安神补心六味丸对小鼠自主活动及镇静作用实验研究

刘小伟，美 丽，新图雅，白塔那，于 水，陈红梅*，王秀兰

(1.内蒙古民族大学附属医院，内蒙古 通辽 028000；2.内蒙古民族大学蒙医药学院，内蒙古 通辽 028000)

随着经济社会的高速发展，生活节奏快、作息不规律、饮食不当等因素严重影响身心健康，心血管疾病也逐渐呈年轻化发展趋势，已成为我国居民的首要致死因素[1]。安神补心六味丸为蒙医药经典复方制剂，载于《中华人民共和国卫生部药品标准·蒙药分册》，有祛“赫依”、镇静等功效，用于治疗心慌，气短等症，对于心赫依病(心脏神经官能症)[2]临床疗效显著。本文通过实验研究蒙药安神补心六味丸对小鼠自主活动及睡眠作用的影响，观察其镇静安神作用，为进一步开发研究药物提供实验依据。

1 实验材料

1.1 实验动物

健康昆明小鼠(雌雄各半)210只，体重(20±2)g，购于辽宁长生生物技术股份有限公司(辽宁省实验动物资源中心)，实验动物生产许可证号SCXK(吉)：2016-0003。饲养温度22～25 ℃，湿度45%～65%，光照12 h，明暗交替，给予标准饲料和饮用水，饲养环境为清洁级。

1.2 实验药品

安神补心六味丸(批号：191218，内蒙古奥特奇蒙药股份有限公司生产)；地西泮片(批号：20200403，华中药业股份有限公司生产)；咖啡(批号：20200909HO，广东省东莞雀巢有限公司)；戊巴比妥钠(批号：268595)；INTERNATIONAL LABORATORY USA(美国国际实验室)；氯化钠注射液(批号：2002111210，吉林省都邦药业股份有限公司生产)。

1.3 仪器与设备

ZZ-6小鼠自主活动测试仪和小动物行为学系统(成都泰盟科技有限公司)；SQP型电子分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司)。

2 实验方法

2.1 安神补心六味丸对正常情况下小鼠自由活动的影响

将50只小鼠随机分为5组，分别为正常组，安神补心六味丸低、中、高剂量组和阳性对照组，每组10只。安神补心六味丸低、中、高剂量组给药量分别为1.56 g/kg、3.12 g/kg、4.56 g/kg，阳性组给予地西泮0.2 mg/kg，连续给药14 d。末次灌胃给药30 min 后将各组小鼠依次置于自主活动记录仪中，适应 5 min，在开启仪器后测定5 min 内自主活动次数和站立次数。

2.2 安神补心六味丸对兴奋模型小鼠自由活动的影响

将60只小鼠随机分为6组，分别为正常组、模型组、安神补心六味丸低、中、高剂量组和阳性对照组，每组10只。正常组以外50只小鼠分别灌胃咖啡液(1.86 g/kg)建立兴奋小鼠模型，再给予相应的药物，连续给药14 d。安神补心六味丸低、中、高剂量组和阳性对照组的给药量与“2.1实验”的给药量一致。末次灌胃给药30 min 后把各组小鼠依次置于自主活动记录仪中，适应5 min，在开启仪器后测定5 min内自主活动次数和站立次数。

2.3 安神补心六味丸协同阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠指数、睡眠率的影响

取50只小鼠，分组与给药量与“2.1实验”的一致。灌胃给药(1次/d)，连续10 d。于末次给药1 h后对各组小鼠腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠35 mg/kg，观察各组小鼠睡眠指数，并计算睡眠率。

2.4 安神补心六味丸协同睡眠剂量戊巴比妥对小鼠睡眠潜伏期、睡眠时间的影响

取50只小鼠，分组与给药量与“2.1实验”的一致。灌胃给药(1次/d)，连续10 d。于末次给药1 h后对各组小鼠腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠50 mg/kg，观察各组小鼠睡眠潜伏期及睡眠时间的变化。

2.5 实验观察指标

本实验以小鼠睡眠时间、觉醒时间、睡眠率、睡眠潜伏期时间作为了各组间的观察指标。即小鼠翻正反射消失1 min以上可作为进入睡眠时间；小鼠恢复翻正反射1 min以上为觉醒时间；睡眠率=(入睡动物数/每组动物数)×100%；腹腔注射戊巴比妥钠到翻正反射消失时间定义为睡眠潜伏期时间[3-5]。

