胃力通胶囊提取及制备工艺优选*

赵 丽 ，陈子龙 ，闵 朕 ，吕 倩 ，胡本祥

（1. 陕西省渭南市食品药品检验所，陕西 渭南 714000； 2. 陕西中医药大学，陕西 西安 712046）

胃力通胶囊是由陕西中医药大学生药教研室胡本祥教授开发研制的治疗胃病的中药制剂，由太白米、朱砂七、黄芪、延胡索制成［1］。方中，君药太白米性温，味辛、微甘苦，具有宽胸理气、健胃、镇痛等功效［2－4］；臣药朱砂七性凉，味苦、微涩，具有清热解毒、凉血、活血等功效［5－6］；佐药黄芪性微温，味甘，补气升阳，生津养血，固表止汗［7－8］，既与太白米共增理气之功效，又能佐助朱砂七清热活血之功效；延胡索性温，味辛、苦，具有活血、行气、止痛功效［9－10］，既助君臣药之功，又可调和诸药。全粉末胶囊用量大，使用不便。本研究中优化了胃力通胶囊的提取及制备工艺，为药学研究和临床开发利用提供数据支持。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters 2596 型高效液相色谱仪（美国沃特世公司），配有2996 型紫外检测器；SL 型科伟水浴锅（余姚长丰仪表厂）；DHG－924A 型电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；GB204 型梅特勒电子天平（梅特勒－托利多公司，精度为万分之一）；赛多利斯MSA125P－CE 型电子天平（北京赛多利斯仪器有限公司，精度为十万分之一）；SX2 型实验电阻炉（常州市昊江电热器材厂）；KQ－200KDE 型高功率数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，功率为200 W，频率为40 kHz）；RE －52cs 型旋转蒸发器、SHZ －D（Ⅲ）型循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司）。

1.2 试药

大黄素对照品（中国食品药品检定研究院，批号为110756－200110，含量以100%计）；甲醇（色谱纯，美国Fishers 公司）；水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯。太白米（购自陕西省太白县）；朱砂七，黄芪（批号为171101），延胡索（批号为 170701），均购自陕西省西安市药材市场。上述药材均经陕西中医药大学生药教研室胡本祥教授鉴定为正品［11］。

2 方法与结果

2.1 太白米出粉率考察

取太白米适量，粉碎，过80 目筛，备用。取粉末3 份，每份 100 g，80 ℃烘2 h，粉碎，过80 目筛，计算出粉率。结果出粉率分别为 97.74% ，97.15% ，97.21% ，平均出粉率为97.37%。

2.2 大黄素含量测定［12］

2.2.1 大黄素提取物制备

按处方量的1／7 称取朱砂七、黄芪和延胡索药材，置烧杯中，加水煎煮1 h，滤过，滤液蒸干，粉碎，过80 目筛，备用。

2.2.2 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：HypersilGoldC18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇 － 水（85 ∶15，V ／ V）；流速：1.0 mL ／min；检测波长：254 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。理论板数以大黄素峰计不低于3 000。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图1.emodinA. Reference solution B.Test solutionFig.1 HPLC chromatograms

2.2.3 溶液制备

取大黄素对照品10.0 mg，精密称定，置100 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，精密量取2 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取样品粉末0.05 g，精密称定，置 25 mL 容量瓶中，加甲醇15 mL，超声使其溶解完全，放冷，加甲醇稀释至刻度，滤过，取续滤液5 mL，加盐酸1 mL，加热水解30 min，将水解液转移至分液漏斗中，加水20 mL，用氯仿萃取3 次（20，10，10 mL），合并氯仿液，挥干，残渣加甲醇溶解，并分次转移至25 mL 容量瓶中，加甲醇定容，作为供试品溶液。

