妊娠合并心脏病患者MMP-1、GATA6、PTX3水平与不良妊娠结局的关系研究

朱淑嫔 姚锐 金纬纬

妊娠合并心脏病可诱发恶性心律失常、心源性休克、心力衰竭、肺动脉高压危象等，危及母婴生命安全[1]。基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1，MMP-1）可降解细胞外基质中胶原纤维和明胶，与心功能有关，且其活性长期逐渐增强与左心室重构密切相关[2]。GATA结合蛋白6（gata binding protein 6，GATA6）可调控哺乳动物心脏分化发育，与先天性心脏缺陷、心脏传导系统等多种心血管疾病有关[3]。正五聚蛋白3（pentraxin 3，PTX3）主要由心肌、血管损伤组织等合成分泌，与心肌损伤和心力衰竭发生有关[4]。现已证实心功能状态及心室重构与妊娠合并心脏病患者母婴预后有关，故推测MMP-1、GATA6、PTX3可能在妊娠合并心脏病病情进展中起到一定作用，但仍需临床报道加以论证[5]。本研究探讨妊娠合并心脏病患者MMP-1、GATA6、PTX3与不良妊娠结局的关系，现将结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象选择2019年1月至2021年1月温州市中西医结合医院收治的妊娠合并心脏病患者42例，年龄22～35（29.91±2.30）岁；孕周30～37（33.93±1.89）周。根据患者随访期间是否发生孕妇病死、胎儿流产、新生儿窒息、新生儿死亡等严重不良事件，将患者分为观察组20例（包括胎儿流产6例，新生儿窒息13例，围生儿死亡1例）和对照组22例。纳入标准：符合妊娠合并心脏病诊断标准[6]；单胎妊娠；依从性良好，能定期接受产检与随访。排除标准：精神疾病、认知功能异常，无法进行正常沟通交流；合并恶性肿瘤；伴有血液系统疾病；脱落失访。本研究经医院医学伦理委员会审核通过（伦理批号：2022-L001），患者均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 一般资料的收集收集两组患者年龄、体重、孕周、疾病分类（结构异常性心脏病、功能异常性心脏病、妊娠特有心脏病）、产史（初产妇、经产妇），并依据《妊娠合并心脏病的诊治专家共识（2016）》中妊娠风险分级量表评估孕产妇的妊娠风险分级，Ⅰ级：孕妇死亡率未增加，母儿并发症未增加或轻度增加；Ⅱ级：孕妇死亡率轻度增加或母儿并发症中度增加；Ⅲ级：孕妇死亡率中度增加或母儿并发症重度增加；Ⅳ级：孕妇死亡率明显增加或母儿并发症重度增加；Ⅴ级：极高的孕妇死亡率和严重的母儿并发症[6]。

1.2.2 血 清MMP-1、PTX3、GATA6mRNA的 检 测两组患者入院时抽取空腹肘部静脉血5 mL，离心15 min，分离血清，采用酶联免疫吸附法检测血清MMP-1、PTX3水平，MMP-1试剂盒购于上海瑞番生物科技有限公司，PTX3试剂盒购于上海沪震生物科技有限公司；采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清GATA6 mRNA表达，下游引物序列5'-ACTTGAGCTCGCAGTTCTCG-3'，上游引物序列5'-AGTGCAGACCTGCTGGAGGA-3'，内参GAPDH上下游引物分别为5'-CAAATTCAACGGCACAGTCAA-3'、5'-TGGTGAAGACACCAGTAGACTC-3'，检测基因相对表达量=2-ΔΔCt。

1.3 统计学处理 采用SPSS24.0统计软件，计量资料以表示，组间比较采用两独立样本t检验；计数资料比较采用χ2检验；等级资料比较采用秩和检验。应用Pearson分析MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3与妊娠风险分级关系，采用多因素logistic回归方程分析不良妊娠结局的相关影响因素，采用受试者工作特征（receiver operating characteristics，ROC）曲线及AUC分析MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3预测不良妊娠结局的价值。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者一般资料比较见表1。

由表1可见，两组年龄、体重、孕周、疾病分类、产史比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）；两组妊娠风险分级均无Ⅴ级，观察组妊娠风险分级Ⅲ、Ⅳ级患者多于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

表1 两组患者一般资料比较

2.2 两组患者MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3水平的比较见表2。

由表2可见，观察组MMP-1、PTX3水平均高于对照组，GATA6 mRNA低于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.01）。

表2 两组患者MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3水平比较

2.3 MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3与妊娠风险分级的相关性分析见图1。

由图1可见，MMP-1、PTX3与妊娠风险分级均呈正相关（r=0.598、0.829，均P＜0.05），GATA6 mRNA与妊娠风险分级呈负相关（r=-0.690，P＜0.01）。

图1 MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3与妊娠风险分级的相关性分析的散点图

2.4 发生不良妊娠结局的多因素logistic回归分析见表3。

由表3可见，以是否发生不良妊娠结局为因变量（未发生=0，发生=1），纳入两组MMP-1、GATA6mRNA、PTX3、妊娠风险分级作为自变量，应用多因素logistic回归分析显示，MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3均是不良妊娠结局的相关影响因素（均P＜0.01）。

