禽传染性支气管炎的诊断

余荣珍/河南省南阳市镇平县农业综合行政执法大队 474250

禽传染性支气管炎病毒(IBV)是一种高度传染性的病原体，在鸡体内，病毒主要通过气溶胶和摄入被粪便污染的水和饲料传播。由此引起的疾病，传染性支气管炎主要表现出不同承兑呼吸道疾病.此外，病毒可以感染呼吸系统的另一部分，包括肺和气囊。然后，根据病毒株的不同，病毒可以在其他上皮细胞中发现，如输卵管和肾上皮细胞，并在其他组织中引起感染。

IBV 会引起呼吸道疾病，尽管该病毒的复制并不局限于呼吸道。IB 是鸡(家禽)的主要呼吸道病毒，在所有饲养鸡的国家都流行。IBV 的宿主范围被认为仅限于鸡，尽管基因上非常相似的冠状病毒会引起火鸡的疾病。IBV在全球范围内发生，无论是在大规模饲养的鸡还是在小规模饲养的鸡。

IBV 可引起鼻和气管纤毛上皮细胞的调节，临床表现与第1 组和第2组人类冠状病毒引起的普通感冒相似。尤其是几天或几周大的鸡，会流鼻涕、咯咯作响(类似于打喷嚏)、流泪和昏昏欲睡。有些鸡表现出呼吸道下部的症状，肺部可观察到小面积的肺炎。肺部病毒的滴度可能与鼻腔和气管相似，但支气管炎不被认为是引起肺炎的原因。

受害最严重的是几天或几周大的小鸡。有些可能直接死于病毒感染，但更多的死于继发性细菌感染。幼龄和成熟的鸟类较少受到IBV 感染，但在产蛋期感染该IBV 的经济后果可能是灾难性的，因为产蛋量急剧下降，而且通常不会在整个群体中恢复正常。

IBV 生长在呼吸道以外的许多上皮表面。虽然许多消化道组织对IBV易感，但肠道组织的感染通常不会在临床上表现出来。肾炎在自然感染IBV的肉型禽类中所占比例并不少见，环境因素起着一定的作用。有些IBV 株具有肾致病性，也就是说，当实验将IBV接种到无病原体鸡中时会引起肾炎。IBV 对输卵管细胞也很敏感，这可能导致鸡蛋产量减少。

1 发病机理

传染性支气管炎病毒主要感染呼吸系统。然而，一些变异体和几个野生分离株会影响鸡的生殖、肾脏和消化系统。疾病的发病机理因所涉及的系统以及病毒的毒株而异。

1.1 寄主敏感性虽然家禽(鸡)和野鸡被认为是IBV 的天然宿主，其他IBV 类冠状病毒已在其他鸟类中被鉴定，包括野鸡、孔雀、火鸡、鹅、鸽子、企鹅、鹌鹑、鸭子和亚马逊鹦鹉。火鸡冠状病毒(TCoV)与鸡传染性支气管炎病毒(AIBV)的抗原性相似。已在与家禽有密切接触的人身上发现了抗IBV的抗体，但还没有报告说这种病毒会引起人类的临床疾病。

1.2 年龄和品种倾向所有年龄和品种的鸡对IBV 感染都很敏感，但与成年鸡相比，这种疾病的程度和严重程度在雏鸡中是明显的。同样，对感染的抵抗力也随着年龄的增长而增加。实验证据表明，与151 品系相比，C系白莱茵鸡对M41 IBV 的抗性更强，尽管两者的病毒脱落率相似。可能受鸡主要组织相容性复合体遗传多态性的影响。

1.3 感染与传播病毒通过呼吸道分泌物和受感染家禽的粪便传播。受污染的物体和用具可能会帮助病毒从一群传播到另一群。病毒在气雾剂传播后24h 出现在气管、肾脏和法氏囊。IBV 持续存在的性质尚待阐明；然而，在盲肠扁桃体(长达14 周)和粪便(20周)中检测病毒可能表明粪便脱落在病毒传播和持续中的作用。

1.4 潜伏期感染剂量和感染途径不同，IBV 潜伏期较短。例如，虽然经气管途径感染的时间可能短至18h，但眼内接种可导致36h 的潜伏期。

2 临床表现

在宿主中，最初的感染发生在腺、气管、肺和气囊的上皮。病毒然后转移到肾脏和泌尿生殖道，以建立全身感染。在这方面，IBV 的严重程度和临床特征取决于所涉及的器官或系统。呼吸系统感染可能导致临床症状，如喘息，打喷嚏，气管罗音，无精打采，流鼻液。受影响的鸟显得无精打采，枯燥无味，羽毛蓬乱。其他迹象可能包括体重减轻。

