3 545例武汉地区急性呼吸道感染患者7种常见呼吸道病毒的流行病学分析*

魏菁菁，丁进亚，王冬梅，马 巧，刘 莉

中部战区总医院汉口院区检验科，湖北武汉 430014

呼吸道感染是临床最常见的疾病之一，90%以上的呼吸道感染由病毒感染引起，呈现一定的季节和地域分布特点[1-4]。7种常见呼吸道病毒为呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、A、B型流感病毒(IFA、IFB)、副流感病毒(PIV)1、PIV2、PIV3。大量研究表明，各种急性呼吸道感染(ARTI)的呼吸道病毒检出率与其年龄、检测季节、气候条件等因素有关[1-4]。本研究采集2018年1月至2019年9月3 545例ARTI患者咽拭子标本，并对7种常见呼吸道病毒进行检测和分析，为临床ARTI诊治及疾控部门对ARTI的防治提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2019年9月因ARTI到中部战区总医院汉口院区住院的患者作为研究对象，将出院时未诊断为ARTI的病例剔除。符合入选标准的ARTI患者共3 545例。其中男性2 144例、女性1 401例。ARTI患者按年龄段分为0～<7岁2 230例，7～<18岁606例，18～<46岁406例，46～<69岁162例，≥69岁141例。ARTI患者按检测季节分为春季(3～5月)1 160例，夏季(6～8月)804例，秋季(9～11月)491例和冬季(12月至次年2月)1 090例。ARTI患者按照其疾病类型分为肺炎、支气管肺炎类型ARTI患者1 925例，支气管炎、毛细支气管炎类型ARTI患者595例，上呼吸道感染、扁桃体炎类型ARTI患者928例，哮喘类型ARTI患者97例。

1.2仪器与试剂 BX53型荧光显微镜(日本OLYMPUS公司)，7种呼吸道病毒检测试剂盒(上海贝西生物有限公司)。

1.3方法

1.3.1标本收集 由临床医生使用试剂盒配套咽拭子经患者鼻腔在鼻咽部处旋转2～3圈获取黏膜上皮细胞，并放入专用管加入1 mL生理盐水立即送检。若不能及时送检，标本则放在4 ℃冰箱保存。

1.3.2标本处理与检测 将浸在生理盐水内的鼻咽拭子标本剧烈漩涡震荡15 s，500×g离心10 min，加入1 mL磷酸盐缓冲液(PBS)漩涡震荡并以500×g离心10 min，弃去上清液，加入1 mL的PBS，并反复吹吸悬浮细胞层。每孔加入25 μL标本悬浮液，风干后加入冷丙酮固定10 min。加入鼠球蛋白荧光试剂，标本片放入孵箱，37 ℃孵育20 min，浸入洗涤液反复清洗，再用去离子水冲洗。将多余的液体吸干，在固定有细胞的每孔加入1滴封固液，然后盖上盖玻片。在激发光490 nm，发射峰520 nm参数下，使用荧光显微镜观察已染色并封固的标本玻片。

1.3.3质量控制与结果判断 200倍显微镜下每视野找到≥2个绿色荧光细胞即为阳性，否则即为阴性。阴性细胞被Evans Blue染成红色。视野中找到≥2个带绿色荧光的阳性细胞，则判定标本为阳性。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据分析。不同组间7种呼吸道病毒检出率比较用卡方检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.13 545例ARTI患者中7种常见呼吸道病毒的检出率和构成比比较 3 545例ARTI患者中共检出阳性标本470例，阳性检出率为13.26%，其中RSV检出率最高，其次是PIV3。 RSV构成比最高，其次是PIV3。见表1。

表1 7种常见呼吸道病毒的检出率和构成比比较

2.2不同性别ARTI患者之间7种常见呼吸道病毒检出率比较 不同性别ARTI患者之间IFA和PIV1检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。其他5种常见呼吸道病毒检出率在不同性别ARTI患者之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3不同年龄段ARTI患者之间7种常见呼吸道病毒的检出率比较 各年龄段ARTI患者之间7种常见呼吸道病毒总检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。0～<7岁ARTI患者7种常见呼吸道病毒总检出率高于其他年龄段，差异有统计学意义(P<0.05)。0～<7岁、7～<18岁ARTI患者以RSV和PIV3感染为主；18～<46岁ARTI患者以RSV、PIV3和IFB感染为主；46～<69岁ARTI患者以RSV和ADV感染为主；≥69岁ARTI患者以PIV3和IFB感染为主。各年龄段ARTI患者PIV2、PIV3和RSV检出率比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.4不同季节ARTI患者7种常见呼吸道病毒的检出率比较 ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率在冬季和春季较高，夏季和秋季较低，各季节ARTI患者7种常见呼吸道病毒总检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。在冬季、春季和秋季中ARTI患者以RSV感染为主，检出率分别是10.09%、6.11%和5.00%；夏季中ARTI患者以PIV3感染为主，检出率为3.98%。除了ADV和PIV1以外，其他5种常见呼吸道病毒检出率在各季节之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同性别、年龄、季节的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率比较[n(%)]

续表2 不同性别、年龄、季节的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率比较[n(%)]