表3 发生不良妊娠结局的多因素logistic回归方程分析

2.5 MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3对不良妊娠结局的ROC分析结果见表4。

由表4可见，MMP-1、GATA6 mRNA联合PTX3预测不良妊娠结局的AUC最大。

表4 MMP-1、GATA6 mRNA、PTX3预测不良妊娠结局的ROC分析结果

3 讨论

现阶段一致认为，所有妊娠合并心脏病患者均应接受妊娠风险评估，以早期识别严重并发症风险，及时会诊、转诊、决定终止妊娠时机等，改善妊娠结局。目前临床多依据肺动脉高压、心律、二尖瓣狭窄情况、室间隔缺损、心功能等指标对妊娠风险进行评估，检测指标项目繁多，临床应用受限。

MMP-1定位于第11号染色体11q22.3位置，对细胞外基质的降解、组织重建等调控起重要作用[7]。实验表明，妊娠期患者心脏血管周围、心包和间质纤维化程度增加，产后逆转，包括MMP-1在内的MMP系统参与了妊娠期间心脏细胞外基质重塑及其在产后的逆转，生理状态下，妊娠晚期左心室中MMP-1下调，可应对妊娠期间血容量超负荷响应的适应性心脏重塑过程[8]。本研究显示，观察组MMP-1高于对照组，与妊娠风险分级呈正相关，也是不良妊娠结局的相关独立影响因素，提示MMP-1越高，患者妊娠风险分级和不良妊娠结局的概率越高，检测母体血清MMP-1可评估妊娠合并心脏病患者妊娠风险分级及妊娠结局。MMP-1升高可通过降解细胞外基质、促进组织重建，诱发心室重构，从而影响孕产妇心功能，加重妊娠风险，增加不良妊娠结局发生率。当MMP-1＞40.17 μg/L时，预测不良妊娠结局的AUC为0.752，灵敏度为65.00%，特异度为86.36%，呈现出一定预测价值，能为临床提供客观的参考依据。

GATA6 mRNA定位于染色体18q11.1-q11.2，可调节多种细胞的生长与分化，并能影响转录和翻译水平，诱发某些心血管疾病的发生[9-10]。GATA6 mRNA启动子甲基化与肺动脉高压形成有关，而肺动脉高压可威胁母儿生命安全，增加妊娠风险和不良妊娠结局的风险[11]。赵欣媛等[12]报道，GATA6 mRNA越低，妊娠合并心脏病患者心功能分级越差，且与妊娠合并心脏病妊娠结局良好者比较，妊娠结局不良者GATA6 mRNA明显降低，本研究结论与之一致，佐证了GATA6 mRNA在妊娠合并心脏病患者妊娠结局中起到保护因子作用。在此基础上，本研究还发现，GATA6 mRNA与妊娠风险分级呈负相关，提示GATA6 mRNA越低，妊娠风险越高，应加强对患者监测与评估，必要时转诊、终止妊娠，以保障母儿安全。但目前尚未阐明GATA6 mRNA与妊娠风险及不良妊娠结局关系的详细机制，结合资料分析，GATA6 mRNA低表达可能会降低机体在妊娠期对血流动力学的适应性调节能力，导致心脏结构与功能的恶化，从而影响妊娠风险和妊娠结局[13-14]。GATA6 mRNA预测不良妊娠结局的AUC为0.817，提示检测GATA6 mRNA有望成为预测妊娠合并心脏病妊娠结局的一个标志物。

PTX3由包含17个氨基酸信号肽的381个氨基酸序列构成，主要来源于先天免疫细胞，被视为一种炎性指标[15-16]。本研究发现，观察组PTX3高于对照组，PTX3是不良妊娠结局的相关独立影响因素，具有作为预测标志物的潜质。本研究还发现，PTX3与妊娠风险分级呈正相关，可见对PTX3高水平患者，应警惕其高妊娠风险的可能，及时作出针对性干预措施，以改善母婴预后。妊娠合并心脏病患者在妊娠和分娩过程中，因血流动力学波动，造成缺血、缺氧、心脏负荷过重等，心肌细胞受损，大量炎症介质被激活，PTX3随之分泌入血，并能刺激白介素-1等炎症介质合成，加重心肌炎症反应损伤，影响心功能，从而增加妊娠风险[17-18]。ROC分析显示，PTX3预测不良妊娠结局的AUC为0.853，低于MMP-1、GATA6 mRNA联合PTX3的AUC，且MMP-1、GATA6 mRNA联合PTX3预测不良妊娠结局的AUC最大，故建议联合检测三者对妊娠结局进行预测，以提高预测的准确性，为临床提供有效参考信息。本研究不足之处在于，纳入的妊娠合并心脏病患者仅有42例，可能影响数据的准确性，有待后续积累更多的病例进行深入探讨。

综上所述，MMP-1、GATA6、PTX3与妊娠合并心脏病患者妊娠风险分级及妊娠结局有关，有望成为预测不良妊娠结局的标志物，从而为临床后续的应对、干预等提供参考依据。