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角鲨烯来源、提取及功能特性研究进展

2022-02-15李跃凡王媛媛马改琴于修烛

关键词:鲨烯皂化溶剂

李跃凡,王媛媛,马改琴,李 琪,于修烛

西北农林科技大学 食品科学与工程学院,粮油功能化加工陕西省高校工程研究中心,陕西 杨凌 712100

角鲨烯(2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯,C30H50)是一种具有异戊二烯结构的全反式三萜烯化合物,因含6个双键,性质极不稳定,易于氧化。在抑制氧化应激和清除体内的炎症因子等方面具有较好的功能特性[1-2],被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。

1916年,角鲨烯首先在鲨鱼肝脏中被发现[3],引起了广泛关注,它是肝脏油脂中不皂化物的主要成分。1935年,橄榄油中也被证明存在角鲨烯[4],此后,对角鲨烯来源的研究不断增多。近年来的研究表明,角鲨烯在植物中分布广泛,主要存在于含油较多的植物种子或果实中。微生物中也含有微量的角鲨烯,可通过发酵进行生物合成,但目前微生物产量十分有限。因此,随着对动物保护意识的提高,植物被认为是天然角鲨烯的主要来源,探索从植物中提取角鲨烯的方法将有利于促进植物资源的综合利用,获得纯度和安全性高的角鲨烯,同时研究角鲨烯的功能特性对其实际应用价值的提高意义重大。

作者从角鲨烯来源出发,讨论获取角鲨烯的有效途径,并对角鲨烯在心血管疾病、免疫系统、癌症等方面的功能特性及可能的作用机制进行探讨,旨在为角鲨烯资源的研究和开发利用提供依据。

1 角鲨烯的来源

1.1 动物来源

在动物细胞内,胆固醇以乙酰辅酶A开始通过甲羟戊酸/类异戊二烯途径合成[5],角鲨烯作为胆固醇的前体物质,其在体内的浓度受到胆固醇合成的影响。肝脏是合成胆固醇的主要器官,因此角鲨烯在动物肝脏内含量较高,如鲨鱼肝脏油脂中,角鲨烯含量高达40%以上[6],被认为是角鲨烯最丰富的来源之一。此外,角鲨烯还存在于人体和动物的多个器官和组织中,如人体皮肤、牦牛肉的肱二头肌、淡水鱼肌肉和内脏等[6-7],但其中角鲨烯含量不高,一般低于500 mg/kg,开发价值较小。而鲨鱼中角鲨烯含量高,但其繁殖周期长、生长缓慢,并且肝脏中易积累污染物、病原体和有毒物质等。考虑到环境可持续发展和产品的安全性,动物来源具有一定局限性,需要开发其他的角鲨烯资源。

1.2 植物来源

1.2.1 植物中的角鲨烯

自然界中角鲨烯分布广泛,尤其是在以植物种子、果实等为原料提取的植物油中,角鲨烯含量较高(见表1)。由表1可知:橄榄油、苋菜籽油和南瓜籽油中含有丰富的角鲨烯,橄榄果含油量25%左右,油中角鲨烯含量在0.2%~0.7%之间[8];苋菜籽中的含油量仅为4%~8%,但其油中含有2.4%~8.0%的角鲨烯,约占种子总质量的0.4%[12-13,22];南瓜籽油中的角鲨烯含量仅次于橄榄油和苋菜籽油,但受油料脱壳和压榨方式的影响。一般情况下,冷榨南瓜籽油的角鲨烯含量较高[23],最高能达到5 000 mg/kg[14-15];坚果油、传统药用植物的油提取物中角鲨烯含量也较高,如摩洛哥坚果油中角鲨烯的含量为3 130 mg/kg[16]、牡丹花蕊油中的为2 730 mg/kg[17]、山杏叶油中的为2 190 mg/kg[18]等。相比于角鲨烯含量较低(一般低于200 mg/kg)的其他商品植物油,这些油或提取物中的角鲨烯含量较高,但相关研究较少。

