RF、Ig、ANA与抗ENA抗体检测在类风湿关节炎患者诊断及预后分析中的价值

赵婵媛，闻苗苗

陕西省西安市第五医院检验科，陕西西安 710082

类风湿关节炎(RA)为一种常见的自身免疫性疾病，在我国发病率为0.28%～0.42%[1]。目前，RA诊断主要根据患者的临床表现，如长时间晨僵、关节炎症、疼痛、肿胀、功能障碍等，但早期RA往往不具有典型症状，临床中难以做出准确判断[2]。类风湿因子(RF)是最早用于RA诊断的血清学指标，灵敏度较高但特异度较差，使得其在RA诊断中应用受限[3]。免疫球蛋白(Ig)是具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白的统称，对RA诊断具有重要意义[4]。近年来多种和RA相关的抗体被发现，如抗核抗体(ANA)、抗可提取性核抗原多肽(ENA)抗体等，被认为是RA早期即出现的特异性抗体，对RA具有较高的诊断价值[5]。因此，本研究检测了RA患者和非RA患者、体检健康者血清RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体水平差异，旨在探讨以上指标对RA的诊断及预后评估的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年6月至2020年6月本院收治的71例RA患者(RA组)、55例非RA自身免疫性疾病患者(非RA组)为研究对象。RA组纳入标准：(1)均符合RA诊断标准[6]；(2)初治患者。排除标准：(1)其他风湿性疾病、自身免疫性疾病患者；(2)恶性肿瘤患者；(3)合并心、肝、肾等严重功能障碍患者；(4)妊娠、哺乳期患者；(5)急性感染性疾病患者。RA组中男32例、女39例，年龄35～65岁、平均(51.09±12.57)岁。非RA组均明确诊断为相应非RA自身免疫性疾病，其中男25例、女30例，年龄33～64岁、平均(50.84±12.88)岁，包括33例系统性红斑狼疮、14例混合性结缔组织病、8例干燥综合征。并选取30例同期体检健康者作为对照组，其中男14例、女16例，年龄34～65岁、平均(51.42±11.94)岁。3组受检者性别、年龄等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1治疗方法 RA组患者接受3个月的标准化治疗[7]，氨甲蝶呤(生产厂家：上海上药信谊药厂有限公司；批准文号：国药准字H31020644；规格：每片2.5 mg，共100片；用法用量：口服，每次5～10 mg，1次/天，1～2次/周)、来氟米特(生产厂家：江苏亚邦爱普森药业有限公司；批准文号：国药准字H20080420；规格：每片10 mg，共10片；用法用量：口服，每次20 mg，1次/天)、柳氮磺吡啶(生产厂家：北京嘉林药业股份有限公司；批准文号：国药准字H20054246；规格：0.25 g；用法用量：口服，每次0.5 g，3次/天)，并在医师指导下适量补充维生素D。

1.2.2检测方法 抽取3组受检者空腹状态静脉血5 mL(RA组为入院时及治疗3个月后，非RA组及对照组均为入院时抽取)，3 000 r/min离心处理10 min，分离血清，-80 ℃保存待检。采用免疫比浊法检测待测标本中RF、IgA、IgG、IgM水平，RF试剂盒购自深圳市生科源技术有限公司；IgA、IgG、IgM试剂盒购自山东博科生物产业有限公司，检测仪器为贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析仪；采用间接免疫荧光法检测待测标本中ANA水平，试剂盒购自德国欧蒙医学实验诊断股份公司；采用免疫印迹法检测待测样本中抗ENA抗体水平，试剂盒购自德国欧蒙医学实验诊断股份公司。严格按照试剂盒说明书进行操作。

结果判读：RF、IgA、IgG、IgM为定量分析，ANA、抗ENA抗体为定性分析。RF>20 IU/mL判定为阳性；IgA、IgG、IgM参考范围：0.69～3.82 g/L、7.23～16.85 g/L、0.63～2.77 g/L；ANA滴度≥1∶100判定为阳性；抗ENA抗体滴度≥1∶80判定为阳性。

1.2.3预后评估及分组 RA组患者接受3个月标准化治疗后，采用RA 28个关节病情活动评分表(DAS28)评估其预后[8]，其中DAS28评分≤3.2分代表疾病缓解，纳入缓解组(45例)；DAS28评分>3.2分代表疾病活动，纳入活动组(26例)。DAS28评分=(0.70×红细胞沉降率+0.28×肿胀关节数+0.56×压痛关节数)×1.08+0.16。

2 结 果

2.13组受检者血清RF、抗ENA抗体、ANA阳性率及IgA、IgG、IgM水平比较 RA组患者血清RF阳性率明显高于非RA组患者及对照组，而血清ANA、抗ENA抗体阳性率虽高于对照组，但明显低于非RA组患者，差异有统计学意义(P<0.05)；RA组患者血清IgA、IgG、IgM水平明显高于非RA组患者及对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组受检者血清RF、抗ENA抗体、ANA阳性率及IgA、IgG、IgM水平比较

