可能是运用了微柱凝胶抗人球蛋白法进行交叉配血[19]，提示微柱凝胶技术可以提高输血的有效性和安全性，保证患者安全用血。本研究结果显示，微柱凝胶法配血成功率高于微聚胺法配血成功率，说明微柱凝胶法临床输血安全高于微聚胺法。

综上所述，微柱凝胶技术交叉输血可以提高交叉配血不合检出率。交叉配血不合的灵敏度较高，且临床输血安全性更高，治疗效果更佳，本研究仅观察了微柱凝胶技术及凝聚胺法两种方式单独检测交叉输血的灵敏度和安全性，两种方式联合使用的灵敏度及准确率尚需进一步深入研究。