此外,茶叶中角鲨烯含量十分丰富,为角鲨烯的来源提供了更多可能。研究显示,茶叶提取物中角鲨烯含量可达到3 682 mg/kg[24],仅次于上述3种富含角鲨烯的植物油。茶叶的角鲨烯含量受到茶叶品种和成熟度的影响,绿茶茶叶中的角鲨烯含量(干基)最高可达1 630 mg/kg[25],糯米香茶干燥粉末中角鲨烯含量约727.1 mg/kg[26],乌龙茶叶中约234 mg/kg[27]。Park等[25]研究表明,茶叶提取物中的角鲨烯含量在1.6~29.2 g/kg之间,老叶中所含的角鲨烯更为丰富,远高于嫩叶,甚至超过橄榄油中的角鲨烯。茶产业中往往只采摘嫩叶部分,老叶的实际应用价值有限。对老茶叶中角鲨烯资源的开发,可以与茶产业中对嫩叶的利用形成互补,充分利用茶叶的剩余资源,为角鲨烯开发提供了新的选择。

表1 植物油或植物提取物中的角鲨烯Table 1 Squalene in vegetable oils or plant extracts

1.2.2 植物油加工副产物中的角鲨烯

植物油加工副产物也是角鲨烯的重要来源。伴随着植物油的精炼过程,角鲨烯在加工副产物中富集,此时的角鲨烯含量较高,利于分离纯化,可获得高纯度角鲨烯(表2)。Nergiz等[34]研究证明,与初榨橄榄油相比,增加精炼步骤使角鲨烯含量减少40.94%,其中脱臭过程对角鲨烯影响最大,大部分角鲨烯会随着油脂脱臭进入橄榄油的脱臭馏出物中。从大豆馏出物酯化脱酸并提取生育酚、植物甾醇后的油渣中提取角鲨烯,角鲨烯的含量从4%~7%被富集到15%~25%,经分子蒸馏和吸附纯化后,角鲨烯纯度可达87%[32]。米糠油脱臭馏出物和脂肪酸馏出物中含有较高比例的不皂化物,被认为是富集角鲨烯和植物甾醇的重要来源[33]。因此,除了从不同种类的植物资源中获取角鲨烯外,还能回收植物油加工副产物中的角鲨烯,不仅提高了植物资源的利用率,而且拓宽了角鲨烯来源的渠道。

表2 植物油副产物中的角鲨烯Table 2 Squalene in vegetable oil by-products

1.3 微生物来源

微生物中角鲨烯是代谢的产物,可通过甲羟戊酸/类异戊二烯途径和甲基赤藓糖醇磷酸途径合成。随着对生物合成酶和调控机制更深入的探索,微生物合成角鲨烯被认为是增加角鲨烯产量的有效途径。破囊壶菌、酿酒酵母、德氏圆孢菌、大肠杆菌、微藻等都是生物合成角鲨烯的有效微生物[5]。酿酒酵母和大肠杆菌等微生物作为宿主还可靶向特定基因,通过生化途径驱动角鲨烯的合成[35]。但目前微生物合成角鲨烯在调控机制、菌株分离、工业化生产等方面存在一定的技术困难,且产量上也低于植物源角鲨烯,实际开发应用的局限性较大。

2 角鲨烯提取和纯化方法

角鲨烯具有脂溶性且不可皂化的特点,常用溶剂提取法提取,经酯化或皂化后油脂中的甘油三酯和脂肪酸可被去除,再用蒸馏法或柱色谱分离法进行纯化,以获得较高纯度的角鲨烯。传统提取法以传统设备、步骤简单的工艺为主,提取效率低、损耗大;新型提取和纯化方法补充了传统提取方式的不足,优化提取和纯化工艺,可获得更高含量和纯度的角鲨烯。

