系统性红斑狼疮患者血清中HMGB1与IFNα的表达水平及其临床意义

李 鑫

天津市南开区三潭医院检验科，天津 300193

系统性红斑狼疮(SLE)是一种由于机体免疫调节紊乱所致的慢性炎症性疾病，其临床表现多样[1]，体内积聚的致病性自身抗体与抗原结合形成免疫复合物(ICs)沉积于靶器官，ICs可激活树突细胞(DCs)上的Toll样受体(TLR)，引起Ⅰ型干扰素(IFN)系统的变化，通过促进CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和B细胞的一系列自身免疫反应，引起免疫调节异常，尤其是细胞凋亡异常、细胞因子分泌异常等[2]。此过程中，高迁移率族蛋白-1(HMGB1)的释放增加，后者可维持免疫复合物的稳定，促进HMGB1进入内涵体，与TLR接触后引起进一步的自身免疫反应[3]。HMGB1活化DCs，促其产生大量IFNα，后者进一步活化免疫细胞，促进细胞因子生成[4]。HMGB1与IFNα可能在SLE的发病过程中相互促进，级联放大。本研究检测SLE患者血清IFNα、HMGB1及IL-1β等细胞因子水平，以探讨IFNɑ、HMGB1等细胞因子在SLE疾病发生、发展中的作用，并评估IFNα、HMGB1与SLE疾病活动的相关性及这些指标检测的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2019年12月在本院诊治的70例SLE患者(SLE组)作为研究对象，均符合2017年美国风湿病学会和欧洲风湿病协会修订的SLE分类标准[5]，女性63例，男性7例，平均年龄(37.1±8.6)岁；根据SLE病情活动指数(SLEDAI)又将SLE患者分为活动组(SLEDAI≥5)与非活动组(SLEDAI<5)，其中活动组44例，非活动组26 例，活动组、非活动组一般资料比较见表1。同期在本院诊治的15例类风湿关节炎(RA)患者作为RA组，女性13例，男性2例，平均年龄(34.2±7.1)岁。健康对照组为同期在本院体检健康者35例，平均年龄(35.2±7.1)岁。健康对照组、RA组与SLE组在年龄、性别上比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 活动组、非活动组一般资料比较

1.2方法 各组研究对象空腹采静脉血5 mL，1 500 r/min离心15 min，血清于-80 ℃放置待测。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HMGB1(参考区间：HMGB1≤0.2 ng/mL)、IFNα(参考区间：IFNα≤1.8 pg/mL),HMGB1、IFNα水平在参考区间以外范围即为异常。采用免疫磁珠法检测白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-5和IL-6，均依据试剂盒说明书进行检测。

2 结 果

2.1各组IFNα、HMGB1及细胞因子水平比较 SLE组IFNα、HMGB1及细胞因子水平高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)； SLE组IFNα、HMGB1、IL-2及IL-6与RA组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。活动组IFNα、HMGB1、IL-6水平高于非活动组,差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表2 3组IFNα、HMGB1及细胞因子水平比较

表3 活动组与非活动组IFNα、HMGB1及细胞因子水平比较

2.2各指标间的相关性研究 HMGB1与IFNα呈正相关(r=0.76，P=0.012)，HMGB1、IFNα与SLEDAI呈正相关(r=0.65，P=0.013；r=0.41，P=0.031)；多元线性回归分析表明，HMGB1与细胞因子IL-1β、IL-4、IL-5相关(β=-0.07，P=0.011；β=0.03，P=0.021；β=-2.11，P=0.003)，IFNα与IL-1β、IL-4相关(β=2.66，P=0.001；β=-1.21，P=0.003)。

2.3HMGB1异常、正常患者和IFNα异常、正常患者的SLE临床表现比较 HMGB1异常患者肾脏损害、发热占比与HMGB1正常患者比较，差异有统计学意义(P<0.05)；IFNα异常患者关节炎、肾脏损害、发热占比与IFNα正常患者比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 HMGB1异常、正常患者和IFNα异常、正常患者的SLE临床表现比较 [n(%)]

