孕妇血清亲环素A和组织型转谷氨酰胺酶水平检测与子痫前期发生不良妊娠的相关性研究

薛 伟，易福凌，王 苗，王辽菊

（1.咸阳市第一人民医院a.输血科;b 检验科;c.妇产科,陕西咸阳712000； 2.西安市第一医院检验科，西安710002）

子痫前期(preeclampsia,PE)是一种妊娠期高血压疾病。PE 孕妇在妊娠20 周以后出现高血压和蛋白尿等疾病。研究发现PE 可以引起多种母儿并发症,是导致孕妇发生不良妊娠的主要原因[1-2]。目前的研究表明,亲环素A(cyclophilin A,CYPA)可能参与PE 孕妇妊娠期高血压的病理过程,高水平的CYPA 可能导致妊娠并发症的发生[3]。目前认为组织型转谷氨酰胺酶(tissue transglutaminase,tTG)能够促进细胞凋亡,加重血管内皮损伤,tTG 水平的变化与PE 的病变进展有关[4]。本研究通过分析PE 孕妇血清CYPA 和tTG 水平的变化,旨在探讨两指标与PE 发病机制的相关性,并为PE 孕妇不良妊娠的风险评估提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象 随机选择 2018年1月～ 2020年1月在咸阳市第一人民医院和西安市第一医院就诊的112 例PE 孕妇作为研究对象。纳入标准：①单胎妊娠孕妇；②孕妇年龄20 ～40 岁；③孕前无糖尿病、血管性疾病、自身免疫性疾病、肝炎、肿瘤和炎症,无吸烟和酗酒等不良嗜好。排除标准：①伴原发性高血压者；②有心、肝、肾及内分泌病史者；③胎膜早破者。依据妊娠结局将PE 孕妇分为正常妊娠组和不良妊娠组。正常妊娠组纳入85 例患者,平均年龄29.38±2.97 岁,平均孕龄35.27±3.83 周；不良妊娠组纳入27 例患者,平均年龄30.67±3.07岁,平均孕龄35.93±3.52 周。PE诊断标 准[5]：孕 20 周后出现舒张压≥90 mmHg 和(或)收缩压≥140 mmHg,尿蛋白≥0.3 g/24 h 或随机尿蛋白阳性。选取51 例同期体检健康孕妇作为对照组，平均年龄30.93±3.37 岁,平均孕龄35.71±3.63 周。三组研究对象的年龄及孕龄比较差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究通过咸阳市第一人民医院和西安市第一医院医学伦理委员会审核批准,并得到所有研究对象的知情同意。

1.2 仪器与试剂 血清tTG 和CYPA 水平检测试剂盒分别购于上海晶抗生物工程有限公司和上海江莱生物科技有限公司,实验过程严格按照试剂盒说明进行操作。采用飞利浦 IU22 型超声诊断仪分析子宫动脉血流阻力状况,设置探头频率为3.5MHz。

1.3 方法 收集所有研究对象的年龄、孕龄和血压等资料，分析子宫动脉血流阻力状况，采用免疫比浊法检测24h 尿蛋白水平，采用酶联免疫吸附试验检测血清tTG 和CYPA 水平。对所有研究对象进行随访,记录母亲及新生儿健康情况,若出现胎儿死亡、羊水污染≥III 度、胎儿宫内窘迫、HELLP 综合征、胎盘早剥、子痫、心衰及肺水肿,则认为存在不良妊娠。

1.3.1 标本采集: 所有研究对象于空腹状态被采集静脉血3ml,以3 000r/min 离心10min,提取上层血清用于tTG 和CYPA 水平分析。收集所有研究对象的24h 尿液用于检测24h 尿蛋白水平。