2.1 提取方法

2.1.1 溶剂提取法

溶剂提取法即利用角鲨烯易溶于正己烷、石油醚、三氯甲烷等有机溶剂的特点,将其与其他杂质进行初步分离,得到角鲨烯含量较高的提取物。常用的液-液萃取法就是溶剂提取的一种,即把目标化合物从液相样品转移到另一个液相,是长期以来提取脂类物质最广泛使用的方法。如索氏提取法,利用脂类物质在有机溶剂的溶解性进行反复多次提取,达到较高的提取率。由于不同物质在不同有机溶剂中的溶解度不同,有机溶剂的选择很大程度上影响了提取角鲨烯的效率。李冬梅等[36]用正己烷、石油醚、丙酮和三氯甲烷4种有机溶剂索氏提取油茶籽中的茶油,油中的角鲨烯浓度随提取溶剂的不同而不同,分别为7.62%、0.94%、0.29%、0.54%,证明正己烷提取油中角鲨烯有较好的效果。但作为传统的提取方法,存在溶剂分离困难、毒性大等缺点,要得到较高质量的角鲨烯,还需要与其他提取方法相结合。

新型的液-液萃取法弥补了传统溶剂法的不足,可以使用低毒性的溶剂进行萃取,如Hernndez等[37]研究完全可生物降解的乳酸乙酯和角鲨烯、橄榄油在环境压力下的液液平衡,因为不同配比的角鲨烯和甘油三酯在乳酸乙酯中的分配系数不同,在一定温度下角鲨烯的溶解度可比甘油三酯高3.5倍,证明从角鲨烯-甘油三酯混合物中选择性回收角鲨烯是可行的,可应用液-液逆流萃取工艺从橄榄油脱臭馏出物中纯化角鲨烯。此外,新型的液-液萃取法也改善了传统溶剂法提取时间长、溶剂使用量大的缺点,如加速溶剂萃取在高压和高于沸点的温度下使用微量的有机溶剂,大大减少了提取时间和溶剂用量,并且还可以使用通用溶剂和极性不同的溶剂混合物。Krulj等[12]比较超临界二氧化碳萃取、索式提取和加速溶剂萃取3种方法对苋菜中油脂和角鲨烯产量的影响,证明加速溶剂萃取下具有最高的油产量(78.1 g/kg)和角鲨烯含量(4.7 g/kg)。新型液-液萃取在缩短提取时间的基础上,还保留了传统溶剂提取法的高提取率,相比于超临界流体萃取,在溶剂的选择上局限性较少。

2.1.2 超临界流体萃取

超临界流体是在压力和温度的调节下产生的一种具有改进溶剂化特性的流体,即通过改变压力和温度来改变流体的密度,控制角鲨烯在流体溶剂中的溶解度,从而选择性地分离角鲨烯。CO2是超临界流体萃取法常用的萃取溶剂,由于其具有高扩散性和低黏度,可以在半固体材料中快速扩散。超临界流体的特性使得萃取速度比传统溶剂萃取或液相色谱的萃取速度更快,并且萃取的目标物量与传统有机溶剂萃取的量相当,具有低毒性、高选择性、易于分离等特点。

目前提取角鲨烯的研究中,超临界CO2萃取是使用较为广泛的提取方法,通过对影响其提取效率的各类因素的研究,如温度、压力、样品基质组成以及目标化合物与基质的相互作用,来获得高浓度的角鲨烯。Wejnerowska等[13]研究了压力、温度、时间以及样品预处理4个因素对超临界CO2萃取效率的影响,在20 MPa的压力下从苋菜种子中获得的角鲨烯含量最高,因为角鲨烯是一种非极性化合物,能在较低压力下溶于非极性的CO2中,而随着压力的升高,油脂中其他极性更强的物质也逐渐溶解在CO2中,虽然溶解的角鲨烯含量也有略微的增加,但是整体浓度下降,不利于角鲨烯的分离。温度对角鲨烯的提取效率与压力有关,一般情况下,温度升高,提取的角鲨烯含量更高,但在25 MPa下,温度对角鲨烯溶解度的影响较小。考虑到与其他脂类物质的分离,需要在较高温度下(130 ℃)分离角鲨烯,此时角鲨烯的纯度最高(60%以上)[13],且对角鲨烯的稳定性没有影响。但等温条件下,角鲨烯的提取率和回收率都有一定的限度,可以设置一定的温度梯度,结合连续逆流萃取工艺进行超临界CO2萃取,由于温度导致CO2密度的差异,角鲨烯的选择性得到改善,内部回流模式也能使回收率大幅度提高[38]。