2.2.4 方法学考察

线性关系考察：分别精密吸取2.2.3 项下对照品溶液 1，2，4，6，8，10 μL，按 2.2.2 项下色谱条件进样测定。以峰面积（Y）为纵坐标、进样量（X，μg）为横坐标进行线性回归，得回归方程 Y ＝ 3 865 851.697 4 X －8 962.331 5（ R2＝ 0.999 8，n ＝ 6）。结果表明，大黄素进样量在 0.02 ～ 0.20 μg 范围内与峰面积线性关系良好。

检测限与定量限考察：吸取2.2.3 项下对照品溶液适量，用甲醇逐级稀释，按2.2.2 项下色谱条件进样测定，分别以信噪比（S ／ N）为 3 ∶1 和 10 ∶1 时计算检测限和定量限。结果大黄素的检测限为0.02 μg，定量限为 0.04 μg。

精密度试验：精密吸取2.2.3 项下对照品溶液10μL，按2.2.2 项下色谱条件于1 d 内重复进样测定6 次，连续3 d，记录峰面积。结果大黄素日内精密度的 RSD 为0.31% （n ＝ 6），日间精密度的 RSD 为 1.03% （n ＝ 3），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：精密吸取供试品溶液10 μL，分别于配制后 0，2，4，6，8，12，24 h 时按 2.2.2 项下色谱条件测定，记录峰面积。结果的 RSD 为 0.50% （n ＝ 7），表明供试品溶液在24 h 内稳定。

重复性试验：取样品6 份，精密称定，依法制备供试品溶液，按2.2.2 项下色谱条件进样测定，并计算含量。结果的 RSD 为 0.67%（n ＝6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：取样品粉末6 份，精密称定，每份0.025 g，分别加入大黄素对照品 0.810 0 mg，依法制备供试品溶液，按2.2.2 项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算回收率。详见表1。

表1 加样回收试验结果（n ＝6）Tab.1 Results of the recovery test（n ＝ 6）

2.3 提取工艺优选

2.3.1 工艺优选

取处方量1／7 的朱砂七、黄芪和延胡索药材，精密称定，根据预试验水提单因素结果及文献［12］以加水量（因素 A）、煎煮次数（因素 B）、煎煮时间（因素 C）为水提取工艺的考察因素进行 L9（34）正交试验。设计因素水平见表2。

表2 提取工艺 L9（34）正交试验因素水平表Tab.2 Factors and levels of the L9（34）orthogonal test for the extraction process

表3 和表 4 中均以出膏率（a）和大黄素含量（b）为评价指标。由表3可知，以出膏率为评价指标3 个因素的极差值大小排列顺序为B ＞A ＞C，以大黄素含量为评价指标3 个因素的极差值大小排列顺序为A ＞B ＞C。根据出膏率和大黄素含量各因素对应的 K1，K2，K3综合分析得理论最佳提取工艺为A3B3C1。由表4 方差分析结果可知，以出膏率为评价指标，加水量、煎煮次数有显著差异，煎煮时间无显著差异；以大黄素含量为评价指标，加水量、煎煮次数和煎煮时间均有显著差异。综合考虑，确定理论最佳工艺为A3B3C1，即加15 倍量水，煎煮3 次，每次1 h。

表3 提取工艺 L9（34）正交试验结果Tab.3 Results of the L9（34）orthogonal test for the extraction process

表4 提取工艺 L9（34）正交试验方差分析结果Tab.4 Results of ANOVA of the L9（34）orthogonal test for the extraction process

2.3.2 验证试验

按处方量的1／7 称取药材，按优化工艺制备3 批样品，滤过，滤液蒸干，粉碎，过80 目筛，依法制备供试品溶液测定大黄素的含量；将试验滤液浓缩，置恒重蒸发皿中水浴蒸干，残渣105 ℃干燥3 h，转移至干燥器中冷却30 min，迅速称定质量，测定出膏率。结果大黄素含量分别为 11.193 7，11.390 0，11.678 4 mg ／g，平均含量为 11.420 7 mg ／g，RSD 为 2.13% （n ＝3）；出膏率分别为 40.10% ，41.07% ，41.03% ，平均出膏率为40.73% ，RSD 为 1.35% （n ＝3），表明优选的提取工艺稳定、可靠。

