液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂在大鼠CT显像实验中的应用研究

高学明

摘要：目的：研究大鼠CT显像实验中液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂的应用。方法：采用兰州大学大学实验动物中心提供的12只Wistar大鼠，制备与评价PFOB微球，进行体外实验、体内实验，统计分析大鼠造影前后下腔静脉、腹主动脉、脾脏、肝脏感兴趣区不同时间点的CT值。结果：大鼠造影前后下腔静脉、腹主动脉感兴趣区注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h的CT值均逐渐降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）。大鼠造影前后脾脏感兴趣区注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3d的CT值逐渐升高（P<0.05），注射后3、4、5、6、7、8d的CT值逐渐降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）;肝脏感兴趣区注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1d的CT值逐渐升高（P<0.05），注射后1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值逐渐降低（P<0.05），注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值均高于注射前（P<0.05）。结论：大鼠CT显像实验中液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂的应用价值高。

关键词：大鼠;CT显像实验;液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂

液态氟碳（PFOB）是一种全氟化物（PFC），组成成分为碳原子8个、氟原子7个、溴原子1个，携氧功能良好，稳定性高，最早作为血液代用品在医学领域得到了广泛应用。本文研究了大鼠CT显像实验中液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂的应用。

1.材料与方法

1.1 材料与设备

采用兰州大学大学实验动物中心提供的12只Wistar大鼠，体质量200～250g，雌雄不限。购买国药集团化学试剂有限公司生产的卵磷脂，上海东华有限公司生产的高压均质乳化机（GYB40-10S），上海标本模型厂生产的高速分散均质机（FJ-200），江苏荣华仪器制造公司生产的磁力搅拌器（78-1型），英国马尔文公司生产的激光粒度和电位分析仪（Zetasizer 3000HS），法国Elf Atochem公司生产的PFOB，美国GE公司生产的16排螺旋CT，1%戊巴比妥钠，氯仿。

1.2 方法

1.2.1 PFOB微球的制备与评价

将5g卵磷脂称取出来，恒温下在10ml氯仿溶液中溶解并搅拌，在此过程中将磁力搅拌器充分利用起来，待卵磷脂在氯仿溶液中完全溶解后，向水相温度为60℃的旋转蒸发仪中移送，旋转蒸发，直到有一均匀薄膜形成。向一烧杯中移送脂质薄膜，将80ml PBS缓冲液加入。向卵磷脂缓冲液中逐滴加入75.27g PFOB并乳化5～10min，在此过程中将高速分散机充分利用起来。之后向高压均质机中转入该混合乳剂，进一步乳化3～4min，压力为70Mpa。光镜下对PFOB微球形态与分布进行观察，采用激光粒度和电位分析仪对微球微粒及电位进行测定。

1.2.2 体外实验

用脱气水将PFOB微球原液稀释，在塑料管中装入5ml脱气水、5ml 1：8倍稀释液、5ml 1：4倍稀釋液、5ml 1：2倍稀释液、5ml原液，分别用数字5、4、3、2、1标记，进行CT扫描，参数设置：电压、电流、层厚、每层扫描时间分别为80kVp、170mA、5mm、0.8s。

1.2.2 体内实验

给予大鼠腹腔注射4.8ml/kg 1%戊巴比妥钠麻醉，将大鼠尾静脉通道建立起来，将浓度为64%W/V 5ml/kg PFOB注入，在注入前、注入后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3、4、5、6、7、8d分别进行胸腹部CT扫描，参数设置同上。对实验过程中大鼠生命体征变化进行观察。将感兴趣区从下腔静脉、腹主动脉、脾脏、肝脏的相同部位选取出来，并对其造影前后的CT值进行测量，将时间-密度曲线绘制出来。采用ADW4.3后处理软件进行三维重构。

1.3 统计学分析

数据分析工具采用SPSS21.0软件，计量资料用（）表示，用t检验。P<0.05表示差异存在统计学意义。

2.结果

2.1 大鼠造影前后下腔静脉、腹主动脉感兴趣区不同时间点的CT值比较

大鼠造影前后下腔静脉、腹主动脉感兴趣区注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h的CT值均逐渐降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）。见表1。

2.2 大鼠造影前后脾脏、肝脏感兴趣区不同时间点的CT值比较

大鼠造影前后脾脏感兴趣区注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3d的CT值逐渐升高（P<0.05），注射后3、4、5、6、7、8d的CT值逐渐降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）;肝脏感兴趣区注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1d的CT值逐渐升高（P<0.05），注射后1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值逐渐降低（P<0.05），注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值均高于注射前（P<0.05），但注射后8d和注射前的CT值之间的差异不显著（P>0.05）。见表2。

3.讨论

有研究表明，聚集的PFBO微球的声反射现象显著增强。由于X射线不会穿透PFOB，PFOB无生物学活性，因此在放射对比剂中占有重要地位。本研究结果表明，在CT显像中，PFOB微球超声对比剂能够将积极作用发挥出来，应用前景良好。

综上所述，大鼠CT显像实验中液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂的应用价值高，值得推广。

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甘肅省人民医院院内科研基金（20GSSY3-10）

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