角鲨烯比其他脂类物质更容易从油脂中萃取,可以在较短时间内(30 min)获得高纯度的角鲨烯,而要提取到更高含量的角鲨烯,需要适当地延长萃取时间。为提高工业上提取角鲨烯的效率,角鲨烯的纯度、含量和回收率都需要纳入试验设计的范畴,这就需要进一步扩大角鲨烯与其他油脂组分间溶解度的差异,来保证角鲨烯的分离提取效果,必要时还可以通过建立工艺模型探索技术和经济均可行的替代方案。Bouriakova等[38]从脱臭馏出物中提取角鲨烯时进行了详细的工艺模拟,通过超临界乙醇酯化,降低与角鲨烯溶解度相似的脂肪酸浓度,再对低脂肪酸溶液进行超临界CO2萃取,实现了温和条件下的萃取和纯化,总提取率超过95%(89 g/kg),橄榄油脱臭馏出物中的角鲨烯纯度最终高达99%。超临界流体现已应用于植物油、医用化学物质等成分的工业萃取中,纯度高、杂质少、残留少等优点提高了对功能活性成分的萃取效率。但在工业生产上,还缺乏有效的耐压设备以满足实际生产的需求,可以通过工艺模拟等途径有效解决超临界技术在工业转化过程中的难点,降低生产成本。

2.2 纯化方法

2.2.1 冷析结晶法

利用不同温度下角鲨烯溶解度的变化,降温使角鲨烯从原混合物中冷却结晶,从而纯化角鲨烯。Grigoriadou等[9]在检测橄榄油中角鲨烯时,比较了冷析结晶法、固相萃取法和皂化分离法对提取角鲨烯的影响,作为HPLC分析的预处理方式,冷析结晶法与其他两种方法相比,具有较好的提取效果。冷析结晶的过程能去除油脂中大量的三酰甘油,可以在色谱分析的前处理过程中提高角鲨烯的纯度[39],也避免了提取过程中使用强碱等有毒试剂。但操作时间长,分离效果不佳等缺点限制了其在纯化上的应用。

2.2.2 皂化法和酯化法

角鲨烯是一种仅可溶于非极性溶剂的不可皂化物,溶剂提取法提取的角鲨烯混合了其他脂类物质,要得到较高纯度的角鲨烯,需要通过皂化的方法将角鲨烯与其他可皂化的脂类物质进一步分离。通常甘油三酯含量较高的原料需要进行皂化,得到的不可皂化物再经过蒸馏或有机溶剂提取,得到比直接溶剂提取纯度高的角鲨烯。一般情况下,从植物油及其加工副产物中提取角鲨烯时会经过皂化步骤[15,31,33]。此外,为了优化角鲨烯的提取效率,也会在前处理步骤中对油脂进行酯化,游离脂肪酸的酯化可以降低其挥发性,便于后续蒸馏等步骤对角鲨烯的纯化,酯化也能减少油脂中高浓度脂肪酸对角鲨烯色谱分离产生的干扰,有利于分析的进行[11]。

2.2.3 分子蒸馏法

分子蒸馏是一种高真空条件下的蒸馏方法,液体分子受热从液面逸出,根据料液中各组分蒸发速率的差异而对混合物进行分离。分子蒸馏往往在皂化和酯化步骤后进行,目的是为了除去脂肪酸、酯类物质和其他可皂化物。Bucciol等[30]在高效微波辅助酯化反应后,用分子蒸馏分离脂肪酸甲酯,通过快速色谱分离残余物,使角鲨烯纯度达到89%(产率55.4%)。由于高真空度下蒸馏温度低,适于分离热敏性、低挥发性的物质,加上停留时间比较短的特点,适合分离角鲨烯这样的分子量高且具有生物活性的化合物。纯化过程中往往由于高温和反应的不连续性,导致角鲨烯损失。为提高角鲨烯的得率,需要考虑皂化和酯化的反应条件,并且尽可能保证皂化或酯化反应和分子蒸馏在连续反应器中进行[29]。

