Th17/Treg、TGF-β1、IL-17与急性脑卒中的病情严重程度以及预后的相关性研究

柯莎，杨飞，彭舒，王晓明*

(1.川北医学院附属医院神经内科，四川 南充 637002；2.南充市中心医院神经内科，四川 南充 637003)

急性脑卒中是由脑血管阻塞或破裂导致大脑血液供给不足引发的急性脑血管疾病，以高发病率、高致残率和高死亡率为特征，给病情评估和预后判断带来了极大挑战。目前，该病发病机制尚不明确[1]，文献研究[2]显示，急性脑卒中发病时出现机体炎症加剧和免疫应答异常，其中炎症介质和免疫细胞因子是介导疾病进展的关键要素。有报道指出，血清炎症因子水平与脑卒中患者神经功损伤密切相关，可作为预后评价的独立危险因素。CD4+ CD25+ T细胞是调节性T细胞中的主要成分，具有免疫无能性和一致性，能够延缓不可逆的免疫病理变化；TGF-β1是由调节性T细胞分泌的免疫抑制性的细胞因子[3]，该因子的高表达或低表达，均会导致患者自身免疫功能紊乱[4]。白细胞介素(IL)是由CD4+ T细胞分泌的促炎因子，可通过促进前炎性细胞因子IL-6、IL-8的释放放大炎症反应，诱导炎症发生，与脑梗死[5]相关，但在急性脑卒中中的研究报道较少。本研究动态监测急性脑卒中患者外周血Th17/Treg、TGF-β1、IL-17的表达情况，探讨其与急性脑卒中病情和预后的相关性，为急性脑卒中患者的病情严重程度评估及预后评价提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院于2019年1月至2022年1月收治的147例急性脑卒中患者作为观察组，选择同期来我院体检的100例健康人群作为对照组。观察组年龄32～80岁，平均(67.33±9.75)岁；男90例，女57例；体质量指数(BMI)(24.93±1.81)kg/m2。对照组年龄30～78岁，平均(66.80±8.97)岁；男61例，女39例；BMI(24.95±1.51)kg/m2。两组研究对象年龄、性别、BMI等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会审核通过，受试研究患者均书面告知并签署知情同意书。

纳入标准：所有患者均为首次发病，并且在中风发作后48 h内入院治，符合《中国急性缺血性急性脑卒中诊治指南2010》[6]诊断标准，并经颅脑CT及MRI确诊。

排除标准：合并脑出血、脑梗死或短暂性脑缺血史者；合并血液系统疾病或静脉血栓患者；合并感染性疾病、心肝肾功能缺陷、颅脑方面癌症或精神障碍患者；入组前 1个月之内有免疫抑制剂、血小板药物使用史。

1.2 血清Th17/Treg、TGF-β1和IL-17水平测定

观察组入院次日，对照组体检当日，取空腹肘静脉血5 mL，3 000 r/min 离心10 min，取血清，采用流式细胞仪测定血清Th17/Treg水平，采用酶联免疫吸附法测定血清IL-17水平，采用Elecsys2010电化学全自动免疫分析仪测定TGF-β1水平，试剂盒购自于武汉华美生物科技有限公司，操作严格按照说明书进行。

1.3 急性脑卒中病情严重程度以及预后判断[7-9]

急性脑卒中病情严重评估：入院时采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Strokecale, NIHSS)进行评价，依据评分结果，将患者分为轻度组(≤3分)、中度组(4～15分)和重度组(≥16分)。

预后评价：出院后3个月应用改良Rankin量表(ModifiedRankinScale, mRS)进行评价，依据评分结果将患者分为预后良好组(mRS评分0～1分)和预后不良组(mRS评分2～6分)。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 急性脑卒中组和对照组的Th17/Treg、TGF-β1和IL-17的水平比较

与对照组比较，观察组患者血清Th17/Treg明显升高，TGF-β1和IL-17水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

表1 观察组与对照组Th17/Treg、TGF-β1和IL-17的水平比较

2.2 不同病情严重程度患者血清Th17/Treg、TGF-β1和IL-17的水平比较

根据入院后24 h NIHSS评分，观察组患者被分为轻度48例，中度44例，重度55例，3组患者患者血清Th17/Treg、TGF-β1和IL-17比较差异均存在统计学意义(P<0.05)，其中中度组、重度组血清Th17/Treg水平均明显高于轻度组，TGF-β1、IL-17明显低于轻度组，中度组与重度组比较也存在显著性差异(见表2)。

表2 不同病情严重程度患者血清Th17/Treg、TGF-β1和IL-17水平比较

2.3 不同预后患者血清Th17/Treg、TGF-β1和IL-17水平比较

观察组的预后不良48例，预后良好99例。预后不良组血清Th17/Treg显著高于预后良好组，TGF-β1和IL-17则显著低于低于预后良好组，差异具有统计学意义(P<0.05)(见表3)。

