新城疫的流行病学、临床症状及诊断方法

张继希/河南省濮阳市经济技术开发区畜牧局 457600

1 ND 的流行历史及分布

鸟类可在全球范围内传播大量的微生物，这些微生物中可能存在对圈养和散养鸟类（包括家禽）有害的病原微生物。在过去的几年一发现NDV 和流感病毒可通过候鸟在全球范围内传播，这表明野生鸟类物种可作为生物载体或天然宿将NDV 传染至家养和野生鸟类种群中。ND 于1926年在英国泰恩湖畔纽卡斯尔首次被记录，同时在爪哇岛也有相关报道，尽管在某些研究中表明ND 可能在更早的时间有暴发。之后，菲律宾、印度、日本、澳大利亚和肯尼亚也发现了新城疫。到1952年，在巴勒斯坦、叙利亚、法属刚果（今加蓬、刚果共和国和中非共和国）、西西里岛、欧洲和美国也有报道。在1960年代，夏威夷、加拿大、墨西哥、中美洲和南美洲、中国和整个欧洲都报告了ND。ND 的广泛分布和每年暴发的大量报道表明，尽管在全球内使用疫苗防控ND，但仅通过疫苗接种防控ND 在某些情况下仍无法控制该病。在2006～2009年间受ND 影响最严重国家分别是伊朗、南非、以色列、中国、越南、哥伦比亚、罗马尼亚、韩国、科威特和瑞典。从2006年到2009年，平均每年有56个国家暴发ND，在报道的疾病中，ND仅在狂犬病之后排名第二。从2008年到2010年，77 个国家确定并轻重暴发了ND，随后在2013年有68 个、2014年61 个和2015年56 个。但ND 在部分地区的报告不足，特别是NDV 流行比较强的地区，这也表明这些数字并不明明确当地已经很糟糕的ND 流行情况。许多受ND 影响的国家也缺乏良好的生物安全措施，因此在疫苗和生物安全措施得到改进之前，ND 可能会在这些地区持续存在。在二十世纪70年代和90年代，NDV 在野生鸟类中分离出来，在美国发生了NDV 从野生鹦鹉/鸬鹚传播到鸡的事件。这些研究结果表明病毒传播时应对野生鸟类中的ND进行持续监测。在印度，许多鸟类物种，包括鸡、火鸡、鹌鹑、鸸鹋、鸭、孔雀、鸽子、珍珠鸡已发现作为NDV 的潜在感染宿主。

2 ND 的流行病学

NDV 除可感染鸡外，还可感染其他鸟类，如鸽子、鸬鹚、鹦鹉、雉鸡、孔雀、野生水禽。一般来说，火鸡对NDV 的抵抗力略高于鸡，但一些适应火鸡或其他野生鸟类的毒株更容易感染该物种。鹅和鸭对NDV 感染已表现出一定的抵抗力，鸭很少表现出临床症状，而鹅则表现出略高于鸭的易感性，这取决于NDV 毒株。据报道，目前NDV 可感染的鸟类种类至少有236种，而NDV 可通过突变跨越获得跨越种间屏障能力。此外，从野生鸟类中分离出的NDV 毒株可导致ND 在鸡中的暴发。例如，在迁徙的鸬鹚身上分离出的NDV 被确定是家禽中流行ND 的可能来源。野生鸟类和家禽之间的ND 传播经常发生，而野生鸟类在NDV 进化和适应环境中起关键作用。NDV 主要通过吸入或摄入受感染鸟类的粪便和呼吸道分泌物中排出的病毒传播，传播的时间可能不同。已发现一些病毒可通过鸡蛋传播给孵化的小鸡。此外，发现NDV 可存在于鸟类所有部位，并且如果在冷藏温度下保存，NDV 能够在鸡皮和骨髓存在数个月。NDV 在环境中相对稳定，因此可能通过污染物传播给家禽。已发现NDV 在被感染鸟类污染的禽舍中，在夏季可存活7d，在春季存活14d，冬天存活30d。一项研究证明在不同材料和温度下NDV 可存在不同的时间，表明NDV 是一种在多种类型材料和不同温度下高度稳定的病毒，并证实了污染物作为NDV 引入和传播过中的潜在载体。ND 的潜伏期通常为2～15d，鸡类和鸟类（鸡、火鸡、松鸡、野鸡和鹧鸪）在感染后长达1～2 周内会传播NDV，然而鹦鹉类鸟类已被证明在感染后的数月至1年内可传播传染性病毒，并主要通过呼吸道分泌物和粪便传播。

