新生儿脓毒血症细菌分布与耐药和肠道菌群紊乱的相关性研究

黄德秋，杨 巍，袁 鑫 (上饶市立医院儿科，江西 上饶 334000)

新生儿脓毒血症又称为新生儿败血症，其主要是指致病菌入侵血液循环而引起的一种全身性感染疾病，严重可引起器官功能障碍，死亡率较高[1]。有研究指出，新生儿脓毒血症根据感染时间的不同可以分为早发型(出生后7 d内感染)与晚发型(出生7 d后感染)，而不同类型的疾病其致病菌类型、耐药情况以及临床表现均有所不同[2]。因此，临床必须针对新生儿脓毒血症发病类型深入探究患儿的致病菌类型和耐药情况，针对性给予抗生素治疗，以保证疗效。同时，有学者指出，脓毒血症属于一种急性危重疾病，患者的肠道菌群成分组成会在短时间内发生变化，大量正常共生微生物也会遭受严重损伤，继而引起肠道菌群紊乱，并不利于患者的病情恢复[3-4]。基于此，本文旨在探究新生儿脓毒血症细菌分布、耐药、肠道菌群紊乱的情况，并从肠道微生态失衡角度助力其救治效果。现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料：选取2019年1月～2020年1月我院治疗的128例脓毒血症新生儿作为研究对象，按发病时间分为早发型组与晚发型组各64例。纳入标准：经血培养显示为阳性；温度>38.5℃或者<36℃；白细胞总数>12×109/L或<4×109/L；二氧化碳分压(PaCO2)<4.3 kPa；伴有呼吸、心率增快等现象，患儿符合上述其中两项标准确诊为脓毒血症；患儿家属均了解本次研究，同意参与；足月，日龄≤28 d的新生儿；意识、精神正常的患儿。排除标准：合并先天性疾病的患儿；合并肝、肾功能不全的患儿；凝血功能障碍的患儿。早发型组男36例，女28例；日龄0～28 d，平均(12.25±5.47)d；孕龄37～42周，平均(39.20±0.47)周。晚发型组男34例，女30例；日龄0～27 d,平均(12.84±5.12)d；孕龄37～42周，平均(39.04±0.54)周。两组基线资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，有可比性。本研究经本院医学伦理委员会批准同意。

1.2方法：①采用法国生物梅里埃公司生产的全自动血培养仪(Bact/ALERT3D型)为患儿进行血培养，采用法国法国生物梅里埃公司生产的全自动微生物鉴定仪(VITEK 2-compact型)鉴定菌株。药敏试验质控菌株为大肠埃希菌、金黄色葡萄菌、铜绿假单胞菌，肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌通过ESBLs纸片法筛选和确证试验的阴性、阳性质控菌株。收集两组患儿的血液标本完成真菌培养，之后采用全自动培养仪增菌，按照相关操作进行血培养，而其他标本可通过改良沙氏培养基进行分离培养，对可疑的菌落进行涂片制作和革兰染色，确定真菌之后采用全自动生物鉴定仪鉴定菌种。①采集新生儿治疗前后新鲜粪便，选择4种厌氧菌即双歧杆菌、乳杆菌、拟杆菌和真杆菌的选择性培养基及2种需氧菌即肠杆菌及肠球菌进行定量培养。菌种鉴定：48 h后观察每种培养基上菌落形态特征，并进行涂片、染色、转种及耐氧实验，耐氧实验阳性者按有关文献进行生化等鉴定。菌落计数：选择合适的稀释度做菌落计数，每种菌落总数/g(B/E值)=某稀释度菌落数100稀释倍数。B/E值>1表示肠道菌群正常，反之肠道菌群失调，B/E值与肠道菌群失调程度呈反比，数值越低则说明失调程度越严重。③收集患儿治疗前后的3ml空腹静脉血，静置之后放入离心机分离，以2 000 r/min离心10 min，取上层血清，放入冷藏室保存(-80℃)待检。使用免疫定量分析仪(生产厂家：南京基蛋生物科技有限公司，型号：FiA8000)以及配套试剂盒检测降钙素原(PCT)和C-反应蛋白(CRP)含量，PCT检测方法为化学发光法，CRP检测方法为胶体金法。PCT<0.1 ng/ml、CRP<10 mg/L为正常。④治疗方法：根据患儿实验室指标结果进行早期目标导向治疗，并在此基础上两组均给予双歧杆菌三联活菌片(生产厂家：内蒙古双奇药业股份有限公司，批准文号：国药准字 S19980004，规格：0.5 g/片)治疗，使用温水溶解后鼻饲，1片/次，2次/d，以连续治疗5d为1个疗程，共治疗2个疗程。

