HCY、AST/ALT、GGT、MCV与酒精性肝硬化的相关性研究

钟红梅，朱金朋，韩遵文，田蕾

（锦州医科大学附属第一医院 消化内科，辽宁 锦州 121000）

本世纪初，有研究报道，截至2003 年酒精性肝硬化患者已占据我国肝硬化患者的24.0%，现全球因酒精性肝硬化死亡患者人数已接近与因肝硬化死亡人数的一半［1］，而酒精性肝硬化的预后与早期发现及干预密切相关，戒酒者的5 年存活率为63%，而继续饮酒者只有40%［2］，但是迄今为止尚缺乏高度敏感性和特异性的诊断指标。为了能更好地早期发现、优化临床诊治、改善患者预后，本研究主要分析临床实用性和可操作性高的同型半胱氨酸（HCY）、谷草转氨酶/谷丙转氨酶（AST/ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）、平均红细胞体积（MCV）这四项指标作为检测指标，单独检测及联合检测这四项指标在酒精性肝硬化中的诊断价值及其在病情评估中的应用价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料

收集锦州医科大学附属第一医院2019 年9 月至2020 年9 月期间住院的肝硬化患者共300 例，将符合条件的酒精性肝硬化患者82 例及符合条件并排除酒精性肝硬化的其他肝硬化患者95 例纳入研究，并收集锦州医科大学附属第一医院门诊不饮酒的健康体检者88 例为健康对照组纳入研究。本研究通过锦州医科大学附属第一医院伦理委员会批准，经过患者及家属同意并签署同意书。

纳入标准：实验组：①符合2018 年修订版的《酒精性肝病防治指南》［1］中酒精性肝病诊断标准；②有肝硬化的临床表现和肝硬化的影像学特点或肝活检病理结果。非酒精性肝硬化对照组：已明确诊断为肝硬化并已排除酒精因素所致的患者。

排除标准：①年龄<15 岁组或>75 岁组；②合并脑血管疾病、心血管疾病、肾功能衰竭、呼吸衰竭、恶性肿瘤等；③因转院、死亡、拒绝抽血化验等导致数据不足或丢失的患者；④近2 月曾补充维生素B6、B12 及叶酸的患者。

1.2 检查指标和方法

住院患者住院次日清晨、门诊健康体检者当日空腹采血，无菌管静脉抽血2 mL 室温静置30 min，3 000 r/min 离心10 min，分离血清，应用贝克曼AU-480 全自动生化分析仪速率法测定血浆中HCY；AST/ALT、GGT 检测由AU5800 全自动分析仪（日本）及配套试剂盒完成；血常规采用Sebia 公司的Hemalaser 全自动血液分析仪（法国）及配套试剂盒检测，从而获得MCV。

1.3 方法

1.3.1 分组 将酒精性肝硬化患者设为实验组，并根据第15 版《实用内科学》［3］中肝功能Child-Pugh 分级将其分为A、B、C 三组，将健康不饮酒体检者及非酒精性肝硬化者设为对照组，前者为对照组1，后者为对照组2。

1.3.2 观察指标 收集实验组及对照组的一般及检验资料：年龄、体质量指数（BMI）、吸烟史、HCY、GGT、AST/ALT、MCV。

1.4 统计学方法

应用SPSS 26.0 统计软件进行数据统计分析：通过单样本K-S（1）检验，符合正态分布的计量资料用均数±标准差（）表示，不符合正态分布的计量资料用中位数和四分位数间距M（P25,P75）表示；多样本计量资料间的比较采用克鲁斯卡尔-沃利斯单因素ANOVA 检验，组间比较时对P值进行Bonferroni 校正；通过绘制受试者工作特征曲线（receiver operating curve,ROC），计算各指标单独及联合诊断的敏感度、特异度和曲线下面积（area under ROC curve,AUC），以此分析诊断效能。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 实验组与对照组检验资料比较

实验组血清HCY、AST/ALT、GGT、MCV 指标高于非酒精性肝硬化对照组及健康对照组，差异有统计学意义（P<0.05），但在非酒精性肝硬化对照组及健康对照组间HCY、AST/ALT、MCV，差异无统计学意义（P>0.05），非酒精性肝硬化对照组GGT 高于健康对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。上述结果提示血清HCY、AST/ALT、MCV与酒精性肝硬化的发生有关，血清GGT 升高与酒精性肝硬化、非酒精性肝硬化均相关。

表1 各检测指标在实验组及对照组比较 ［M（P25,P75）］

注：HCY：实验组与两个对照组比较，P均<0.05；两个对照组间比较，P=0.429。AST/ALT：实验组与两个对照组比较，P均<0.05；两个对照组间比较，P=0.04。GGT：实验组与对照组间两两比较，P均<0.05。MCV：实验组与两个对照组比较，P均<0.05；两个对照组间比较，P=1.00。

2.2 HCY、AST/ALT、GGT、MCV 单独检测及四项指标联合检测诊断酒精性肝硬化

HCY、AST/ALT、GGT、MCV 单独检测诊断酒精性肝硬化ROC 曲线下的面积分别为0.909、0.892、0.758、0.816，四项指标联合检测时可升至0.972。见图1。

