川麦冬商品形态及多效唑对其性状的影响

李红彦， 蔡晓洋， 杨瑞山， 陶 玲， 李 敏

(成都中医药大学，中药材标准化教育部重点实验室，中药资源系统研究与开发利用国家重点实验室，四川 成都 611137)

麦冬为百合科植物Ophiopogonjaponicus(L.f) Ker-Gawl.的干燥块根，含有甾体皂苷、高异黄酮、多糖等药效成分，具有养阴生津、润肺清心功效，为大宗中药材之一[1]，因其产地和栽培方式的不同习称川麦冬和浙麦冬。近年来，浙麦冬种植面积逐渐萎缩，市场占有量不断下降，川麦冬已经成为市场上麦冬的主要来源[2]。

《中国药典》[1]对川麦冬的性状描述为“长1.5～3 cm，直径0.3～0.6 cm”，指出了其长度和直径的区间，但未与浙麦冬进行区分；《七十六种药材商品规格标准》[3]以50 g粒数将川麦冬分为了3个等级，粒数越小，药材等级越高，与当前市场上商品流通现状一致。在实际调查中发现，目前市场所售川麦冬普遍存在个头过大的现象[4]，此外近些年根类药材种植中使用植物生长调节剂的现象屡见报道，多效唑的检出率高达90%以上[5-6]。

本研究收集道地产地、五大中药材市场、多效唑试验田的川麦冬，明确该药材性状分布、在商品规格等级中的应用及与药效组分的关联，为其品质控制、商品等级完善提供理论依据。

1 材料

1.1 药材

1.1.1 产地、市场样品 川麦冬产地样品来自主产地四川省三台县6家麦冬种植合作社及麦冬种植经营企业，共28批；市场样品来自全国五大中药材市场(河北安国药市、安徽亳州药市、四川荷花池药市、广东清平药市、广西玉林药市)19个商家，共78批，具体见表1。

表1 产地、市场样品信息

1.1.2 试验田样品 2018年于主产区三台县分别布置了不施用多效唑、施用不同浓度多效唑试验，由于当地可能存在土壤残留问题，故又选择从未种植过川麦冬，但生态环境与三台县主产区相似的南充市蓬安县进行不施用多效唑试验，2019年继续在芦溪镇试验田开展多效唑验证试验，共14批，具体见表2，均经成都中医药大学李敏教授鉴定为百合科植物麦冬OphiopogonisRadix(L.f) Ker-Gawl.干燥块根，标本留样于成都中医药大学。

表2 试验田样品信息

1.2 仪器 电子数显游标卡尺(成都成量工具集团)；JJ200型电子天平(百分之一，常熟市双杰测试仪器厂)；Agilent 1200型高效液相色谱仪，配置Alltech ELSD-2000型蒸发光散射检测器、DAD检测器(美国Agilent公司)；A580型双光束紫外可见分光光度计(上海翱艺仪器有限公司)；Advantage A10型超纯水仪(美国密理博公司)；BP121S型电子天平(十万分之一，德国赛多利斯公司)；KQ-500DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.3 试剂 鲁斯可皂苷元(批号111909-201204)对照品购自中国食品药品检定研究院；果糖(批号wkq16062201)、橙皮苷(批号wkq15123105)、麦冬皂苷D(批号wkq16073105)、甲基麦冬黄烷酮A(批号wkq16012504)、甲基麦冬黄烷酮B(批号wkq16032004)对照品购自四川维克奇生物科技有限公司，纯度均大于98%。乙腈为色谱纯；其余试剂均为分析纯；水为超纯水。

2 方法

2.1 性状测定 采用四分法从每批样品中随机选取100粒，测量其长度、直径、单粒质量、50 g粒数，重复3次，取平均值。粗长比=直径/长度。

2.2 含量测定指标选择 参照文献[7-9]报道，选择浸出物、总皂苷、总黄酮、总多糖、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B作为含量测定指标。其中，浸出物、总皂苷含量参照2020年版《中国药典》一部方法测定，总黄酮、总多糖、麦冬皂苷D、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B含量参考文献[10]报道的方法测定。

