中草药在小龙虾细菌性肠炎防治中的选用

2022-02-04曾家家

科学养鱼 2022年12期

曾家家

(玉林市水产技术推广站，广西玉林 537000)

小龙虾学名克氏原螯虾，2021年我国小龙虾养殖产量位列淡水养殖品种第6位。当前国内稻虾生态养殖模式下小龙虾病害防治实践方面仍处在起步阶段，现行的水产动物常规治疗方法，比如用含氯制剂消毒和抗生素等都不能达到预期的效果。而且随着高毒、高残留、选择性小的药剂大量使用，不仅增加了稻虾的养殖成本，还会导致食品安全及环境污染问题。

中草药作为天然药物，具有抗病、抗菌等作用，且毒副作用较小、无耐药性。中草药广泛用于鱼类病害防治、免疫增强等方面，受到广大养殖户的青睐。

本文以1例小龙虾细菌性肠炎防治为案例，通过流行病调查和病样解剖检查准确诊断疾病，对症用药，选用的3种常用防治小龙虾细菌性肠炎中草药来自6个不同厂家，然后经过药效试验，筛选适合的中草药进行精准防治。

一、流行病基本情况调查

广西北流市1个稻田养殖小龙虾基地发现小龙虾吃食减少，出现少量死亡的情况。该养殖基地为稻虾综合生态种养，符合无公害农产品养殖标准。养殖基地面积10 亩，2021年9月25日投放虾苗，规格5～8克/尾。平时养殖管理规范，日投饵量控制在饱食量的70%～80%。10月12日，发现小龙虾吃食减少，继而不食，活性差，抗应激弱，喜欢往浅水或岸边靠，足无力。两天后发现数尾病虾死亡，后续几天死亡数量由少到多，日死亡量20～40 尾。现场检测养殖水体氨氮、亚硝酸盐、pH、溶氧等指标，未发现异常。

二、准确诊断疾病

对患病的小龙虾进行解剖检查，发现肝脏颜色变浅、消化道肿胀充血、肠道有积水并流出黄色液体。根据流行病调查和病虾解剖检查情况，初步诊断为细菌性肠炎。

三、筛选中草药

1.对症用渔药

常见主治水产动物细菌性肠炎的中药渔药有三黄散(主要成分为黄芩、黄柏、大黄、大青叶)、五黄散(主要成分为黄芪)和大黄五倍子散(主要成分为大黄、五倍子)。

在当地渔药店购买6 个不同厂家的3 种中药渔药，分别为三黄散A1、三黄散A2、五黄散B1、五黄散B2、大黄五倍子散C1、大黄五倍子散C2。三黄散、五黄散和大黄五倍子散都是纯中药渔药，且都是正规厂家生产的国标水产药物，主治常见的水产动物细菌性肠炎等。

2.致病菌的分离与培养

将病虾用无菌生理盐水冲洗干净，用医用酒精消毒病虾体表；在无菌操作条件下，用剪刀剪开虾头，取其肝脏、鳃、心肌、肠道等组织，分别接种至已编号的普通营养琼脂平板上，在28℃下培养24 小时。观察发现，除心肌培养基未发现菌落外，其余均有菌落；根据其形态，挑选形态一致的优势菌纯化，连续接种3次，斜面保存以进行药效试验。

3.药敏纸片制备

用打孔机制作直径为6 毫米左右的圆形滤纸，将制作好的滤纸放入瓶里，用牛皮纸封口进行高压烘干。在无菌操作下，将药敏试纸分别放至按照渔药说明书稀释的三黄散A1、三黄散A2、五黄散B1、五黄散B2、大黄五倍子散C1、大黄五倍子散C2 药液中浸泡；4℃下孵育30 分钟，将纸片平铺于无滤纸垫底的灭菌平皿中，置平皿于烘箱中烘干，无菌密封备用。

4.药效试验

取适量的单一优势菌落到10 毫升“脑-心”浸出液肉汤培养基，制得菌悬液；取0.1毫升菌悬液分别均匀涂布于已编号的平板培养基上，重复涂布3次；待水分晾干后，用无菌镊子夹取渔药纸片三黄散A1、三黄散A2、五黄散B1、五黄散B2、大黄五倍子散C1、大黄五倍子散C2 平贴于平板表面，每换一种纸片都要对镊子灭菌并轻轻按压，以防纸片掉落和移动，且渔药纸片需完全与培养基接触。一般直径9 厘米的平皿可贴7 张药敏试片，中间1片，其余6片均匀分布其周围。

5.抑菌效果

将贴好渔药纸片的平板培养基翻转置于37℃恒温箱中培养12～16 小时，取出测量抑菌圈大小(表1)。

表1 药效试验情况

从药效试验结果可以看出，三黄散的抑菌效果较好，特别是三黄散A2 抑菌圈直径最大，抑菌敏感程度最高。

四、中草药治疗

1.渔药确定

根据药效试验结果，选用三黄散A2，按照该厂家渔药说明书的用法与用量，每6千克饲料加入100 克三黄散A2 拌料投喂，每天2 次，连续投喂7天。

2.治疗效果

使用三黄散A2 后，第1 天病死虾数量增加，但发病较轻的症状有所缓解；第2天病死虾数量继续上升，但进食量相比前几天有所增加；第3天病死虾数量有所减少，小龙虾进食量相当于正常的80%；第5 天没发现小龙虾死亡，进食恢复正常。再经过两天的巩固治疗，稻田中的小龙虾全部恢复正常，进食量甚至比发病前增加10%左右。