2.2.4 固相萃取法

固相萃取法是把目标化合物从气体、液体或超临界流体基质转移到固体吸附剂,固体吸附剂通过与吸附剂的相互作用保留目标化合物,然后通过溶剂置换或热解吸回收目标化合物,可以看成是一种简单的色谱分离方法。与色谱分离不同的是,固相萃取小柱流程短,更适用于一两个目标物的富集和分离,且速度更快、更节省溶剂。固相萃取法中净化柱的选择是分离纯化目标物的关键。李文等[10]研究了9种类型的固相萃取柱对分析物角鲨烯富集的影响,考察了出峰情况、净化情况和洗脱溶剂的影响,发现在分离角鲨烯方面,硅胶柱具有较好的效果,极性吸附剂硅胶将甘油三酯很好地保留在吸附剂上,而首先将待分析物角鲨烯洗脱下来,且未发现油脂被洗脱下来,净化效果良好。此外,中性氧化铝柱对角鲨烯也有较好的分离效果[11]。固相萃取往往是提取角鲨烯最后一步,在经过机械压榨、有机溶剂萃取或超临界CO2萃取得到油脂后,用皂化步骤除去可皂化的物质,不可皂化物质再经过固相萃取。非极性的角鲨烯因为不易被吸附而首先流出,其他极性较大的物质被硅胶柱或中性氧化铝柱吸附,从而达到角鲨烯与其他物质分离的效果。高纯度角鲨烯的获得往往需要经过固相萃取法或柱色谱法[9,11,31],He等[40]将用苋菜提取的植物油经过皂化和硅胶色谱分离后,其中的角鲨烯纯度从76.2%提高到94.0%。净化柱在选择时除了考虑分离和净化的效果外,也不能忽略待分离物质本身的性质,如油脂在经过强碱皂化后,较高的pH值会使普通的硅胶柱填料塌陷,回收率偏低。为了提高提取率和回收率,可以用亲脂性和亲水性物质按一定比例聚合成的耐酸碱的HLB柱,其在高pH值时仍很稳定[41]。固相萃取法的分离效果好,是样品制备或分离纯化中较为便捷的方法,但存在规模较小、成本较高、吸附剂再生困难等缺点。

2.3 其他提取纯化方式

3 角鲨烯的功能特性

角鲨烯是一种较强的抗氧化物质,在机体内能阻断氧化应激过程引起的生理学病变[6],并通过影响酶和细胞的活性,调节细胞因子、多种物质的水平和信号的传递,起到降低胆固醇合成、提高免疫系统能力、抑制肿瘤细胞的合成、减轻外界毒性物质对机体的不良影响等作用[1-2]。

3.1 促进心血管健康

心血管疾病是涉及心脏和血管的疾病,是目前全球死亡的主要原因之一,占所有死亡人数的30%。多种因素与心血管疾病的发病率相关,其中最主要的就是升高的低密度脂蛋白和高胆固醇。角鲨烯是胆固醇生物合成的中间体,被提议作为评估内源性胆固醇生物合成的生物标志物,其在体内中的浓度与心血管疾病的发病率有关[44]。同时角鲨烯可以作为抑制心血管疾病的潜在来源,与降低低密度脂蛋白的他汀类药物的作用机制相似,通过抑制肝脏中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶的活性,抑制HMG-CoA转化为甲羟戊酸,下调乙酰CoA向胆固醇的转化(图1)。加上角鲨烯高度不饱和的结构,它进入氧化反应时具有极强的反应性,能促进氧气进入细胞、改善细胞的功能,从而调节信号分子的表达,抑制炎症损伤,起到缓解心血管疾病的作用。