3 诊断

传统的和更先进的方法已经被用来诊断IBV 感染。检测试验的选择取决于样品类型、试验材料和设施的可用性、试验报告时间、试验目的以及试验是在现场进行还是在实验室进行。

3.1 血清学在过去，病毒中和(VN)和血凝抑制等血清学检测方法被广泛应用于IBV 毒株的检测和血清学分型。这些测试也被用来测量接种疫苗后的保护。血清型特异性抗体通常是用HI检测的，尽管HI 试验不那么可靠。另一方面，ELISA 检测更敏感，易于用于现场使用和监测接种或暴露后的抗体反应。然而，不同的IBV 血清型的出现并不会与常见的抗血清发生交叉反应，这使得血清学试验在分类新的或正在出现的IBV 分离物。

3.2 病毒分离鉴定病毒分离是诊断IBV 的金标准。在疾病早期采集样本并确保正确的取样技术是成功分离IBV 的重要关键。为了支持从拭子中成功分离病毒，建议在将样本送到实验室之前，将样本放入PBS 缓冲溶液中。如果要收集组织样本，推荐的组织是气管、肾脏、前胃、扁桃体和输卵管。组织样本必须在鸡死后立即无菌采集，放置在无菌、密封严密的塑料标本袋中，然后运至实验室进行进一步加工。由于病毒在卵或细胞培养中传代所需的时间等严格的技术要求和因素，限制了将病毒分离作为IBV 感染诊断方法的选择。尽管如此，不同的实验室仍采用不同的隔离方法。

4 疫苗接种

肉型雏鸡通常在孵化当天通过喷雾在孵化室接种疫苗。这些禽类在这么小的日龄就接种了疫苗，部分原因是由于经济方面的原因。此外由于IBV在世界上许多家禽饲养地区都是地方病，因此需要尽早加以保护。IBV 感染对雏鸡的影响较大。现代肉鸡只在6周大的时候就开始加工，所以疫苗接种必须要早。

一次减毒活疫苗接种后对呼吸道的保护被发现是短暂的；疫苗接种后6 周和9 周受保护鸡的数量分别下降。在特定血清型IBV 疫苗始终无法提供可接受的保护以抵御野外挑战的地区，首次应用疫苗后2～3 周，可以对这些禽类进行重复接种。

一些IBV 菌株具有明显的肾致病性。例如，B 1648 肾致病株对商品肉鸡的实验性气管感染，导致68 只鸡中约有1/3 在9d 内死亡。通过粗喷剂接种，并在4 周后的挑战中完全防止死亡。用非同源的商业上可用的疫苗接种疫苗，虽然没有完全接种，但降低了死亡率。病毒分离证实，同源疫苗阻止了病毒在气管内的可检测生长，但异源疫苗不起作用。用同源疫苗接种可检测到IBV 的雏鸡的数量减少了84%，而异源疫苗则完全减少了84%。

灭活油乳剂IBV 疫苗是20 世纪60年代和70年代发展起来的。其目的是研制一种疫苗，使母鸡具有持久的免疫力，防止蛋产量下降。然而，用一剂灭活的IBV M41 株对11 只鸡进行免疫，可使36%～45%的试验鸡被保护。1 0 0μg 的保护效果不如5μg，在第2 次实验中，10μg 剂量后，对17 只鸡的保护率为2 9%～76%，在第3 次实验中，10 只鸡中有4 0%的鸡受到保护。这三个实验中使用的病毒数量可能比以前的研究人员多，这也是部分成功的原因。

IBV 核衣壳蛋白(N) 在保护性免疫中的作用是研究的一部分，4 周龄用灭活IBV 免疫雏鸡，6 周后再用灭活IBV 免疫雏鸡。通过对两组鸡气管纤毛活动的评估，分别对1/8 和8/8 鸡进行了保护。免疫荧光法检测感染气管细胞的保护程度稍低。10 只鸡中有40% 和20% 的鸡在气管和肾脏有保护作用。这些百分比在四次剂量后没有增加。用灭活的肾致病株对鸡进行三次免疫。8 只鸡经两次接种后，肾脏和气管的保护分别为50%和13%，三次接种后分别提高到88%和50%。

常用的方法是用活疫苗给雌性幼禽进行2 次或2 次以上的疫苗接种，然后在禽类进入产蛋期时注射一剂灭活疫苗。活疫苗对幼龄动物起到保护作用，并对后来的灭活疫苗的免疫应答起主要作用。

应用IBV 免疫血清对呼吸道感染无保护作用，但可是IB 发病延迟，发病持续时间较短。