甲氧苄啶快速检测试剂盒质量评价样品的分析

叶雅真 骆和东

摘 要：为做好商品化甲氧苄啶胶体金快速检测试剂盒质量评价工作，本文采用参比方法，参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL003-2018）对甲氧苄啶评价样品进行稳定性和均匀性考察。结果显示，甲氧苄啶制备样品稳定性符合要求，在14 d考察期内可用于试剂盒质量评价，制备样品均匀性符合要求，可用于试剂盒质量评价。

关键词：甲氧苄啶;胶体金免疫层析;质量评价;食品安全快速检测

Abstract： In order to evaluate the quality of commercial methylrim colloidal gold rapid detection kit， the stability and uniformity were investigated by reference to （CNAS-GL003-2018）.The results showed that the sample stability of trimethoprim preparation met the requirements， can be used for the kit quality evaluation during the 14 d investigation period， the preparation sample uniformity met the requirements， and can be used for the kit quality evaluation.

Keywords： trimethoprim; the principle of colloidal gold immunochromatography; quality assessment; rapid detection for food safety

甲氧苄啶（Trimethoprim，TMP）是一种抗菌增效剂，可提高抗菌药在动物体内的利用率[1-5]。甲氧苄啶的广泛使用和不合理用药，使动物性食品中有药物残留，对人体健康造成危害。食品安全快速检测技术是一种快速定性（或半定量）的检测技术，大多在2小时内可以出具样品中目标成分含量符合或不符合国家相关限量要求的报告，虽然无法报告样品中目标成分的具体含量，但是实现了现场快速检测，为监管部门对食品安全的有效监管提供了便利的技术手段[6-15]。但由于国内快速检测产品生产门槛低，监管部门难以监管，市场上流通的快速检测产品质量参差不齐，符合监管需求的合格快检产品较少[6-8]。为做好商品化甲氧苄啶胶体金快检试剂盒质量评价工作，确保甲氧苄啶试剂盒的检测效果，本文参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL003-2018）对甲氧苄啶评价样品进行稳定性和均匀性考察[16]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

甲醇中甲氧苄啶溶液标准物质（BePure-26347YM，1 000 μg/mL，BePure）;乙腈（色谱纯，德国MERCK）;正己烷（色谱纯，德国MERCK）;正丙醇（分析纯，沪试）;甲酸（优级纯，德国MERCK）;磷酸氢二钠（分析纯，国药）;磷酸二氢钾（分析纯，国药）;有机过滤头（0.22 μm，津腾）。

1.2 仪器与设备

三重串联四极杆液相色谱质谱联用仪（Agilent 6470）;色谱柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，Agilent UPLC C18）;Milli-Q超纯水处理系统（美国Millipore）;电子天平（德国Sartorius）;微波炉（格兰仕）;台式离心机（美国Sigma）;移液枪（德国Eppendorf）;刀式研磨仪（德国Retsch）;pH计（瑞士METTLER TOLEDO）。

1.3 实验方法

胶体金免疫层析快速检测试剂盒一般适用于肌肉靶组织的检测。通過调研发现鸡肉是甲氧苄啶残留风险最高的食品，因此确定此次质量评价的样品基质为鸡肌肉组织。参比方法为《动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》（GB/T 21316—2007）[17]。经参比方法确证为阴性的鸡肉作为空白鸡肉样本。以空白鸡肉为基质，添加甲氧苄啶标准溶液，制成0 μg/kg、25 μg/kg 、50 μg/kg 3个添加水平的样品。用参比方法对制备样品进行均匀性和稳定性考察。

2 结果与分析

2.1 制备样品的稳定性检验

参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL003-2018）中稳定性检验-t检验法分析制备的甲氧苄啶加标样品的稳定性。统一制备甲氧苄啶加标样品用于稳定性检验，分装到50 mL离心管中，速冻保存。在第1 d、第7 d、第10 d和第14 d，分别随机抽取25 μg/kg和50 μg/kg 2个浓度梯度的甲氧苄啶加标样品各6份，用参比方法对制备样品进行稳定性检验。稳定性检验t临界值t0.05（10）=1.812 5。浓度梯度为25 μg/kg的甲氧苄啶加标样品在第7 d、第10 d和第14 d与第1 d相比较，t值分别为0.457 3、0.086 1和0.063 3，浓度梯度为50 μg/kg的甲氧苄啶加标样品在第7 d、第10 d和第14 d与第1 d相比较，t值分别为0.263 4、0.238 3和0.052 9，所有t值均

2.2 制备样品的均匀性检验

参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL003-2018）中均匀性检验-单因子方差分析法分析制备的甲氧苄啶加标样品的均匀性。统一制备甲氧苄啶加标样品用于试剂盒质量评价，分装到50 mL离心管中，速冻保存。随机抽取25 μg/kg和50 μg/kg 2个浓度梯度的甲氧苄啶加标样各10份，用参比方法对制备样品分别进行均匀性检验。查F检验临界值表可知，均匀性检验F临界值F0.05（9，10）=3.02。甲氧苄啶加标样品在25 μg/kg和50 μg/kg 2个浓度梯度的F值分别为2.57、2.90，均

3 结论

本文参照《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》（CNAS-GL003-2018）对甲氧苄啶评价样品进行稳定性和均匀性考察。结果显示，甲氧苄啶制备样品稳定性、均匀性均符合试剂盒质量评价要求，在14 d考察期内可用于试剂盒质量评价。

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[17]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中國国家标准化管理委员会.动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法：GB/T 21316—2007[S].北京：中国标准出版社，2007.