狮子组织细胞肉瘤病理学诊断

2022-01-26王运盛姜瑞婕王昕国欣欣李祥翔赵素芬卢岩张成林

中国动物保健 2021年10期

王运盛，姜瑞婕，王昕，国欣欣，李祥翔，赵素芬，卢岩，张成林,*

（1.北京动物园北京 100044；2.圈养野生动物技术北京市重点实验室北京 100044）

在野生动物饲养管理工作中，疾病防治工作是其重要的组成部分，而众多的致病因素中，肿瘤较为少见，但同样不能忽视[1]。近年来，随着国内圈养野生动物数量的增加以及野生动物诊疗工作的深入，肿瘤发病率呈现逐年上升的迹象。而野生动物肿瘤疾病发生后如何快速确诊，成为了现阶段需要关注的问题。北京动物园兽医院于2019 年收到一例狮子皮下肿物，通过组织病理学方法进行病理学诊断，以期为今后野生动物肿瘤病理学诊断提供对应思路和诊疗方案。

1 材料与方法

1.1 病料（病例概述）

狮子，雄性，自2019 年5 月份以来出现食欲不振，步态不稳、眼观左侧最后肋弓处有一肿物，肿物凸起直径约8cm，为判断肿物性质及制定后续治疗方案，决定对肿物进行手术切除，并进行病理学诊断。

1.2 试验方法

1.2.1 血样化验室诊断狮子术前血样采集，采血前1d 进行隔离观察，禁食16h，采血后进行外周血生理常规检测。

1.2.2 病理样本采集腹侧皮下肿物取样后迅速投入10%的福尔马林溶液，进行病理组织切片前处理。

1.2.3 H.E.染色石蜡切片分别经二甲苯I、II 脱蜡5min，之后浸入无水乙醇/二甲苯（1：1）混合液中5min，依次经无水乙醇I、无水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度复水，下行至双蒸水中，苏木精染色10min，1%盐酸酒精分色数秒，水洗返蓝15min，再依次通过50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脱水后，伊红染色1min，95%乙醇洗涤3 次，再经无水乙醇I、II 各5min，二甲苯I、II 各透明5min，最后用中性树胶封片。切片放置于37℃温箱内过夜烘干后镜检。光学显微镜下观察组织病理学变化情况。

2 结果与分析

2.1 狮子血液生理指标检测结果

经化验室诊断发现狮子中性分叶核粒细胞（82）、单核细胞（7）指标显著高于参考范围，其余指标基本在参考范围内。结合动物临床症状，狮子疑似出现感染或肿瘤（详见表1）。

2.2 狮子肿物病理变化

肿物取材后发现：手触质地较软（16× 13cm），内部纤维化不多，切面湿润，油腻感明显，类似脂肪，肿物深部有囊肿表现（图1A，图1B）。

图1 狮子腹侧皮下肿物临床观察

肿物边缘区：低倍镜下观察可见结缔组织增生不多，增生的结缔组织将肿物区分为大叶区域，大叶区域内细胞大面积蓝染，肿物与周围软组织无明显界限，无特殊结构，呈弥散性浸润性生长（图2A）。高倍镜下观察，细胞核呈椭圆形、三角形，形态各异，嗜碱性较强，大小不一，异型性。胞浆嗜酸性，较丰富，细胞之间有较明显的间隙。细胞间有少量嗜酸性基质成分。有丝分裂象可见。肿物内部及周围有淋巴细胞浸润（图2B）。

肿物实质区：低倍镜下观察，肿物深层区域内结缔组织、血管增生明显，肿物细胞呈束状生长排列（图2C）。高倍镜下观察，梭形细胞形态饱满，生长密集，胞浆细长，膨大，卵圆形，有囊泡，部分核仁扭曲。部分区域可见核仁浓缩，染色质深染。可能观察到典型的红细胞大小不均和细胞核大小不等（图2D）。

此肿物除上述两种表现区域以外，肿物内大面积坏死，血管大量增生（图2E），炎性细胞大量浸润（图2F）。

图2 狮子腹侧肿物病理学观察

3 诊断

经临床特征观察、化验室分析以及组织病理学诊断，狮子腹侧皮下肿物为：组织细胞肉瘤（tissue s 又arcoma），同时发生感染，预后不良。

4 讨论

组织细胞肉瘤起源于树突细胞，主要分为局部型和分散型。在犬科动物，组织细胞肉瘤两种类型均可见到，而在猫科动物此类病例较为少见。局部型组织细胞肉瘤多为局部生长，肿瘤发展后期趋向于淋巴结转移，并随淋巴系统进行全身转移，往往预后不良。

组织细胞肉瘤诊断特点在于其具有多形性，其两种主要的形式为：圆形细胞类型与纺锤形细胞类型。圆形细胞类型：肿瘤主要由大的独立的细胞组成，胞浆双嗜性，偶见胞浆形成空泡，呈现多形态和扭曲的细胞核，每个细胞核有一到两个核仁，如本文中图2B。纺锤形细胞类型：特点是梭形细胞的密集生长，胞浆细长，部分核仁扭曲，如本文中图2D。

组织细胞肉瘤诊断难点在于：①局部型与分散型组织细胞肉瘤的组织病理学特征完全一致；②圆形组织细胞肉瘤可能与其它圆形细胞肉瘤相似，如多形性脂肪肉瘤；③纺锤形组织细胞肉瘤可能与其它梭形细胞肉瘤相似，如分化不良的纤维肉瘤。因此，在对组织细胞肉瘤进行诊断时，需要仔细辨别，必要时加入免疫组化技术来进行判断[2]。

本病例除组织细胞肉瘤外，肿瘤内部大面积坏死（坏死体积占肿瘤体积约50%），同时炎症反应较为强烈，此症状应考虑是由于肿瘤的极速生长，导致肿瘤内营养供应不足引起的坏死，而炎症反应为坏死后出现。

组织细胞肉瘤虽属于低恶性肿瘤，但其具有转移性，故此狮子术后需做好定期检查的准备。

作为常发病，肿瘤在人医领域研究已较为广泛、深入。而由于缺乏相应的病理诊断平台，关于野生动物肿瘤疾病的研究与报道还极为少见，同时野生动物病理从业人员的缺少，也限制了野生动物病理诊断的发展。本次狮子组织细胞肉瘤病例的完成，将病理诊断与临床诊断、化验室诊断进行了整合，为今后相关疾病的提前预判提供了参考依据，也为今后野生动物肿瘤病理学诊断提供对应思路。