2.2RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体单独及多项联合检测对RA的诊断价值 ROC曲线显示，检测血清RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体对RA具有一定诊断价值，见表2。将RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体进行联合检测，结果显示，联合检测的诊断价值均高于RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体单项检测，见表2。

表2 RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体单独及联合检测对RA的诊断价值

2.3不同预后的RA患者血清RF、ANA、抗ENA抗体阳性率及IgA、IgG、IgM水平比较 缓解组患者血清RF、ANA、抗ENA抗体阳性率及IgA、IgG、IgM水平均明显低于活动组患者，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 不同预后的RA患者血清RF、ANA、抗ENA抗体阳性率及IgA、IgG、IgM水平比较

2.4RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体对RA患者预后的评估价值 ROC曲线显示，血清RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体对RA患者预后具有一定评估价值。将RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体进行联合检测，结果显示，联合检测以上指标评估RA患者预后的价值均高于各指标单独检测，见表4。

表4 RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体单独及联合检测对RA患者预后的评估价值

3 讨 论

早期诊断RA一直以来是医学界研究热点。随着现代医学不断发展，越来越多实验室指标应用于RA早期诊断中，但诊断效能不尽相同[9]。RF是最早用于诊断RA的血清学指标，也是美国风湿病学会(ACR)在RA诊断标准中提出唯一的血清学指标。因其灵敏度高，目前仍为诊断RA的有效指标之一，但由于该指标还可在其他自身免疫性疾病、慢性感染性疾病中表达，因此缺乏特异性，使其在RA早期诊断中使用受限。本研究中RF在RA组患者中阳性率明显高于非RA组患者及对照组，ROC曲线显示，其诊断RA的灵敏度为74.6%，特异度仅为68.8%，与国内相关研究结果一致[10]。龙欣[11]研究表明，RA患者常出现免疫功能紊乱，动态监测血清Ig水平对RA病情进展及预后具有重要评估价值。Ig可分为IgA、IgD、IgE、IgG、IgM，通常检测IgA、IgG、IgM这3类Ig就可以代表血清Ig的水平。Ig是调节体液免疫重要因子，而体液免疫紊乱被认为和RA发生有关[12]。本研究结果显示，RA患者血清IgA、IgG、IgM水平明显高于非RA患者及对照者，ROC曲线显示，IgA、IgG、IgM诊断RA的灵敏度均较低，但特异度均较高，说明检测RA患者血清IgA、IgG、IgM水平可对RA诊断起辅助作用[13]。ANA为近年来诊断RA的常用指标之一，在不同类型疾病中表达存在明显差异。AHRARI等[14]报道，ANA诊断RA的灵敏度为95.0%，特异度仅为30.0%，对RA具有一定辅助诊断价值。本研究中，RA组患者血清ANA阳性率虽明显高于对照组，但亦显著低于非RA组患者，差异有统计学意义(P<0.05)；ROC曲线显示，ANA诊断RA的灵敏度较高，但特异度较低，提示ANA不能作为RA诊断的特异性指标，但可用于RA辅助诊断。抗ENA抗体是细胞中由小分子RNA及多肽构成的核中非组蛋白总称，包括数十种蛋白多肽抗原，其中抗干燥综合征A抗原抗体(抗SS-A抗体)、抗干燥综合征B抗原抗体(抗SS-B抗体)、抗Sm抗体、抗nRNP抗体最为常用。不同类型自身免疫性疾病会产生不同抗ENA抗体，因此检测抗ENA抗体在自身免疫性疾病诊断、鉴别诊断中具有关键作用[15]。本研究结果显示，单独检测抗ENA抗体在RA组患者血清中阳性率虽高于对照组，但明显低于非RA组患者，差异有统计学意义(P<0.05)；ROC曲线显示，抗ENA抗体诊断RA的灵敏度尚可，但特异度较差，表明抗ENA抗体能用作RA筛查指标，但单独检测诊断RA的效果不理想。

以上结果表明，RF、Ig、ANA、抗ENA抗体单独检测诊断RA均存在一定局限性，而当上述指标联合检测时发现，联合检测的灵敏度、特异度均较单独检测显著提高，且检测经济方便，可用于早期诊断RA。此外，本研究还发现，相对于活动组患者，缓解组患者血清RF、ANA、抗ENA抗体阳性率及IgA、IgG、IgM水平均明显降低(P<0.05)，提示可反映RA患者预后情况。进一步ROC曲线分析显示，RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体单独检测评估RA患者预后的灵敏度均较高，但特异度均较低，联合检测评估RA患者预后的特异度较高，说明联合检测RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗体可作为RA患者预后评估的方法。

综上所述，检测RF、Ig、ANA与抗ENA抗体可用于RA的辅助诊断及预后评估，且当上述指标联合检测时诊断及预后评估价值更高。