1.3观察指标：①两组患者均给予血培养和菌株鉴定，总结其菌群分布和耐药情况。②对比两组治疗前后PCT和CRP水平和菌落计数。

2 结果

2.1总结两组患儿菌群分布情况：早发型组共检测出91株病原菌，其中革兰阳性菌58株，革兰阴性菌23株，真菌10株；而晚发型组共检测出73株病原菌，其中革兰阳性菌35株，革兰阴性菌30株、真菌8株，两组各菌株相比差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 总结两组患儿菌群分布情况[例(%)]

2.2总结两组患儿的主要革兰阳性菌耐药情况：早发型组与晚发型组的金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、屎肠球菌耐药率较高的均为青霉素、红霉素，而无乳链球菌耐药率较高的是红霉素和四环素。见表2、表3。

表2 早发型组患儿的主要革兰阳性菌耐药情况(例)

表3 晚发型组患儿的主要革兰阳性菌耐药情况(例)

2.3对比两组患儿治疗前后的PCT、CRP水平和菌落计数：治疗前，两组的PCT、CRP水平和菌落计数相比，差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后，两组的PCT、CRP水平均低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；两组的菌落计数高于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；两组治疗后的PCT、CRP水平和菌落计数相比，差异无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 对比两组患儿治疗前后的PCT、CRP水平和菌落计数

3 讨论

新生儿免疫功能低下，一旦遭到致病菌侵袭，极易引起全身性炎性反应，诱发脓毒血症，而且患儿感染之后其临床表现并无特异性，必须通过实验室相关指标检测评估疾病才能针对性合理使用抗生素治疗[5]。本次研究结果显示，早发型组的病原菌株检出率高于晚发型组，且均以革兰阳性菌为主要病原菌。可见，革兰阳性菌仍是新生儿脓毒血症感染的主要致病菌。晚发型组患儿出生后经过喂养免疫功能会相较于早发型组患儿强，能有效抵御一部分致病菌，因此其检测出的致病菌株更少，但二者的耐药情况较为相似[6]。本次研究结果显示，治疗后两组的PCT、CRP水平均低于治疗前；两组的菌落计数高于治疗前，这说明通过双歧杆菌三联活菌片鼻饲治疗新生儿脓毒血症，能有效纠正患儿肠道菌群紊乱现象，在辅助疾病治疗中有重要意义。CRP属于一种急性蛋白，正常情况下人体中的CRP水平极低，一旦出现感染或者损伤时，CRP水平才会异常升高，其为一种炎性反应标志物[7]。PCT是一种蛋白质，当人体遭到寄生虫、细菌、病菌感染时或者出现器官衰竭、脓毒血症时，该水平会异常升高，其能良好反映出全身性炎性反应的活跃程度[8]。有研究指出，菌血症诱发的前提是肠道菌群严重失调[9]。因此，一旦患儿发生脓毒血症之后，肠道中的上皮细胞便遭到严重破坏，引发肠道菌群紊乱，肠杆菌属、肠球菌属比例会异常升高[10]。肠道是人体最大的内毒素库与微生物库，以往，大部分医生在实施脓毒血症救治时，往往容易忽略患者肠道菌群紊乱的治疗，最终有可能会影响疗效和患者预后。本次研究通过双歧杆菌三联活菌片鼻饲治疗，能有效调整患儿肠道菌群平衡，直接为患儿补充人体所需的正常生理细菌，抑制和清除危害细菌，恢复患儿的胃肠道功能。通过肠道功能调理，也能提高患儿的肠道免疫力，增加营养吸收，增强患儿的抗病能力，快速降低患儿的PCT、CRP水平，保证菌落计数，在新生儿脓毒血症治疗中起到辅助功效。

综上所述，细菌分布、耐药情况与新生儿脓毒血症感染时间有一定的相关性，该病感染多以革兰阳性菌为主要病原菌，会引起患儿肠道菌群紊乱，临床医师应及时了解患儿的细菌分布与耐药情况，再给予肠道药物辅助治疗，以调节患儿肠道菌群平衡。