2.5不同疾病类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率比较 各疾病类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒总检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。和上呼吸道感染、扁桃体炎类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率相比，肺炎、支气管肺炎，以及支气管炎、毛细支气管炎类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率较高，差异有统计学意义(P<0.05)。哮喘类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率最低，和肺炎、支气管肺炎类型，以及支气管炎、毛细支气管炎类型7种常见呼吸道病毒检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。除了哮喘类型以外，其他类型的ARTI患者中以RSV和PIV3感染为主，各疾病类型的ARTI患者RSV检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同疾病类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率比较[n(%)]

3 讨 论

ARTI发病率高、传播快、流行广，严重危害人类健康[5]。本研究结果显示，3 545例患者中，7种常见呼吸道病毒阳性检出标本数为470例，检出率为13.26%，与文献[6-7]报道的检出率结果相似，但是低于文献[8-10]报道的检出率结果。一方面是因为这些研究包括的病毒种类较多，除了7种常见呼吸道病毒以外，还包括鼻病毒/肠道病毒、人偏肺病毒、冠状病毒、人卡博拉病毒、肺炎支原体、衣原体。目前呼吸道病毒检测的方法包括分离培养鉴定、核酸检测、抗体检测、直接抗原检测。分离培养鉴定虽然是病毒病原检测的金标准，但是由于时间较长不易操作，不利于及时指导临床治疗；此外病毒感染6 d以上才能产生IgM抗体，患者既往感染也会产生抗体检测假阳性结果，因此核酸检测和直接免疫荧光法都是目前临床常用的呼吸道病毒检测方法。有研究表明，与直接免疫荧光法相比，分子诊断对病毒的检测更为灵敏和特异[4-5]，然而直接免疫荧光法仍然是国内许多医院使用的方法。本研究中引起ARTI的主要呼吸道病毒是RSV和PIV3，构成比分别为44.89%和20.64%。与多数研究结果一致[3-4，11-12]。

本研究结果显示，在0～<7岁、7～<18岁ARTI患者以RSV和PIV3感染为主；18～<46岁ARTI患者以RSV、PIV3和IFB感染为主；46～<69岁ARTI患者以RSV和ADV感染为主；≥69岁ARTI患者以PIV3和IFB感染为主。这与文献[13-14]报道的结果相似。但何静等[9]报道IFA是上海地区呼吸道感染患儿的主要致病原，这可能与区域和2009年爆发的甲型HIN1流感大流行相关。此外，武汉地区秋冬季儿童可以在社区免费接种流感疫苗，在一定程度上降低了流感病毒的检出率。本研究结果提示，随着年龄的增加，病毒的感染人数和检出率逐渐降低，可能与呼吸道系统功能和免疫系统功能随着年龄的增长而发育成熟完善相关；随着年龄增长，患儿对病毒易感性逐渐下降。因此低年龄段患儿是进行病毒感染预防的重要监控人群，应引起呼吸道感染诊疗的重视。RSV是儿童、老年人和免疫功能低下患者发病和死亡的主要致病原，它对成人住院患者的临床影响已经通过多种多样的分子检测被阐明。在成年人中，RSV会产生多种临床症状，包括上呼吸道感染、严重的下呼吸道感染和基础疾病的加重[15]。本研究中18～<46岁、46～<69岁ARTI患者以RSV感染为主。

本研究结果显示，不同性别ARTI患者之间IFA和PIV1检出率比较，差异有统计学意义(P<0.05)。其他5种常见呼吸道病毒检出率在不同性别ARTI患者之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。这与曾永静等[16]研究结果一致。这两种病毒的感染是否存在着性别的差异有待商榷。

呼吸道病毒感染具有明显的季节性。蒋会婷等[17]研究表明，北京密云区冬季和春季是全年呼吸道病毒检出率较高的季节，其中检出率最高的是流感病毒；黄军等[18]研究表明，中山地区春季、夏季时间长，雨量大，RSV在这两个季节的检出率较高。毛明宇等[8]研究表明，上海地区冬季和夏季的病毒检出率高于其他季节。本地区研究中，ARTI患者在冬季病毒检出率最高，春季次之，而RSV的检出率在这两个季节里也最高，这和文献[19]研究结果一致。春季和冬季是呼吸道病毒感染的好发季节，这主要是由于春季、冬季的温度较低，易引发机体鼻黏膜的血管收缩，导致呼吸道的抵抗力降低[20]；另一方面，武汉地区冬季和春季气温较低，人们户外活动减少，室内聚集较多，加上室内空气不流通，容易导致聚集人群呼吸道病毒的传播。

本研究结果显示，和上呼吸道感染、扁桃体炎类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率相比，肺炎、支气管肺炎，以及支气管炎、毛细支气管炎类型的ARTI患者7种常见呼吸道病毒检出率较高，差异有统计学意义(P<0.05)。提示常见呼吸道病毒更容易引起下呼吸道疾病。

综上所述，本院ARTI高发季节为春季、冬季，引起ARTI的主要病原体是RSV和PIV3，儿童和青少年是易感人群。急性下呼吸道疾病类型的ARTI患者的7种常见呼吸道病毒检出率较高。 本研究为本院ARTI患者的临床诊断治疗及合理用药提供了有力的证据。