2.4评估活动组与非活动组血清IFNα、HMGB1水平的试验效能 42例HMGB1异常患者中活动组患者为33例、非活动组患者为9例，28例HMGB1正常患者中活动组患者为11例、非活动组患者为17例；38例IFNα异常患者中活动组患者为32例、非活动组患者为6例，32例IFNα正常患者中活动组患者为12例，非活动组患者为20例。试验效能见表5。

表5 SLE患者IFNα与HMGB1血清水平检测的阳性预期值、阴性预期值、灵敏度与特异度

3 讨 论

SLE 是一种自身免疫介导的累及多器官、多系统的弥漫性结缔组织病，其发病机制复杂，近年研究表明[6]，Ⅰ型干扰素在SLE的发病中起重要作用。Ⅰ型干扰素是一种能够有效调控细胞分裂、免疫系统活化、抗病毒感染，并且能够抑制肿瘤生长的重要细胞因子。IFNα为其主要细胞因子，IFNα一般在病毒感染时由浆细胞样树突状细胞(pDC)产生，pDC也称为天然干扰素形成细胞，可产生大量IFNα[7]。在SLE患者中，pDC通过TLR诱导合成IFNα[8]。本研究发现，活动组IFNα、HMGB1、IL-6水平高于非活动组,差异有统计学意义(P<0.05)。QI等[9]研究发现狼疮肾炎小鼠模型的血清IFNɑ水平升高，而有研究者发现SLE相关关节炎小鼠的IFNɑ水平也升高[10]，马元平等[11]报道IFNα治疗的不良反应之一就是发热。以上研究结果证实了SLE患者血清中增高的IFNα水平与SLE的疾病严重程度有关，提示血清IFNα水平的高低可能可以作为一种SLE的诊断标准。

HMGB1是存在于真核细胞核内的非组蛋白染色体结合蛋白[12]。据研究报道，HMGB1可通过活化pCD来启动SLE患者的自身免疫过程，其既是炎症的早期启动者(从部分坏死细胞的被动释放)，也是炎症晚期的促进者(巨噬细胞主动分泌HMGB1)，其不仅本身具有细胞因子样效应，而且可诱导巨噬细胞和中性粒细胞等产生更多炎症介质，进一步放大炎症[13]。本研究结果提示，血清HMGB1可作为评价SLE患者病情活动性的一个指标。本研究结果与文献[14]结果类似，FENG等[15]研究结果提示HMGB1参与了SLE的发病过程，而且与病情活动有关，认为HMGB1可能参与了SLE患者天然免疫激活，释放大量的免疫刺激因子，形成免疫复合物，并沉积在皮肤、肾等组织、器官的小血管床，引起皮肤、肾等靶器官损害。本研究通过对血清IFNα、HMGB1水平区分活动组与非活动组SLE患者的试验效能分析表明，二者能够较好地区分活动组与非活动组SLE患者，具有较好的灵敏度与特异度。

有研究报道，SLE患者血清促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNFa水平升高，且与疾病活动度相关[16]，本研究中IL-6水平也有类似发现。本研究结果发现，IL-1β与HMGB1及IFNα相关，说明IL-1β可能由IFNα/HMGB1相关的免疫反应诱导产生；而且，Th2相关细胞因子IL-4、IL-5与 IFNα/HMGB1的相关性表明Th2相关的体液免疫反应与SLE发病密切相关。SLE是一种典型的自身免疫性疾病，SLE中有多克隆B细胞的活化增殖，进而增加了自身抗体的产生，但分泌自身抗体的多克隆B细胞的活化有赖于自身抗原的驱动和T细胞的辅助。T细胞异常在SLE发病中尤为重要。Th2型细胞因子水平增加，可扩大炎性反应，活化B细胞，导致大量的自身抗体产生[17]。

综上所述，IFNα、HMGB1参与了SLE的发生、发展，与疾病活动度及临床表现均相关。本研究从临床应用角度评估了IFNα/HMGB1区分活动组与非活动组SLE患者的试验效能，其应用前景尚需加大样本量做进一步的研究。