血清淀粉样蛋白A、血管内皮生长因子与类风湿关节炎相关性研究

袁健生，周 念，蔡 甜，杜燕娇，贾 岩，蒋子裕

(南方医科大学附属南海医院检验科，广东 佛山 528200)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜慢性炎症为主的自身免疫性疾病，滑膜增生形成血管翳，似肿瘤样生长，可引起骨关节的侵蚀破坏，活动受限，致残率高[1-2]。降低RA疾病活动度，获得临床缓解率是治疗RA的主要目标，而动态监测RA病情变化对临床治疗决策及预后评估具有重要作用。目前尚无特异性生物学指标能够判断RA疾病活动变化，而寻找能够RA病情活动度的敏感性生物学指标对疾病评估是尤为重要的。淀粉样蛋白A(serum amyloid A,SAA)是一种急性期蛋白，在疾病炎症防御、免疫应答和脂质代谢等方面发挥重要作用。研究证实RA患者的滑膜组织中滑膜细胞、内皮细胞和巨噬细胞SAA表达上调，能够判断疾病发生发展[1,3-5]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在RA的滑膜血管翳的形成过程中发挥着关键作用，能够促进滑膜组织新血管形成，增强血管通透性，在RA发病过程中具有重要作用[2,6-7]。目前在RA进展不同时期及不同疾病活动度与SAA和VEGF的相关性尚缺乏足够的证据。本研究拟通过检测RA患者血清VEGF与SAA及相关炎性因子在疾病进展的不同时期变化及其相关性分析，为RA的诊断及治疗提供了新思路。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2019年10月—2020年10月我院诊治的RA患者98例，其中男性25例，女性73例，平均年龄(57.3±12.0)岁，选择同期体检健康者为对照组45例，男性11例，女性34例，平均年龄(54.4±13.1)岁，2组患者在性别、年龄等差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。RA诊断根据2010年美国风湿病学会和欧洲风湿病防治联合会分类标准，高度活动组43例，中度活动组34例，低缓组21例。纳入标准：符合RA诊断，无其他炎性疾病和自身免疫性疾病者，RA患者均为初诊治或超过3月未用激素或免疫抑制剂治疗者；临床资料完整同意参加此项研究者；排除标准：合并其他风湿性疾病；恶性肿瘤患者；严重心脑血管、肝肾器官疾病患者；合并其他自身免疫系统疾病和炎症疾病；妊娠期妇女；临床资料不全或不愿意参与本研究者。

1.2观察指标及分组 收集所有研究对象一般临床资料，包括年龄、性别、体重指数(body mass index,BMI)、关节压痛数、关节肿胀数、血清类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、抗环瓜氨酸肽(anticyclic citrullinated peptide,CCP)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、血常规、血脂和血糖水平等，抽取受试者清晨空腹静脉血5～10 mL，采用胶乳增强免疫比浊法对SAA进行检测，检测限5～1 200 mg/L，检测仪器奥林巴斯AU5800全自动生化分析仪，采用酶联免疫吸附法对VEGF进行检测。疾病活动度评分：根据类风湿关节炎患者病情评分(disease activity score 28，DAS28)，高度活动组：DAS28>5.1分，中度活动组：3.2

1.3统计学方法 应用SPSS 21.0软件进行数据分析，计量资料数据组间比较采用t检验或Mann-Whitney U 检验，多组间比较采用单因素方差分析、SNK-q检验。计数资料比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman进行相关性分析，采用ROC曲线分析SAA和VEGF预测中高活动度RA组的诊断价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1RA患者一般临床资料分析 不同活动度RA患者与健康组相比，组间年龄、性别、病程间差异无统计学意义(P>0.05)；与低缓组比较，疾病活动相关指标如关节压痛数、关节肿胀数、抗CCP抗体、ESR、CRP、DAS28评分明显升高，其中高度组升高程度最大，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 RA患者基本临床资料比较Table 1 Comparison of basic clinical data of RA patients

2.2不同活动度RA患者与对照组血清SAA和VEGF水平分析 SAA，VEGF表达水平在RA组明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。随着疾病活动度增加，SAA和VEGF表达水平明显增加趋势，高度活动组的SAA和VEGF表达水平明显高于健康对照组和低中度活动组(P<0.05)，见表2。

表2 RA不同活动组中血清SAA和VEGF比较Table 2 Comparison of serum SAA and VEGF in different RA activity groups

2.3RA患者血清SAA和VEGF水平与临床资料的相关性分析 经Spearman相关性分析，SAA和VEGF表达水平与关节压痛数、关节肿胀数、ESR和DAS28评分呈正相关性(P均<0.05)；但与年龄、病程、抗CCP抗体、CRP无明显相关性(P均>0.05)，见表3。

表3 RA组血清中SAA和VEGF与临床资料的Spearman相关性分析Table 3 Spearman correlation analysis of SAA and VEGF in serum of RA group with clinical data