3 结果

3.1 平均单粒质量 表3显示，190粒以内的一等样品最多，其次是300粒以内的二等样品、300粒以外的三等样品；一等样品平均直径超出药典规定(0.3～0.6 cm)，而三等样品平均长度低于药典规定(1.5～3.0 cm)。

表3 各批样品50 g粒数

3.2 直径

3.2.1 产地、市场样品 由表4可知，产地样品平均直径为0.59 cm，与市场样品相近(0.60 cm)，也符合2020年版《中国药典》规定(0.3～0.6 cm)；产地、市场样品直径不合格主要表现在大于0.60 cm。

表4 产地、市场样品直径分布

3.2.2 不施用多效唑样品 由表5可知，与产地、市场样品比较，不施用多效唑样品直径在药典范围内的占比提高，提示多效唑可能是造成其直径不合格的主要原因。

3.2.3 多效唑对样品直径分布的影响 由表6可知，随着多效唑施用量增加，样品直径在0.3～0.6 cm范围内占比逐渐降低，大于0.6 cm的逐渐增加，提示多效唑可促进其直径生长，导致超出药典规定。

表5 不施用多效唑样品直径分布

表6 多效唑对样品直径分布的影响

3.3 长度

3.3.1 产地、市场样品 由表7可知，产地、市场样品长度大多符合药典规定(1.5～3.0 cm)，不合格主要表现为小于1.5 cm。

表7 产地、市场样品长度分布

3.3.2 不施用多效唑样品 由表8可知，不施用多效唑样品长度小于1.5 cm的占比高于产地、市场样品，是不合格的主要表现。

3.3.3 多效唑对样品长度分布的影响 由表9可知，随着多效唑用量增加，样品长度整体升高，但大多符合药典规定，提示施用多效唑并非不合格的主要原因。

表8 不施用多效唑样品长度分布

表9 多效唑对样品长度分布的影响

3.4 粗长比 由图1可知，产地、市场样品平均粗长比与试验田不施用多效唑样品接近；中、高剂量多效唑可增加样品直径、长度(P<0.05)，但各剂量之间无显著差异(P>0.05)。

3.5 各成分含量 样品浸出物含量在82.09%～93.90%之间，符合药典标准(不得低于60.0%)；总皂苷含量在0.13%～0.43%之间，均符合药典标准(不得低于0.12%)；总黄酮含量在0.02%～0.28%之间；总多糖含量在58.37%～88.50%之间；麦冬皂苷D含量在0.059～0.611 mg/g之间；甲基麦冬黄烷酮A含量在0.016～0.209 mg/g之间；甲基麦冬黄烷酮B含量在0.006～0.104 mg/g之间。

图1 样品粗长比Fig.1 Crude length ratio of samples

3.6 相关性

3.6.1 性状与各成分含量 由表10可知，中部直径与浸出物、总多糖含量呈正相关，直径、单粒质量与总皂苷、总黄酮、麦冬皂苷D含量显著负相关，长度与麦冬皂苷D含量呈显著负相关，粗长比与麦冬皂苷D含量呈显著正相关，其中直径、单粒质量与总皂苷、麦冬皂苷D含量的相关系数最强。

表10 性状与各成分含量之间的相关性

3.6.2 直径与各成分含量 由表11可知，直径符合药典规定(0.30～0.60 cm)的样品中总皂苷、麦冬皂苷D含量高于其他直径区间的样品(P<0.05)，表明直径超过0.6 cm时药效成分含量显著降低。

表11 直径与各成分含量的相关性

3.6.3 50 g粒数与各成分含量 由表12可知，50 g粒数低于190粒的样品中麦冬皂苷D含量低于粒数大于300的样品中(P<0.05)，表明仅依靠50 g粒数作为分级指标存在缺陷。