3 ND 的临床症状及病理变化

ND 的临床表现和病理变化与许多病毒和细菌性疾病相似，并常出现混淆扰乱判断。最常见与ND 区分的疾病有高致病性禽流感、传染性支气管炎、传染性喉气管炎和禽痘，细菌病有禽霍乱、支原体病和鹦鹉热。将ND 与这些疾病区分开是初步诊断的关键任务。根据临床和病理表现，可出现五种形式的ND。最严重的的形式是速发型ND，其特征是死亡率和发病率均接近于100%。速发型ND 临床表现有结膜炎、流鼻涕、呼吸困难、腹泻、羽毛竖起、虚脱、震颤和瘫痪。剖检时可见整个消化道都出现溃疡性出血，尤其是两胃交接处和盲肠扁桃体。在一些内脏器官中也可观察到坏死灶，如脾脏、肝脏和肠道相关淋巴组织。神经系统中，出血管周围出现套扎之外，在死于神经症状的鸟类可以观察到由NDV 引起的神经损伤。另一种形式是速发型嗜中性型，其特征是出现神经系统和一些呼吸道临床症状，不涉及胃肠道病变。通常被感染的鸟类会表现出角弓反张、颤抖、头部扭曲等。即使在表现出典型症状的死亡的鸟类中，肉眼眼观病变常常不存在，然而在组织学上，浦肯野纤维坏死和血管够味套叠发生率很高。中源性ND 还与神经系统和呼吸道症状有关，死亡率非常低。在正常条件下临床症状与产蛋率下降和中度呼吸系统疾病有关。大体的病理学变化也不明显，由于继发性细菌感染仅表现出轻微的脾脏肿大和其他病变。组织病理学变化包括神经胶质细胞增生和血管周围套叠，可能会伴有胰腺坏死。ND 的其他两种表现形式有缓慢型ND 和无症状肠道型ND，通常与临床轻度病变或无临床表现有关。

4 ND 的诊断方法

禽流感、传染性支气管炎和传染性喉气管炎病毒等禽呼吸道病原体都被认为是在ND 临床表现鉴定常引起混淆的病原体。因此，在ND 的诊断中，快速找到其他病原体十分重要，并决定着ND 的正确的疾病治疗与控制措施。

在ND 的诊断中，NDV 的分离是确诊ND 的金标准，通常用于验证其他检测方法的准确性。NDV 的分离所需的样品取决于病毒的复制位点和病毒脱落途径决定。在活禽中，所需的样品包括在含或不含抗生素的生理盐水或其他等渗溶液中收集的泄殖腔和口咽拭子。若家禽处于濒死期或已死亡，除了泄殖腔和口鼻拭子外，样品还包括肺、肾、肝、肠、脾和盲肠扁桃体，分别收集并合并收集。血清学检测在NDV 监测中应无法区分是否接种疫苗动物和自然感染动物而被低估。尽管如此，血清学检测仍是许多诊断实验室来评估疫苗接种效果的最主要方法。ND 的最简单和最便宜的血清学检测方法是血凝抑制试验。

NDV 血清学中使用另一种常用方法是ELSIA，许多夹心、竞争或间接ELISA 试剂盒已在市场上出售。该方法具有高度的敏感性，而结果与血凝抑制试验结果相似。病毒中和试验是另一种血清学检测方法，特别适用于测定NDV 特异性中和抗体。

传统诊断技术的缺点证明需要开发更快速和准确的ND 诊断方法，其中，NDV 的RT-PCR 是最常用的分子诊断方法。该方法可以快速准确的检测临床样品中NDV 的基因组，灵敏度较高，然而由于NDV 的新型毒株的不断出现以及变异，需要定期更新该方法中的引物，以解决由于引物为点突变而造成的无法检测出的变异状态。

荧光定量PCR 检测方法速度更快准确性更高，但其操作方法和所需的仪器设备是该方法普遍应用的主要问题。最近，开发了一种环介导等温扩增的检测方法，该方法简单、灵敏且价格低廉，使其十分有希望成为农村地区快速诊断方法之一，然而该方法的引物序列设计的困难性是该方法研制中的一大难题。基于分子的诊断方法无疑彻底该病了传染病诊断的世界，因为它在识别病原体方面具有简单、快速、灵敏的特点。然而，这些检测中大多数一次只能检测出一种或几种病原体。微阵列杂交技术能同时检测出成百上千个目的病原而不会影响检测的灵敏度和特异性。

NDA 微阵列是新兴的诊断方法之一，在不久的未来可能会胜过传统的NDV 分型技术。该方法具有高度敏感性、特异性，并同时检测临床样品中多种病原的能力。新一代测序的出现彻底改变了传染病的诊断，该方法不仅在追踪疾病流行情况方面具有重要作用，还有助于快速、灵敏和特异性检测和区分单个宿主的混合感染情况。

5 结语

在ND 流行的地区，该病的预防和控制应包括扑杀染病动物、主动监测、提高生物安全性和严格的疫苗接种计划。任何策略都需要伴随着严格的政策和程序措施，其中包括对疫病的记录和病料保存，对于感染动物的处理等。而为了有效的控制家禽中NDV 的感染，必须快速、准确的确定病原体。另一方面，当前使用的NDV 的灭活或减毒疫苗均只能预防临床疾病而不能防止病毒脱落，尤其是异源病毒攻击后。而一种优秀的疫苗不仅能预防临床疾病还可减少和消除病毒脱落，从而增加引起感染所需病毒的数量。综上所述，还需进一步对ND 的病原学和流行病学研究，并持续不断更新研发新型的诊断试剂和疫苗。