雅安产黄芪及配伍汤剂对过敏性支气管哮喘（PM诱发）治疗的基础药理学研究

林浩，徐赛，孟伟，杨志伟，彭怀晴，黄兰雅

雅安职业技术学院，四川 雅安 625000

0 引言

随着现代环境污染的日益加剧，城市空气质量显著降低，这在一定程度上加剧了人们各类呼吸道疾病的发生概率，为人们的身心健康带来极大困扰。其中，支气管哮喘就是现阶段最为常见和高发的呼吸道疾病之一。根据相关统计显示，目前全世界有哮喘病人1.5亿～2亿人，每年死于哮喘病的人达18万之多。其中我国哮喘发病率为1%～5%，约有3000万哮喘病人，且每年发病人数仍才呈现递增趋势，且发病人群年龄越来越小，自身免疫力低下的儿童正成为哮喘病的高发群体。哮喘患者容易受到空气污染的影响。特定的污染物（PM2.5）能够引起气道炎症和气道高反应性，二者均为哮喘的特征性表现。大量的证据表明环境中PM水平能够引起哮喘的诱发和加重[1]。随着我国社会经济的高速发展，雾霾等空气污染问题变得日益严重，其中，四川盆地是全国严重的雾霾区域，雅安地区处于盆地边缘，四周环山，雾霾现象仅次于成都平原。雾霾中主要成分为PM2.5等颗粒，由雾霾引起的过敏性哮喘在雅安各大医院病例数逐渐增多。虽然一直以来临床上已经形成了针对过敏性哮喘的相关治疗方法，且西医在此领域具有一定效果，但是面对日益复杂的过敏性哮喘病情，以往治疗方法也有其不足之处，所以中西医领域近年来也都在进行过敏性哮喘临床治疗的更多研究。在我国，2012年以来，雅安政府确立了以雅安三九中药产品为基础，重点开展资源濒危品种如雅莲、重楼、黄芪等野生药材抚育驯化栽培，已有初步成效[2]。为进一步明确雅安产黄芪在过敏性支气管哮喘临床治疗上的效用，本课题就主要立足雅安本地野生驯化栽培的相关药材，如黄芪等配伍形成的汤剂，进行基础药理学研究，观察雅安产黄芪及其配伍的汤剂在防止雾霾诱发的过敏性哮喘的药效。该研究成果可极大程度服务于雅安地区的各类人群，特别是儿童，减小雾霾对肺部损伤。

1 资料与方法

1.1 一般资料

（1）实验动物与药材：本实验动物为SPF级SD大鼠，雄性，共60只，体重（200±10）g，4～6周龄，购买于四川普莱美行之生物科技有限公司后饲养。环境温度（22±2）℃，湿度50%～80%。于四川康宝药业有限责任公司购买雅安本土种植的黄芪、杏仁、苏子、紫菀、款冬花、甘草等中药材各200g，其他省份同类药材各200g备用。

（2）仪器选择：CX41-12C02型倒置显微镜；YC-Y800B型亚都超声波医用雾化器（北京亚都科技股份有限公司）；BioTek-Synergy2多功能酶标仪；CM3800全自动冷冻切片机（常州郝思琳医用仪器有限公司）；L500型低速自动平衡离心机（湘仪离心机仪器有限公司）；成像系统ChemiDocTM CXRS+System（BIO-RAD）；小型垂直电泳槽 Mini-PROTEANTetra System（BIO -RAD）。

1.2 方法

（1）煎药：将两组药材按照适当比例配合后加水浸泡30分钟，加水量以稍没过中药为度，武火煎煮至沸腾，然后转至文火维持60min，倒出药液，然后再加水煎煮，方法如前，将两次药液混合并浓缩，配置成雾化装置[3]。煎药过程进行必要管理，确保严格按照规范程序进行操作，以保证药品质量。

（2）动物造模与给药方法：将60只大鼠进行适应性的喂养，时间为1周，按照随机数字表法对其进行分组，分别为实验组和对照组两组，两组大鼠分别置于自制不完全密闭玻璃箱内，在实验开始两周内每天定时两个小时将少量燃烧烟尘（含PM2.5颗粒）输入玻璃容器中进行造模[4-5]。当大鼠出现呼吸急促，躁动不安、搔抓呛咳、喷嚏、皮肤及口唇发绀、肌肉痉挛抽搐、点头运动、精神萎靡、站立不稳、大便量多等表现时视为造模成功。实验组购买雅安本土种植的黄芪、杏仁、苏子、紫菀、款冬花、甘草等中药材组方的煎煮物进行雾化吸入，对照组用其他产地同类药材煎煮物进行雾化吸入。过程中对两组大鼠情况进行观测，如果出现其他异常情况，要及时处理，避免对试验整体造成影响。

1.3 观察指标

准备好显微镜、超声波医用雾化器、多功能酶标仪等试验仪器（部分外借）。通过检测大鼠肺组织的相关炎症因子的表达观察汤剂的药效学。大鼠恢复的程度主要分为三个等级，分别为显效、有效、无效。治疗显效为：肺部阴影消失呼吸困难等症状消失，以上的情况均属于治疗显效。治疗有效为：肺部阴影消失一半，呼吸困难等症状明显好转。没有以上的治疗显效和治疗有效的情况，视为无效治疗。