表12 50 g粒数与各成分含量的相关性

3.6.4 长度与各成分含量的相关性 由表13可知，长度低于1.5 cm的样品中总多糖含量低于长度1.5～3.0 cm的样品(P<0.05)，但麦冬皂苷D含量更高(P<0.05)。

表13 长度与各成分含量的相关性

3.7 多效唑对各成分含量的影响 由图2可知，施用多效唑(D1～D5)样品中总皂苷、总黄酮、麦冬皂苷D含量低于不施用多效唑(CK组)，总多糖含量略有升高，浸出物、甲基麦冬黄烷酮B含量无规律可循。结合前期实验结果表明，多效唑可显著影响川麦冬外观形态和内在品质，故建议控制它在种植中的应用。

图2 多效唑对各成分含量的影响Fig.2 Effects of paclobutrazol on the contents of various constituents

4 讨论

4.1 川麦冬形态 对主产地、市场流通的106批川麦冬等级药材进行形态统计，对比《中国药典》及《七十六种药材商品规格标准》，发现其形态主要有3个表现，一是优等药材占比大，其中一等川麦冬占比高达82.07%，提示药材存在形态改变；二是药材直径增加，54.16%超过0.60 cm；三是药材长度稳定，仅14.08%小于1.50 cm，7.33%大于3.0 cm。

结合文献[11]报道和产地调查，选择药材残留率最高的多效唑开展连续两年的田间试验。结果显示，随着多效唑用量增加，降低了长度小于1.5 cm的“短川麦冬”占比，增加了长度大于3.0 cm占比。值得注意的是，不施用多效唑的川麦冬仍存在35.16%长度低于1.5 cm；质量分析结果显示，长度低于1.5 cm的除总多糖含量略低外，总皂苷、总黄酮、甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B含量无显著差异，麦冬皂苷D含量更高。

多效唑导致药材直径增加，最高可在35.37%以上，与市场及产地流通的川麦冬直径不合格率高的现象相符，为主要相关因素之一，它为激素类植物生长调节剂，可抑制地上叶片部位疯长，促进根部细胞快速分裂增长，在10月初块根膨大前期施用，可促进块根提前膨大，提升膨大速率，从而导致鲜品个头增大，药材直径增加，直径不合格率显著升高。质量评价结果显示，多效唑的施用还导致总皂苷、总黄酮、麦冬皂苷D含量降低，与药材直径大于0.60 cm的麦冬总皂苷、麦冬皂苷D含量显著低于直径为0.30～0.60 cm者相符。

4.2 次级代谢产物积累 甾体皂苷及高异黄酮类成分[12]为川麦冬的主要次级代谢产物，随着块根的生长逐渐在川麦冬块根中积累，其中甲基麦冬黄烷酮A、甲基麦冬黄烷酮B等成分主要积累在药材表皮[13]。随着块根增加，药材比表面积降低，而且由于多效唑等激素类农药的干扰，当次级代谢产物的累积速度跟不上干物质积累的速度时将导致药效成分含量降低[14-15]。本研究结果显示，多效唑使用后，药材直径、长度、单粒质量均显著增加，尤以直径合格率影响最为显著，川麦冬中甾体皂苷、高异黄酮类化学成分含量降低显著，与前期报道一致[16-18]。因此，一方面应严格控制川麦冬种植中多效唑的施用，另一方面建议将川麦冬直径纳入商品等级标准。

4.3 关于川麦冬等级标准 1984年发布的《七十六种中药材商品规格标准》通过50 g粒数对川麦冬进行等级划分，粒数越少，等级越高，长度、直径、单粒质量越大，因此产地、市场上的特等药材通常为大个川麦冬。然而，由此划分的优等川麦冬直径超过药典的占比可达50%以上，即仅依据50 g粒数存在较大局限。因此，建议在川麦冬商品等级标准中增加直径的限定，从性状、质量2个方面共同控制其流通。