图1 HCY、AST/ALT、GGT、MCV 单独检测及四项指标联合检测的ROC 曲线

2.3 HCY、AST/ALT、GGT、MCV 对酒精性肝硬化的诊断价值

分别分析血清HCY、AST/ALT、GGT、MCV单独检测对酒精性肝硬化的诊断效能，各检测指标。见表2。

表2 各检测指标对酒精性肝硬化的诊断价值

2.4 酒精性肝硬化患者不同Child-Pugh 分级血清HCY、AST/ALT、GGT、MCV 比较

血清HCY 水平在各期酒精性肝硬化中，差异有统计学意义（P<0.05），随着Child-Pugh 增高，血清HCY 呈逐渐升高趋势。血清MCV 仅在Child-Pugh 分级A 级及C 级间比较差异有统计学意义（P<0.05），血清AST/ALT、GGT 水平在各期酒精性肝硬化中比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表3。

表3 各检测指标与酒精性肝硬化患者Child-Pugh 分级的相关性 ［M（P25,P75）］

3 讨论

酒精是世界范围内肝病的主要原因，进入机体的酒精90%以上在肝脏代谢，对肝脏有明显的毒性作用，酒精性肝病（ALD）包括从酒精性脂肪变性到肝硬化的各种疾病，酒精性肝硬化为酒精性肝病的终末阶段，美国ALD 死亡居第10位［4-5］。近年来，我国酒精性肝硬化患者逐渐增多，已成为肝硬化的主要病因之一，而酒精性肝硬化的预后与早期发现及干预密切相关，HOLDER 等［6］检查了北卡罗来纳州每月的肝硬化死亡率数据，发现酒精滥用治疗与肝硬化死亡率有显著的短期滞后关系，治疗增加3 个月后，肝硬化死亡率下降。并且目前酒精性肝硬化的确诊主要通过肝活检，虽然此方法相对安全，但毕竟是有创操作，仍存在一定的风险性及并发症，且患者的接受度差，因此，建立无创的、简单易行的、易被患者接受的诊断方法具有重要意义。

HCY 是蛋氨酸代谢产生的含硫氨基酸，是甲基化反应的关键中间体，肝脏在蛋氨酸代谢中起着中心作用，因为每天摄入的蛋氨酸有近一半在肝脏中代谢［7］。本研究中，笔者测定了酒精性肝硬化患者HCY，结果较正常值明显升高，比较分析实验组和对照组的HCY 发现酒精性肝硬化患者HCY 高于健康对照组及非酒精性肝硬化对照组（P<0.05），表明酒精性肝硬化患者HCY 呈高表达状态，可能有以下机制参与：乙醇的摄入主要抑制体内一种重要的细胞酶——蛋氨酸合酶（MS）的活性，MS 参与了HCY 的再甲基化，并且乙醇的摄入减少了人体对维生素B6、维生素B12、叶酸等物质的摄入和吸收［8-10］。研究表明，HCY 的升高抑制对肝脏正常功能至关重要的各种甲基转移酶来减少必要的甲基化反应，以及上调内质网依赖性凋亡和脂质合成途径的激活。这些后果的最终结果是增加脂肪沉积、增加细胞凋亡、损伤蛋白的积累和各种信号通路的改变，有这些最终都会导致肝脏的进行性损伤［8］。在本研究中，HCY 对于酒精性肝硬化诊断的敏感度、特异度分别为85%、95%，且Child-Pugh 分级越高，HCY越高（P<0.05），这与GARCÍA-TEVIJANO 等［11］的研究是一致的。综上所述，HCY 对于酒精性肝硬化的诊断及病情评估存在重要的临床意义。

AST 和ALT 主要存在于肝脏中，是反应肝功能的两种重要的酶，AST 是一种线粒体酶，酒精摄入易损坏线粒体，可能与乙醇代谢导致氧化应激、脂质过氧化反应等相关，进而导致血清AST升高［12］，众多研究表示酒精的摄入对ALT 的影响不如AST 明显，进而导致AST/ALT 比值升高。本研究中，酒精性肝硬化患者与对照组比较AST/ALT 比值升高，差异具有统计学意义，AST/ALT检测酒精性肝硬化的敏感度与特异度分别达84%和79%；GGT 是一种膜结合糖蛋白酶，它催化谷胱甘肽的-谷氨酰胺部分转移到各种肽受体。慢性乙醇摄入已知会导致血清GGT 升高［9］，国外曾有研究［13］报道，GGT 检测酒精性肝硬化的敏感度与特异度分别达65%和83%，本研究与该报道结果基本一致；MCV 是衡量红细胞大小的有用指标，本研究表明，酒精性肝硬化患者MCV 比值较对照组明显升高，差异具有统计学意义，这可能与酒精摄入影响叶酸及维生素B12 吸收、血液中的乙醇损坏红细胞膜的脂质和蛋白质成分以及乙醇对骨髓的毒性作用等相关［14］，综上所述，AST/ALT、GGT、MCV 对于酒精性肝硬化均有一定的临床诊断意义，但其敏感度及特异度均低于HCY，且HCY 越高，Child-Pugh 分级越高，患者病情越重（P<0.05），故HCY 是酒精性肝硬化的一个良好辅助诊断指标，且四项指标联合可将敏感度提高至93%。

本文研究不足：样本量较小，且酒精性肝硬化患者基本都是男性，无法排除性别因素本身对于各指标的影响，且来锦州医科大学附属第一医院住院治疗的患者大部分已进入肝硬化失代偿期，代偿期患者量较少，可能对于研究各指标对于肝硬化分级造成干扰。