血清HMGB1及PCT水平检测对新生儿坏死性小肠结肠炎诊断和病情评估的价值

付彬彬，王文芳，叶婷婷，韩燕媚，邱小翠（海口市妇幼保健院检验科，海口 570100）

坏死性小肠结肠炎（necrotizing enterocolitis, NEC）是常见的新生儿严重疾病，其病情进展迅速、预后较差、病死率较高[1-2]。寻找一种早期诊断、准确评估新生儿NEC 预后的生物学指标对患儿的救治具有重大帮助。高迁移率族蛋白B1（high mobility protein B1, HMGB1）是一种重要的炎症递质和致炎细胞因子，在炎症性肠病患儿中明显升高，能够反映肠道黏膜上皮损伤情况[3]。降钙素原（procalcitonin，PCT）是降钙素的前体蛋白，对消化道穿孔及感染性疾病具有较好的诊断价值和预警作用，在NEC 的变化有重要临床意义[4]。本研究检测血清HMGB1 及PCT 水平在NEC 患儿中的情况，分析HMGB1，PCT 对新生儿NEC 诊断及预后的价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取海口市妇幼保健院在2017～2020年收治的新生儿NEC 75 例，其中男性47 例，女性28 例，胎龄33～40（36.30±1.40）周。

纳入标准：新生儿NEC 的诊断符合《实用新生儿学》（4 版）标准[5]；排除标准：并发其他消化系统疾病。另选取60 例健康足月新生儿作为对照组，其中男性36 例，女性24 例，胎龄37～41（38.20±1.70）周。各组性别、胎龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究与患儿家属签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂 Getein1100 免疫荧光定量分析仪，PCT 试剂为基蛋生物科技股份有限公司，HMGB-1 水平试剂为美国R&D 公司。

1.3 方法 根据修正Bell 分期[5]，将75 例NEC患儿分为Ⅰ期28 例，Ⅱ期37 例，Ⅲ期10 例。根据75 例患儿30 天的预后情况，分为存活组58 例和死亡组17 例。采用酶联免疫吸附法检测血清HMGB-1 水平，干式免疫荧光法检测血清PCT 水平。

1.4 统计学分析 采用SPSS 20.0 统计，计量资料以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用方差分析，组间比较采用t检验。计数资料采用χ2检验。HMGB1 及PCT 对新生儿NEC 诊断及预后的价值应用受试者工作特征（ROC）曲线分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组血清HMGB1 及PCT 水平与对照组比较 见表1。与对照组比较，病例组血清HMGB1 及PCT水 平明显升 高（t=13.628，10.427，P<0.05）。死亡组血清HMGB1 及PCT 水平明显高于存活组（t=16.217，12.308，P＜0.05），差异均有统计学意义。

表1 三组血清HMGB1 及PCT 水平比较（±s）

表1 三组血清HMGB1 及PCT 水平比较（±s）

项目 对照组（n=60） 病例组（n=75） 存活组（n=58） 死亡组（n=17） F P HMGB1（μg/L） 3.18±1.14 15.60±4.85 9.24±3.18 24.50±7.13 11.720 <0.001 PCT（ng/ml） 0.03±0.01 1.74±0.92 0.85±0.38 3.02±1.35 9.852 <0.001

2.2 各期NEC 患儿血清HMGB1 及PCT 水平比较 与Ⅰ期比较，Ⅱ～Ⅲ期血清HMGB1（10.54±3.20μg/L vs 20.16±6.37μg/L） 及PCT（0.94±0.42ng/ml vs 2.85±1.30ng/ml）水平明显升高，差异有统计学意义（t=8.263，7.624，均P＜0.05）。

2.3 HMGB1 及PCT 对新生儿NEC 的诊断价值 见表2 和图1。HMGB1 及PCT 两项联合诊断新生儿NEC 的曲线下面积（0.872，95%CI：0.814～0.930）明显高于单项HMGB1（0.808，95%CI：0.751～0.870）及PCT（0.717，95%CI：0.655～0.774），其敏感度和特异度分别为87.4%和83.5%。