图1 哺乳动物细胞中通过MVA途径合成角鲨烯[5]Fig.1 Squalene synthesis via MVA in mammalian cells[5]

然而,角鲨烯在降胆固醇中的作用是具有剂量依赖性的,11周的1 g/kg角鲨烯治疗显著降低了雄性小鼠总胆固醇的含量并显著增加了高密度脂蛋白的含量[45],而以较低剂量0.25 g/kg补充角鲨烯4周可显著增加雄性金色叙利亚仓鼠总胆固醇含量而不会增加高密度脂蛋白的含量[46]。在营养干预实验中也发现了剂量、给药时间或化合物的适当组合等因素对角鲨烯作用发挥的影响[47],因此还需要长期大量研究,以补充角鲨烯临床应用的方式和效果。

3.2 提高免疫力与抗炎

角鲨烯对免疫系统的功能活性体现在多个方面。在油水乳剂中角鲨烯已被证明是Toll样受体(TLR)激动剂的优良制剂[48],TLR是一类作为模式识别受体发挥作用的非催化受体,识别大量微生物共享的病原体相关分子模式和内源性警报信号,如凋亡相关膜碎片和炎症配体,在体内免疫系统功能的发挥中起到重要作用。但其增强适应性免疫反应的机制尚不清楚,可能是通过诱导抗原(AG)特异性Th1反应,并在免疫小鼠的记忆CD8(+) T细胞和中性粒细胞中出现炎症小体激活的迹象[48]。自身免疫系统过度激活导致的炎症反应也可以通过角鲨烯来进行调节,因为炎症和氧化应激之间存在显著联系,而角鲨烯较强的抗氧化作用可破坏这两个过程的相互促进,从而切断炎症反应的持续和传播[2]。

此外,角鲨烯对免疫系统的影响还体现在改变细胞内亚硝酸盐、细胞因子和促炎酶的水平,调节信号通路中关键蛋白的表达上,如角鲨烯诱导M1促炎巨噬细胞中抗炎细胞因子如IL-10、IL-13和IL-4的合成增加,促炎信号如TNF-α和NF-κB的表达减少,并且增强了嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的重构修复信号(TIMP-2)和募集信号,表明角鲨烯能够通过促进炎症中的巨噬细胞反应来促进伤口愈合[1]。在免疫调节过程中,角鲨烯的浓度与组合也会对其生物活性作用产生影响,在较低浓度(10 μmol/L)下,角鲨烯几乎不影响鼠类巨噬细胞中的脂质氢过氧化,而10 μmol/L角鲨烯和5 μmol/L虾青素组合时,抗氧化酶活性比单独使用一种化合物时的活性更高,更能减少脂质氢过氧化物[49]。

3.3 抗癌作用

角鲨烯对癌症治疗的积极作用体现在两个方面。一是抑制癌症的发生率,角鲨烯通过增强自身免疫的调节能力,可抑制肿瘤细胞的生长力,还能减轻外界致癌物质对机体的不良影响。在体外人胃腺癌细胞系的抗胃癌实验中,角鲨烯通过细胞凋亡过程诱导癌细胞系的DNA片段化和解体[50];在饮食中口服1%角鲨烯会影响乳腺细胞和结肠癌,角鲨烯通过降低HMG-CoA还原酶的活性限制正常胆固醇合成、中间阶段泛醌的生物合成和抑制蛋白质的异戊二烯化,从而减少活性细胞(如癌基因和GTP结合蛋白)增殖和分化中的信号转导[51]。角鲨烯对肿瘤的抑制作用是有限的,会因肿瘤类型、肿瘤的遗传缺陷、癌变过程的阶段等因素而异,例如角鲨烯对人乳腺上皮细胞、乳腺癌细胞不具有自由基清除活性或显著改变细胞增殖率、细胞周期谱或细胞凋亡癌细胞的能力,但它能降低上皮细胞中活性氧的水平,阻止过氧化氢诱导的氧化损伤,保护上皮细胞免受氧化DNA损伤[52]。二是通过减轻癌症治疗中的药物毒性,来补充药物治疗的效果。一线抗癌药物顺铂对肾脏的不良影响,可通过与角鲨烯的联用减轻,角鲨烯的抗氧化作用调节氧化还原系统的平衡,逆转顺铂诱导的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)失活,激活AKT/mTOR信号通路[53],还能以剂量依赖性方式增加正常人骨髓衍生的集落形成单位的生长,免受顺铂诱导的毒性。在环磷酰胺化疗前7 d和化疗后7 d口服角鲨烯可减轻环磷酰胺引起的大鼠心脏、睾丸和膀胱损伤的病理改变[54]。