2.4SAA和VEGF对中高活动度RA患者的诊断价值 ROC曲线显示，SAA和VEGF对中高活动度RA患者有预测价值(P<0.05)，其中SAA和VEGF联合诊断对中高活动度RA患者预测价值最高，AUC为0.871，SAA和VEGF分别为0.856和0.773(P均<0.05)，见表4和图1。

表4 SAA和VEGF对中高活动度RA患者的ROC曲线分析Table 4 ROC curve analysis of SAA and VEGF in patients with moderate to high activity RA

图1 SAA和VEGF对中高活动度RA患者的ROC曲线

3 讨 论

RA是一种自身免疫性疾病，女性患病率高，导致周围关节疼痛和肿胀，甚至出现不可逆的软骨和骨骼破坏，而对RA患者疾病活动度对病情评估和预后判断是十分重要的。RA疾病活动度可通过测定综合指数来监测，如DAS28，主要综合了关节的压痛和肿胀数量，以及ESR或CRP血清含量，能够评估RA患者活动度变化[5,8-9]。目前RA诊断主要依靠临床症状，却缺乏特异性实验室指标。另外，既往研究提示血清中SAA和VEGF水平与RA活动度相关性，但尚缺乏充分的临床证据，且很少研究探讨RA患者的预测生物标志物。因而，本研究通过血清中SAA和VEGF水平与RA患者相关性研究，为指导临床诊治提供重要的参考依据。

RA是一种慢性全身性关节和关节外组织炎症性疾病，其特征为促炎和抗炎免疫机制失衡。以往研究提示，RF、CCP、CRP、ESR、血常规等指标对RA具有诊断和病情评估价值[3,10-11]。本研究通过对不同活动度RA患者中，发现与低缓和中度活动组相比，高度活动度的RA患者中CCP、CRP、ESR、关节压痛数和肿胀数较高，提示高度活动度RA患者存在急性炎症反应，这些指标与RA疾病的发生发展密切相关。

SAA作为一种急性时相反应蛋白，主要由肝脏合成分泌，能够诱导多种炎症因子、黏附因子及趋化因子的表达，调节炎症反应和免疫反应；同时，RA主要病理特征为滑膜血管翳生成，是引起软骨和关节病变的主要原因，而血管生存是构成血管翳[4,12]。研究报道SAA可诱导人血管内皮细胞、滑膜成纤维细胞及滑膜组织产生趋化因子如白细胞介素8(interleukin-8，IL-8)和单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)，这些趋化因子是重要的炎症介质，在诱导中性粒细胞、单核细胞及淋巴细胞向滑膜组织迁移过程中起着关键作用[13]。在本研究中，血清SAA浓度随RA严重程度的增加而升高，与既往研究存在一致性[4-5,14]。且本研究中SAA 表达水平与关节压痛数、关节肿胀数、ESR和DAS28评分呈正相关性，SAA水平对中高活动度RA患者具有诊断价值，表明RA炎症反应和新生血管翳形成中，可能促进SAA释放入血，促进免疫炎症反应和血管生成有关。

VEGF包含VEDFR1和VEGFR2两组受体，VEGFR1主要通过p38 MAPK信号通路参与内皮细胞和单核/巨噬细胞的迁移以及与癌症和炎症相关的血管生成。VEGFR2主要通过Src和PKC信号通路介导内皮细胞生长、细胞存活和血管通透性。研究提示，VEGF参与可促进滑膜增生和血管生存，对于RA的疾病进展起着重要作用[6,10-11,15-16]。本研究中发现，RA患者VGEF水平明显升高，随RA病情活动度升高更为明显，且VGEF 表达水平与关节压痛数、关节肿胀数、ESR和DAS28评分呈正相关性，VGEF水平对中高活动度RA患者具有诊断价值，表明VEGF参与了RA免疫炎症和血管形成过程，有助于疾病判断和病情评估。另外，既往研究提示血清SAA和VGEF等单一的血清学指标对RA活动度具有重要的诊断价值，尚缺乏联合诊断的证据，与既往研究不同之处，本研究中发现，VEGF与SAA联合诊断对中高活动度的RA诊断价值最高，可见，VEGF与SAA对RA的发生发展中发挥着重要作用，在今后的临床实践工作中，我们应对RA患者加强这些敏感性生物学指标检测，同时RA实现持续性缓解是可行的，对患者接受目标治疗情况下进行严密监测，并予以积极治疗可获得临床缓解[17]。

综上所述，RA患者中血清SAA和VEGF水平明显升高，且随着活动度增加，随着疾病活动度增加，SAA和VEGF表达水平明显增加趋势，高度活动组的SAA和VEGF表达水平明显高于健康对照组和低中度活动组，SAA和VEGF表达水平与关节压痛数、关节肿胀数、ESR和DAS28评分呈正相关性，且SAA和VEGF对中高活动度RA患者有预测价值，因此，今后可尝试提供干预SAA和VEGF介导的炎症反应，可减轻RA的疾病进展和血管翳生成，为RA的治疗带来新的治疗方向。