表3 预后良好组与预后不良组患者血清Th17/Treg、TGF-β1和IL-17水平比较

2.4 Th17/Treg、TGF-T1、IL-17与急性脑卒中的病情严重程度以及预后的相关性

Perason相关性分析显示，血清Th17/Treg与INHSS、mRS评分呈明显正相关，TGF-β1和IL-17与NIHSS、mRS评分呈明显负相关(P<0.05)(见表4)。

表4 相关性分析

3 讨 论

急性脑卒中有着发病率高、致残率高、病死率高的特点。每年急性脑卒中新发病例多达1 500万，其中500万死于该病，其余存活患者会存在不同程度的残疾[10]。根据第三次全国国民死亡病因调查数据结果显示，在我国急性脑卒中已经成为首位致死的病因，严重威胁国民健康水平。因此急性脑卒中的预防和治疗已经刻不容缓[11]，而寻找良好的生物学标志以帮助临床对急性脑卒中进行诊断、预防和治疗则有重要意义。

Th17细胞与Treg细胞分别为Thl和Th2的CD4 T细胞亚群，可进行独立分化及调节，二者通过分泌多种细胞因子参与人体的炎症反应中。在正常情况下，Th17和Treg处于平衡状态，而当其平衡被打破时，会引起机体内环境紊乱，导致多种疾病的发生。近年来研究发现[12]，Th17表达升高和(或)Treg表达降低与动脉粥样硬化的形成有关，二者比例相比任一单一检测更能体现疾病的发生和发展。还有学者[13]指出，急性脑卒中患者外周血Th17比例相比健康对照组明显增加，Treg比例明显降低，而且Th17/Treg的比值会随着脑损害的加重而相应发生明显变化。本研究显示，缺血性急性脑卒中患者的Th17/Treg相比对照组明显升高，且与患者病情严重程度和预后有关，病情越重、预后越差者Th17/Treg水平越高，其与患者NIHSS评分、mRS评分均呈明显正相关(P<0.05)，提示急性脑卒中患者的Th1、Treg平衡被打破，这种失衡与患者病情严重程度和预后有关，这与上述研究结论一致。作为初始CD4+T细胞分化而成的两种不同的亚型，Th17和Treg在功能上互相拮抗，前者具有促进免疫炎症反应的作用，后者则可通过各种抑炎因子的分泌来抑制炎症反应的发生发展。Th17、Treg失衡会使机体免疫系统被激活，引发促炎因子增加和抗炎因子升高，降低了免疫效应，从而加重了免疫反应状态的发展，进而可能导致急性脑卒中的发生发展。TGFβ1是一种对多种类型的细胞，包括小胶质细胞、星形细胞和神经元都可发挥作用的细胞因子，其具有多种生理功能，包括抗氧化、抑制细胞凋亡、缓解炎性反应、阻止星形细胞及小胶质细胞反应。研究发现，TGF-β1可抑制缺血，其能通过调节中枢神经系统炎症反应来缩小急性脑卒中患者的梗死病灶面积，能减轻脑水肿，还能促进脑部微血管再生，修复损伤脑组织[14]。对不同病程急性脑卒中患者的脑梗死灶面积进行监测时发现，当病灶的面积增加时，患者的外周血清中的TGF-β1浓度较先前明显降低。本研究显示，观察组患者的血清TGF-β1相比对照组明显降低，且观察组病情越重、预后越差者，TGFβ1水平越低，患者血清TGFβ1与NIHSS评分和mRS评分均有明显相关性，提示TGFβ1参与了急性脑卒中的发生发展，其血清水平检测对于患者病情和预后评价有重要参考价值。TGF-β1浓度的下降能反映急性脑卒中患者发病后细胞因子网络的致炎状态，其浓度降低的原因可能与炎性环境刺激后其在组织中的积聚和机体对其的过度利用有关，但其具体的与疾病的关系和作用机制还需进一步深入研究。细胞因子IL-17是免疫T细胞诱导产生的反应，是炎症反应的早期启动因子[15]，发挥作用的主要机制是促进前炎性细胞因子的分泌从而促进炎症反应的发生发展。IL-17和受体结合后，可通过MAP激酶途径与NF-kB途径发挥其促炎作用。Th17细胞产生的IL-17可有效介导炎症细胞动员的兴奋过程，进而有效介导组织的炎症反应，因此我们推测IL-17与TGFβ1和急性脑卒中的病情发展有着密不可分的关系。本研究发现，观察组和对照组的血清IL-17比较，差异也存在统计学意义，与对照组相比，观察组的血清IL-17水平显著降低，而且其与患者病情严重程度和预后具有明显相关性，患者病情越严重、预后越差，血清IL-17水平越低，这说明IL-17也可作为评价急性脑卒中患者病情严重程度和预后的一个辅助参数。

综上所述，Th17/Treg、TGF-β1和IL-17与急性脑卒中患者病情严重程度和临床预后相关，可能是通过介导相应的炎症反应来发挥作用，可以为急性脑卒中患者病情严重程度和预后情况的临床评价提供重要参考。