3.4 其他功能特性

角鲨烯作为合成胆固醇的中间体,会影响细胞中三酰基甘油和胆固醇浓度,调节肝细胞中脂质代谢基因的表达,膳食摄入角鲨烯会降低肝脏胆固醇和甘油三酯的含量,从而控制脂肪肝疾病[47,49]。角鲨烯还在预防神经性疾病和胰腺类疾病方面有较好的效果[47]。由于角鲨烯本身较强的抗氧化性,皮肤中的角鲨烯还能抵抗温度、紫外线等外界因素导致的皮肤氧化,在皮肤生理学中,角鲨烯可用作抗氧化剂、保湿剂和局部应用的载体,如治疗脂溢性皮炎、痤疮等皮肤疾病,甚至可以防止皮肤老化[55]。角鲨烯作为皮脂的一部分,还被证实对包括金黄色葡萄球菌在内的革兰氏阳性菌具有抗菌作用,而单独的角鲨烯则通过抑制细菌的毒性达到抗菌的效果,此过程中细菌对氧化剂的敏感性增加、中性粒细胞的抗性降低,生物膜的形成能力也会受到影响[56]。

4 总结与展望

角鲨烯来源广泛,动物、植物和微生物中都含有一定量的角鲨烯。鲨鱼肝脏中的角鲨烯含量最高,但开发鲨鱼资源不符合生态环境可持续性发展的原则;微生物中的角鲨烯可通过生物合成增加产量,但存在技术上的局限性;植物角鲨烯资源丰富、含量较高,加上提取分离的可行性,可以作为目前角鲨烯的主要来源。天然角鲨烯的分离提取一般分为提取和纯化步骤,目前超临界流体萃取法和加速溶剂萃取法是提取角鲨烯的主要方式,因为这两种方法提取效率高、溶剂用量低,被认为是对传统溶剂提取法的有效替代。实际应用中还需要考虑角鲨烯的功能特性,目前研究已表明角鲨烯在心血管疾病、免疫系统、癌症、脂肪肝、皮肤炎症等方面有积极作用,这将为植物角鲨烯在食品、药品、化妆品等领域的应用提供理论依据。

然而,目前角鲨烯的应用还存在局限性,主要是由于来源的途径有限与功能机制研究的不完善。为实现角鲨烯资源的合理利用,笔者认为可从以下几个方面进一步探究和完善:(1)植物是目前获取角鲨烯的主要来源,除了植物油及其加工副产物外,茶叶、中药材等富含功能成分的植物也具有巨大潜力;(2)微生物来源的角鲨烯产量有限,可以从调控机制、菌株选择和培育等方面进行深度研究,提高生物合成角鲨烯的产量;(3)提取角鲨烯需要综合考虑效率和成本两方面的问题,在已有提取技术逐渐成熟的情况下,可以通过建立工艺模型、设计工艺来模拟实际操作中的提取过程,探究实际可行的能提高产量和经济的技术方案;(4)角鲨烯功能的研究以动物和细胞为主,在分子层面和临床应用上的研究较少,其具体功能的作用机制还不是十分清楚。未来需要更多在分子层面的研究和临床研究,明确产品量效关系,对摄取途径、剂量毒性及过度免疫诱导等方面进行更多深入的分析,为角鲨烯营养功能特性的发挥提供有力的理论依据。

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