图1 HMGB1 及PCT 诊断新生儿NEC 的ROC 曲线

表2 HMGB1 及PCT 对新生儿NEC 的诊断价值（%）

2.4 HMGB1 及PCT 预测新生儿NEC 死亡的价值 见表3 和图2。HMGB1 及PCT 两项联合预测新生儿NEC 死亡的曲线下面积（0.893，95%CI：0.836～0.952）明显高于单项HMGB1（0.816，95%CI：0.755～0.874）及PCT（0.735，95%CI：0.673～ 0.793），其敏感度和特异度分别为89.0%和86.4%。

图2 HMGB1 及PCT 预测新生儿NEC 死亡的ROC 曲线

表4 HMGB1 及PCT 预测新生儿NEC 死亡的价值（%）

3 讨论

新生儿NEC 是新生儿期常见的严重消化系统疾病，其发生与肠道菌群失调、免疫应答异常、缺血缺氧等多种因素的综合作用相关，是导致新生儿死亡的重要病因之一[6-7]。当前，如何早期准确的诊断及评估新生儿NEC的预后是研究的重点问题。HMGB1 作为一种促炎性细胞因子新型指标，与肠道受损的发生有关[8]。PCT 是降钙素的前肽物质，在机体受到细菌感染后显著升高，其升高程度与感染的严重程度密切相关，是临床上诊断炎症感染性疾病的常用指标[9]。有研究指出，血清PCT 水平可在新生儿出生后出现生理性升高，其升高持续时间较短，很快降低到正常水平，而NEC 患儿血清PCT 水平表现出长时间的升高，因此血清PCT 水平检测对鉴别诊断NEC 具有较好的帮助[10]。

本研究中血清HMGB1 及PCT 水平病例组明显高于对照组，提示NEC 患儿血清HMGB1 及PCT水平较高，在NEC的发生发展中具有重要作用。本研究显示，血清HMGB1 及PCT 水平Ⅱ～Ⅲ期明显高于Ⅰ期，HMGB1 及PCT 水平死亡组较存活组明显升高，提示HMGB1 及PCT 水平高的NEC患儿，病情较重，死亡发生的可能性越大。黄玲等[11]研究显示，NEC 患儿血清PCT 水平明显高于对照组，且随着病情进展，血清PCT 水平上升越明显，PCT 对NEC 的早期诊断、病情演变、随访治疗效果有一定的价值。郑泽兵等[12]研究发现，新生儿NEC 发病后1，6 和12 h 血清PCT 水平呈现出逐渐升高的趋势，血清PCT 水平对新生儿NEC 手术时机的判断具有一定意义，但应结合临床表现和其他辅助检查结果综合考虑。本研究ROC 曲线显示，HMGB1 及PCT 联合诊断和预测NEC 患儿死亡的效能最大，说明HMGB1 及PCT 是新生儿NEC 诊断及病情评估的良好指标，两项联合检测对新生儿NEC 诊断及病情评估具有较大的帮助。罗若谷等[13]研究发现，HMGB1 作为一种晚期重要炎症因子，随着NEC 患儿病情恶化，HMGB1 含量逐渐增高，HMGB1 在NEC 早期诊断及评估病情严重程度方面具有一定的临床价值。汪莉等[14]研究显示，Ⅱ～Ⅲ期NEC 患儿血清PCT 水平高于对照组，血清PCT水平变化监测有助于Ⅱ～Ⅲ期NEC 的早期诊断，可作为预测NEC 病情严重程度的辅助指标。另有研究表明，血清PCT 水平在NEC 早期即升高，且与NEC 患儿严重程度有关，PCT 对NEC 诊断及病情判断具有较好的指导价值[15]。但本研究也存在不足，单中心研究且样本量较少，将在今后的研究中进行探讨。

总之，NEC 患儿血清HMGB1 及PCT 水平明显升高，其高水平与患儿病情严重程度相关，两项联合诊断及预测对新生儿NEC 病情具有很好的帮助，可能是新生儿NEC 诊断及病情评估的生物学指标。