幽门螺旋杆菌感染患者血清miR-155表达与IL-6表达的相关性

王晶晶

黑龙江省佳木斯市中心医院检验科 154002

慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis，CAG)为临床上比较常见的消化道疾病，也是胃炎的主要类型，同时是胃黏膜炎性反应向癌变转化的重要节点[1]。慢性萎缩性胃炎具有一定的可逆性，为此进行早期诊治与发病机制分析具有重要价值。幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，Hp)是胃黏膜病变的重要致病因素，Hp感染能通过多种途径诱导胃黏膜上皮细胞损伤，诱发慢性萎缩性胃炎的发生[2]。微小RNA(micro RNA，miRNA)是大量存在于机体内的短小单链RNA，具有高度的保守性和非编码性[3]。在与特异性靶位结合后可通过影响基因的表达从而在多种生理病理过程中发挥重要作用，miR-155是miRNA的重要类型，与机体炎性反应、固有免疫应答、细菌感染等存在相关性，其表达上调与胃黏膜病变及胃癌发生发展具相关性[4]。胃肠道黏膜作为人体免疫系统的重要部分，主要由巨噬细胞、淋巴细胞、树突细胞等免疫细胞构成，从而参与调节自身免疫反应[5]。巨噬细胞表面抗原受刺激之后，辅助性T细胞可大量产生炎症因子，比如白介素-6(IL-6)，从而调节Th17细胞的分化，诱导自身免疫反应加快[6]。本文具体探讨了慢性萎缩性胃炎幽门螺旋杆菌感染患者血清miR-155表达与IL-6表达的相关性，以明确慢性萎缩性胃炎的发病机制。现总结报道如下。

1 对象与方法

1.1 观察对象 选择2019年3月—2021年3月本院消化内科诊治的64例慢性萎缩性胃炎患者为观察对象。纳入标准：符合慢性萎缩性胃炎诊断标准；临床表现为腹痛腹胀、呕血、恶心呕吐、反酸等症状；本院伦理委员会批准了此次研究；采样检测前未经任何治疗；入院前1个月无抗生素、质子泵抑制剂、激素使用史；患者签署了知情同意书；年龄20～75岁。排除标准：心、肝、肾等重要脏器严重功能障碍者；合并血液、免疫系统性疾病者；妊娠与哺乳期妇女；合并恶性肿瘤者。

1.2 方法

1.2.1 Hp检测：所有患者检查前空腹6h，口服13C尿素胶囊，30min后采用红外线能谱仪检测口服13C尿素胶囊前后气体标本的13C原子峰值，呼出气13C原子峰超出基线5%即为Hp感染阳性。

1.2.2 血清miR-155表达检测：取所有患者的空腹6h静脉血3～4ml，不抗凝放置30min后，3 000r/min 离心15min后，取上层血清。提取总RNA，使用紫外分光光度计测定并计算RNA浓度与纯度。采用SYBR Green real-time PCR法测定miR-155相对表达水平，将U6 sRNA 作为内参，总反应体系为20.0μl，表达水平进行2-△△Ct计算并进行对数转换。miR-155逆转录引物、miR-155PCR引物引物均由上海生工公司合成；Trizol、逆转录试剂盒、实时荧光定量聚合酶链反应试剂盒购自大连宝生物工程有限公司。

1.2.3 血清IL-6表达检测：取1.2.2中血清样本，利用ELISA 检测血清IL-6水平，所有操作均在标准条件下按试剂盒(广州锐博生物科技有限公司)说明完成。

2 结果

2.1 Hp感染情况 在64例患者中，Hp感染阳性44例(阳性组)，阳性率为68.8%。

2.2 一般资料 两组性别、年龄、病程、体重指数、心率、血压等一般资料对比差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组一般资料对比

2.3 血清miR-155表达水平及IL-6水平 阳性组的血清miR-155相对表达水平及IL-6水平高于阴性组(P<0.05)。见表2。

表2 两组血清miR-155相对表达水平及IL-6水平对比

2.4 相关性分析 在Hp阳性组中，Pearson分析显示血清miR-155表达与IL-6表达存在正相关性(r=0.762，P=0.000)。在64例患者中，Logistic回归分析显示Hp阳性是影响血清miR-155表达与IL-6表达水平的重要危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 影响血清miR-155表达与IL-6表达水平的多因素分析(n=64)

