超声波辅助酶解法提取一点红多糖测定研究

吉月芸 陈 文 王湘君 苏利兴 黄晓玲 吴玥函 张瀚分

①海南热带海洋学院海洋理学院 ②海南热带海洋学院水产与生命学院

经查阅大量相关文献，可知一点红多糖的功效主要有抗肿瘤、抑制炎症、显著提高免疫力等。一点红多糖的提取技术有酶法、酸法、微波、超声波提取法和热水提取法等[2]。本文拟采用超声波-酶辅助提取一点红多糖，通过温度、时间、料液比等单因素变量进行正交试验，对多糖进行提取，采取响应面优化、极差分析和方差分析确定最佳提取方案，为一点红多糖后续的研究提供一点借鉴[1]。

1 前言

一点红，又称为红花草，属菊科，是中国传统的中药材，在我国民间被广泛的使用。其不仅是花红片、醒脾养儿冲剂等主要的原料药材，并且还常常被用来作为野菜、凉茶等使用[4]。一点红产于我国云南、贵州、海南、安徽、四川、湖南、湖北等多个地区。在全球大概有100多个种类，多产于亚洲、非洲热带亚热带，些许产于美洲[3]。一点红喜潮湿、温暖阴凉的生活环境，常常生长于湿润、疏松的地方，但也耐干旱、耐贫瘠，可以在干燥的荒坡上生长。一点红味道有些许苦还有点微辛，我们主要摘取其嫩叶食之，因为它有清热解毒作用；可以防治感冒风热，能治疗咳嗽、急性扁桃体炎、泄泻、尿道炎等疾病。查阅大量文献可知一点红的研究价值很广泛，且应用价值非常高，其中一点红黄酮的研究比较热门，而对其含有的多糖的研究非常匮乏。一点红的多种功效用途使人们对其研究不断深入，本文通过拟用超声波-酶辅助提取一点红多糖，为后续的发展研究提供一些借鉴。

2 一点红研究现状

一点红具有较高的药理价值，有显著提高免疫力、抵抗病毒、抑制炎症、抗辐射等作用[5,13]。为此，一点红受到诸多学者的关注，越来越多的人对一点红进行不断深入的研究，比如倪小智[3]采用最常见的热水浸提法研究出最佳提取方案，以作用温度、料液比、作用时间、次数为单因素，提取一点红多糖，研究结果为：作用温度为70℃、液料比30:1、提取2次、作用时间2h时工艺最佳。田培燕、陈应康[11]等探讨研究一点红对STZ诱导糖尿病大鼠是否有降低血糖的功效，若有则探究其作用机理；经过实验发现：一点红有降低糖尿病大鼠血糖、对胰腺细胞进行保护、治疗糖尿病与其并发症状等功效。赖红芳[12]等研究出一点红多糖最佳提取工艺，利用超声波法、正交实验的方法，观察一点红多糖提取，即用料液比为1:20、作用功率60 W、作用时间60 min、提取温度50 ℃，此时提取一点红多糖的产率最高；实验结果表明：超声波法提取一点红，其所得产率较高、省时、有效成分的破坏极小等优点，有一定的推广性。

3 一点红多糖提取综述

3.1 一点红多糖的提取方法

经查阅文献可知，热水浸提法[6]提取多糖成本较低、工艺简单不需要特殊仪器设备，是目前工业上应用最多的方法，但是提取率低、并且需要耗费较多的时间和原料；碱解法[9]与热水浸提法相比，碱解法的提取时间短，多糖的产率高，但碱解法提取液中会残留有较多杂质，提取液稠度增大，难以通过过滤的方法将杂质去除，这对成品有较大的影响；微波提取技术[7]是一种新式多糖提取技术，其作用时间短、成本低、多糖产率高。但微波提取时间过长会破坏多糖的结构，降低多糖的活性；超声波提取法[10]能以最快速度破坏所提取物质的细胞，可以防止其他的有效成分被破坏。用其提取多糖时，高效省时、可以在很大程度上提高多糖的提取率，且它所需溶剂较少、操作简单易懂、对环境的污染度小。酶解法[8-9]提取多糖有两种提取方法，即为单酶提取和复合酶提取，都是以破解细胞使得细胞能释放出多糖，优势在于酶解法需要时间较短，作用条件温和，能有效分解一点红细胞壁，使多糖能释放出来。

超声波辅助提取法[14]对细胞的破坏能力极强，而酶解法能够很好的保留多糖的活性。如果将两种提取的方法结合起来，可以更好的体现出两种提取方法的优势。为此本文研究拟用超声波辅助酶解法提取一点红多糖，且超声波辅助酶解法可以成为日后提取多糖的一个研究方向。

3.2 拟用超声波辅助酶解法提取多糖

对一点红样品进行预处理，制取备用溶液，以提取温度、时间、功率、料液比为单因素变量，结合极差、方差分析及响应面优化来确定一点红多糖的最优提取参数。采用超声波辅助酶解法提取一点红多糖，使用HPLC法检测一点红多糖含量，计算粗多糖的提取率。

4 结论

目前，一点红多糖已经成为新时代发展的一个研究热点，其含有的多种功效用途使得人们的研究不断深入，且一点红在我国多个地区分布广泛，其原料价格低廉易得，而多糖在人体中又充当着不可或缺的重要部分，使得其在医药方面的市场及前景有非常大的空间。本实验以提取时间、温度、料液比、功率为单因素变量，结合极差、方差分析及响应面优化来确定一点红多糖的最优提取参数，且拟用超声波辅助酶解法提取其多糖，旨在为其深入研究提供一些参考。