1.4 统计学分析

此次研究所有数据资料均在Excel预处理的基础上，采用SPSS 21.0软件包进行处理分析，用%表示计数资料，设定为P＜0.05，差异具备统计学意义。

2 结果

实验组大鼠治疗后效果对比明显优于对照组，实验组追踪有效率达96.26%，对照组总有效率仅为60.22%（P＜0.05），说明两组数据的差异显著，详见表1。

表1 两组大鼠治疗效果对比[n（%）]

3 讨论

中药复方抗过敏作用机制研究集中在过敏反应过程中的几个关键步骤，如IgE产生、细胞脱颗粒、细胞介质诱导的炎症反应等方面，反映了中药复方抗过敏作用研究多途径特点[6]。而这些研究途径也为深入探索中药复方抗过敏作用提供了多元思路，有助于推动我国中药复方抗过敏研究不断实现创新型突破。

现阶段相关研究取得的主要成就包括明确了一批具有抗过敏活性的中药复方、中药提取物和化学成分，部分揭示了其可能的作用机制；存在的不足主要包括：①中药抗过敏药理研究工作以药效评价居多，药理机制研究不足，尤其对活性化合物的作用靶点及其作用机制所知甚少；②中药复方和单味中药提取物的化学研究不足，由于活性化学成分不明确，直接影响了生物活性机制研究工作难于深入；③中药复方研究思路有待创新，中药复方是中医临床疗效的载体真正体现着中医药理论特色，目前采用天然药物化学研究思路不能充分揭示中药复方内涵，亟须发展。这些不足都反映出对于天然药物在抗过敏方面的研究仍有较大推进空间，未来实践中应继续从其作用机制出发，进行深入探索，弥补当前研究中所存在的各类空白。

支气管哮喘是一类气道慢性炎性病变，主要表现为肥大细胞反应和酸性粒细胞的侵袭。其发生机制涉及多种细胞、细胞因子、介质以及它们的交互作用。中医复合方剂对气道慢性炎症的机制的探讨涉及许多方面，如病因、调节和后果等不同的环节[7]。其于西药治疗相比，从支气管哮喘的发病的源头进行研究，充分发挥了传统中医理论中标本兼治的理念优势，能够给予患者全方位的治疗。同时，中药复方剂在治疗哮喘的过程中，可以针对患者的不同情况给予针对性调节控制，使治疗更符合患者的实际情况。此外，在治疗一段时间后，还可以根据治疗效果进行用药调整，虽然其治疗周期较长，但相较西医治疗方法在效果上并不逊色，且由于其从源头进行医治，反而能够起到强身固本之效，在一定程度上防范患者哮喘的再次发生。

许多学者从分子生物学角度探讨了哮喘的炎症机制，并在此基础上进行了大量的试验,相关研究结果为进一步验证中药的疗效和疗效提供了科学的基础，并为临床和科研工作提供了有益的参考[8-10]。不可否认的是，当前这一领域的研究仍然存在着一些问题和不足：①研究的起点比较单一。尽管这类研究涵盖了哮喘的各种证候，但也有清、温、补的应用；虽然治疗方法有多种，但是试验指标的选取比较集中，无法反映出各种治疗方法在气道炎症机制上的差异，从而无法体现出中医的治疗本质[11]。②以往的研究大多是从一个环节、一个角度来解释中药的作用机制，而忽略了中草药在整个炎症的发展和预后中的作用，因而未能充分反映出中医整体观念。基于此，研究认为针对此类问题还需要进一步完善与扩展。①在未来的研究中，应当以中医学整体观为指导，应用脏腑相关的内外相对应的理论，来考察中医药对哮喘的整体作用[12-13]。②在科研中要引进最新的现代医学技术，改变过去试验指标太过单一。在此基础上，进一步将神经肽的定性和定量分析应用于气道炎症的另一机制[14]。③支气管哮喘是一种具有遗传性的疾病，“幼稚天哮”在中医学文献上的记载也很多，如果能将其与家系、基因标记相结合进行研究，无疑会极大地提升整体科研水平。哮喘是一种多层次的复杂疾病，应从多个层面进行多目标的治疗，并在此基础上进一步开展多环节靶点的研究[15-16]。雅安地区80%以上为中高山区，海拔600～3000米，属于中纬度亚热带湿润气候，四季分明，年平均温度16.2℃，没有霜冻。优质的空气、水源、土壤等为优质的中草药的成长提供了良好的条件；高海拔高、地形条件好，能适应多种中草药的需要；森林覆盖率高，是中药有效成分含量高的主要原因。

本次研究中，实验组在采用雅安产黄芪及其配伍的汤剂雾化吸入方案治疗后，动物模型各项康复指标均优于对照（P＜0.05），且治疗效果明显轻于对照组（P＜0.05），与上述研究一致，此研究表明雅安产黄芪及其配伍的汤剂雾化吸入方案在临床应用价值显著。

综上所述，我国对于中药复方剂治疗哮喘的方法已多有研究，目前已经形成了相关理论和治疗方法，然而在天然药物的临床应用上，现阶段我国的研究相对较少。此次研究以动物造模的方式对比分析了雅安产黄芪及配伍汤剂在治疗过敏性哮喘上的效果，且结果证实雅安产黄芪及配伍汤剂对于该病症的治疗具有更为明显的效果。因此，在未来对过敏性支气管哮喘患者的治疗过程中，雅安产黄芪及其配伍的汤剂雾化吸入是值得在临床上推广使用的，同时这也能够为推广地方药材提供理论上的支持。