2.4 制备工艺优选

2.4.1 辅料选择

辅料种类：考察不同辅料（乳糖、淀粉、糊精）对浸膏粉吸湿性和休止角的影响，结果糊精对粉末流动性和吸湿性改善程度最优，为最佳辅料。详见表5。

表5 不同辅料对休止角和吸湿性的影响Tab.5 Effects of different excipients on the angle of repose and hygroscopicity

糊精用量：取浸膏粉与糊精，分别按不加糊精，以及4 ∶1，3 ∶1，2 ∶1（m ／ m）的比例混匀，制成颗粒，依据《表面活性剂粉体和颗粒休止角的测定》GB11986－89 固定漏斗法测定休止角，考察不同辅料比例处方粉末的流动性，休止角分别为 45.25°，34.52°，31.16°，29.21°。最终选择浸膏粉与糊精比例为 2 ∶1（ m ／ m）。

2.4.2 润湿剂

取浸膏粉适量，共4 份，分别加入糊精混匀，并喷入水和不同体积分数乙醇，混匀，用40 目筛网制成湿颗粒，考察软材过筛情况和颗粒合格率，最终选择90%乙醇为最佳润湿剂。详见表6。

表6 不同润湿剂对软材过筛情况和颗粒合格率的影响Tab.6 Effects of different wetting agents on the screening of soft material and the qualification rate of granules

2.4.3 成型颗粒物休止角和吸湿性考察

颗粒休止角测定：按2.3.1 项下优选工艺制备5 批试验品，依据《表面活性剂 粉体和颗粒休止角的测量》GB11986 － 89 固定漏斗法测定其休止角，结果5 批试验品的休止角分别为 28.32°，27.26°，27.53°，26.69°，28.16°，休止角平均值为 27.59°。填充物粉末的休止角均小于40°，流动性较好，适合直接填充胶囊。

颗粒吸湿率测定：将制备好的颗粒干燥至恒重，采用过饱和溶液法测定颗粒吸湿率，结果6，12，24，48，60 h 时 的 颗 粒 吸 湿 率 分 别 为 2.36% ，3.15% ，4.78% ，6.74% ，9.26% 。吸湿性较好，适合直接填充胶囊。

2.4.4 堆密度测定及空胶囊壳选择

采用量筒法测定3 批试验品的堆密度，结果平均堆密度为 0.566 1 g ／ mL。结合实际日服用剂量及次数，每粒装 0.35 g 内容物，得药粉体积为 0.62 mL，而0 号胶囊容积为 0.67 mL，满足装量要求，故选择0 号胶囊。

3 讨论

胃力通胶囊是由太白米、朱砂七、黄芪、延胡索制成的复方制剂。君药太白米选择打粉入药，臣药朱砂七活性成分主要为二苯乙烯类和蒽醌类［5］，故选择蒽醌类成分大黄素作为指标性成分进行含量测定。采用HPLC 法测定大黄素含量时，曾考察柱温、流速、流动相的种类及配比。最终确定2.2.2 项下色谱条件，各目标峰峰形和分离度均好。

由正交试验的直观分析和方差分析结果初步确定了工艺条件，并兼顾生产成本、实际生产操作、能源节约等综合因素，最终确定最佳提取工艺。并参考文献［13 －14］进行验证试验，以确保工艺稳定、合理、可行。制备工艺优选中，曾考察休止角和吸湿性，不断优化辅料种类及配比，最终确定制备工艺为辅料与糊精按 2 ∶1 （ m ／ m ）比例混合，加 90% 乙醇润湿。

不同提取方法可能造成提取物成分差异，最终影响药物疗效。为保证药效，并全面反映提取工艺优劣，下一步将对其药效学进行综合评价及研究。