3 讨论

慢性萎缩性胃炎作为消化系统常见疾病，近年来发病率不断升高，可严重影响患者的身心健康。该病的病程比较长，难以彻底治愈且易恶变，多数患者无症状，为此进行早期检测具有重要价值。Hp作为一种在消化道黏膜中寄生的需氧细菌，与慢性萎缩性胃炎的发病密切相关[7]。本文结果显示，在64例患者中，Hp感染阳性44例，阳性率为68.8%。从机制上分析，Hp感染作为环境因素之一，已有多个研究报道其与慢性萎缩性胃炎癌发生、发展联系密切，也在胃癌发生及进展中发挥重要作用。Hp易定植于胃黏膜上皮细胞表面和胃黏液底层，可引起胃黏膜细胞发生变性、坏死，导致黏膜屏障受损。同时Hp感染可刺激产生多种细胞因子和炎症介质，激活人体免疫系统，引起炎性细胞大量聚集，从而导致胃腺体破坏，形成慢性萎缩性胃炎甚至是胃出血等。有学者的研究观察到胃癌中Hp感染可导致信号传导转录激活因子3(STAT3)磷酸化，激活STAT3炎性信号通路激活，从而影响到消化道疾病的发生、发展及预后[8]。

慢性萎缩性胃炎起源于胃黏膜上皮，早期进行诊治可根治，若不及时处理可发展为胃癌，对患者的生命健康有重大威胁。但慢性萎缩性胃炎的发生是由遗传因素、环境因素等多种病因相互作用的结果，也是一个相对比较长的过程。本文结果显示阳性组的血清miR-155相对表达水平高于阴性组(P<0.05)。miRNA是种长度17～25nt的非编码RNA，能通过与靶mRNA 结合来调控下游基因的表达。miRNA能通过转录后调控对消化道疾病相关基因表达起调控作用，某些miRNA发挥抑癌作用，某些miRNA发挥促癌作用。

miR-155是重要的固有免疫信号调节分子，在固有免疫应答中发挥重要作用，可调控Toll样受体(TLR)2 和TLR4通路，进而可诱导NF-κB信号通路活化，参与细菌脂多糖诱导神经胶质细胞炎性反应，有利于炎症因子的释放[9]。IL-6作为一种多细胞产生的多效性细胞因子，具有调节辅助性T细胞功能，可控制自身免疫应答，其表达在炎性反应和癌症两者之间具有重要关联性。同时IL-6可以促进中性粒细胞和单核细胞在炎症发生部位聚集，防止组织的过度损伤，从而产生保护效应。本文结果显示，阳性组的血清IL-6水平高于阴性组(P<0.05)，表明Hp感染可促进机体释放大量IL-6。

miR-155、IL-6在Hp感染阳性的慢性萎缩性胃炎患者的血清中出现了较为明显的变化，检测患者血清中miR-155、IL-6水平可能对慢性萎缩性胃炎的诊断有重要意义。本文Pearson分析显示，Hp感染的慢性萎缩性胃炎患者血清miR-155表达与IL-6表达存在正相关性(r=0.762，P=0.000)；Logistic回归分析显示Hp阳性是影响慢性萎缩性胃炎患者血清miR-155表达与IL-6表达水平的重要危险因素(P<0.05)。从机制上分析，miR-155的高表达可调控机体炎性反应的重要通路，在多种炎症因子释放调控中发挥重要作用，从而促进IL-6的释放。Hp也能通过不同途径诱发炎症反应损伤胃黏膜上皮组织，进一步刺激胃黏膜组织加剧炎症反应、激活免疫系统，从而导致血清miR-155表达与IL-6表达水平水平进一步升高[10]。本研究也存在一定的不足，纳入患者的数量比较少，没有检测其他miRNAs分子与炎症因子，也没有纳入胃癌患者与正常健康人群，将在后续研究中进行分析。

综上所述，Hp感染可使得慢性萎缩性胃炎患者血清miR-155表达与IL-6表达水平上升，两者存在相关性，检测患者血清中miR-155、IL-6水平可能对慢性萎缩性胃炎的诊断有重要意义。