2.6 统计学方法

3 实验结果

3.1 安神补心六味丸对正常情况下小鼠自由活动的影响

与空白对照组相比较，各给药组不同程度的减少小鼠的自主活动次数和站立次数，其中安神补心六味丸高剂量组和地西泮组显著减少(P<0.05，P<0.01)。结果见表1。

表1 安神补心六味丸对正常情况下小鼠自由活动的影响

3.2 安神补心六味丸对兴奋模型小鼠自由活动的影响

与空白对照组比较模型组小鼠自主活动和站立次数明显增多(P<0.05)。与模型组相比较，各给药组不同程度减少小鼠的自主活动次数和站立次数，其中安神补心六味丸高剂量组和地西泮组小鼠的自主活动和站立次数明显减少(P<0.05，P<0.01)。结果见表2。

表2 安神补心六味丸对兴奋模型小鼠自由活动的影响

3.3 安神补心六味丸协同阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠指数、睡眠率的影响

与空白对照组相比较，安神补心六味丸各剂量组不同程度地增加小鼠睡眠指数，地西泮组小鼠的睡眠指数明显增加(P<0.01)。结果见表3。

表3 安神补心六味丸协同阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠指数、睡眠率的影响

3.4 安神补心六味丸协同睡眠剂量戊巴比妥对小鼠睡眠潜伏期、睡眠时间的影响

与空白对照组相比较，各给药组不同程度地减少小鼠的睡眠潜伏期、增加睡眠时间，其中安神补心六味丸高剂量组和地西泮组显著增加睡眠时间，地西泮组显著减少睡眠潜伏期(P<0.05，P<0.01)。结果见表4。

表4 安神补心六味丸协同睡眠剂量戊巴比妥对小鼠睡眠潜伏期、睡眠时间的影响

4 结论

本文中所述对蒙药安神补心六味丸进行的药理学实验研究在对该复方制剂相关研究中尚属首次，通过“3.1”和“3.2”实验可知，实验中各给药组小鼠的自主活动次数和站立次数均不同程度地减少，其中安神补心六味丸高剂量组和地西泮组显著减少(P<0.05，P<0.01)；“3.3”实验发现，安神补心六味丸各剂量组小鼠睡眠指数不同程度地增加；“3.4”实验发现，安神补心六味丸高剂量组和地西泮组显著增加小鼠睡眠时间，地西泮组显著减少小鼠睡眠潜伏期(P<0.05，P<0.01)。以上结果表明蒙药安神补心六味丸具有明显的安神、镇静的作用。

5 讨论

蒙药安神补心六味丸为蒙医药经典复方制剂，对心赫依病引起的心慌、心悸、气短、心颤、命脉赫依、心激荡等症具有良好的治疗作用，是蒙医治疗心脏病的常用药物。蒙医药传统核心理论“三根学说(赫依、希拉、巴达干)”认为三根中任何一方在人体中偏盛或偏衰，会使机体平衡失调，从而导致疾病发生。心赫依是指赫依偏盛后窜进心脏，与巴达干相搏导致心脏功能紊乱的病症。据《四部医典》记载：“治心、主脉、大肠之病，应以抑赫依为主。” 临床上心赫依偏盛病势轻者有头昏失眠、心悸、心神不安、心烦易怒、手足颤抖等症状，重者有胡言乱语、脉象芤、时而停搏、尿清有泡沫等症，治疗时当宜以镇赫依(镇静)、安心(安神)为原则。

对小鼠进行自主活动实验是评价中枢神经系统兴奋状态的一项重要指标，小鼠自主活动次数与大脑皮层的兴奋状态密切相关，两者间呈正相关[3-5]。本文通过实验发现，安神补心六味丸可显著减少小鼠自主活动次数与站立次数，表明该药物具有良好的镇静、安神作用。同时实验组与对照组小鼠比较，给药后一周内活动与站立次数明显增多，一周后逐渐减少，14 d后差异显著，镇静安神疗效明确，可能与该药物先强心、后安神的作用有关。

通过观察受试药物对巴比妥类药物诱导小鼠睡眠的作用影响是观察药物安神、催眠作用的经典方法[6-8]。本实验采用阈下/睡眠剂量戊巴比妥钠协同睡眠实验观察小鼠睡眠指数、睡眠率、睡眠潜伏期时间、睡眠时间等，结果表明安神补心六味丸可有效增加阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠指数、提高睡眠率，缩短睡眠剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期，并且延长其睡眠时间。

本研究表明，蒙药安神补心六味丸具有明显的安神、镇静作用，其疗效与蒙医传统理论中所述治疗理念紧密贴合，尤其对心血管疾病疗效突出。但该药物的作用机制尚未明确，因此，应结合蒙医基础理论，开展更深入广泛的实验研究，以逐步阐明其现代科学内涵。