1.3.2 子宫动脉血流阻力检测: 患者取仰卧位,膀胱轻度充盈,在髂内动脉1cm 处检测双侧子宫动脉血流状况。先自子宫下段两侧肌层与盆壁间找到两侧髂内动脉,寻出左右两侧子宫动脉主干,获取连续3 个形态一致且稳定的血流频谱,计算出左右两侧子宫动脉的血流阻力检测参数,包括搏动指数(pulsatility index,PI)和阻力指数(resistance index,RI),取平均值。

1.4 统计学分析 研究数据采用SPSS21.0 进行统计学分析,符合正态分布的计量资料用均数±标准差(±s)表示。年龄、孕龄、收缩压、24h尿蛋白水平、RI，PI，tTG 及CYPA 水平的组间比较采用单因素方差分析及q检验。不良妊娠发生率的组间比较采用卡方检验。PE 孕妇发生不良妊娠的危险因素采用Logistic 回归分析。相关性分析采用Pearson 法。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PE 孕妇不良妊娠分析 112 例PE 孕妇中27例发生不良妊娠,发生率为24.10%. 51 健康孕妇中没有不良妊娠发生。PE 孕妇不良妊娠发生率明显高于对照组(χ2=14.735，P=0.000)。

2.2 三组孕妇血清tTG 和CYPA 水平分析 见表1。与对照组比较,正常妊娠组和不良妊娠组的tTG(q=5.63，7.83) 和CYPA(q=5.12，6.77) 水 平明显增高,不良妊娠组与正常妊娠组比较tTG 和CYPA 水平增高更显著(q=6.29，5.43)，差异均有统计学意义(均P<0. 05)。

表1 三组孕妇血清tTG 和CYPA 水平分析(±s)

表1 三组孕妇血清tTG 和CYPA 水平分析(±s)

项目 对照组(n=51) 正常妊娠组(n=85) 不良妊娠组(n=27) F 值 P 值tTG(ng/ml) 7.21±1.13 10.68±1.67 13.35±2.35 100.061 0.000 CYPA(ng/L) 59.16±9.71 79.50±13.91 96.18±17.25 59.286 0.000

2.3 三组孕妇收缩压、24h 尿蛋白水平及子宫动脉血流阻力分析 见表2。与对照组比较,正常妊娠组和不良妊娠组的收缩压(q=4.35，6.27)及24h 尿蛋白水平(q=13.20，19.73)明显增高,RI(q=4.57，6.49)及PI(q=9.41，13.74)明显增大,不良妊娠组与正常妊娠组比较收缩压、24h 尿蛋白、RI 和PI 水平增高或增大更显著(q=5.64，14.52，4.28，4.59)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。

表2 三组孕妇收缩压，24h 尿蛋白水平及子宫动脉血流阻力分析(±s)

表2 三组孕妇收缩压，24h 尿蛋白水平及子宫动脉血流阻力分析(±s)

项目 对照组(n=51) 正常妊娠组(n=85) 不良妊娠组(n=27) F 值 P 值收缩压(mmHg) 113.96±7.51 149.16±8.83 170.29±9.27 589.380 0.000 24h 尿蛋白(g/L) 0.05±0.02 1.13±0.75 2.43±1.03 95.794 0.000 RI 0.52±0.07 0.63±0.12 0.70±0.13 30.094 0.000 PI 0.61±0.09 1.20±0.21 1.52±0.29 241.862 0.000

2.4 Logistic 回归分析 见表3。Logistic 回归分析显示,收缩压、24h 尿蛋白水平、RI, PI, tTG 和CYPA 均为 PE 孕妇发生不良妊娠的独立危险因素(均P＜0.01)。

表3 多因素Logistic 回归分析

2.5 相关性分析 正常妊娠组和不良妊娠组的tTG和CYPA 水平分别呈正相关性(r=0.793，0.812, 均P<0.01)。正常妊娠组的tTG，CYPA 水平分别与收缩压、24h 尿蛋白水平、RI 及PI 有正相关性（rtTG=0.802，0.816，0.823，0.799， 均P<0.01；rCYPA=0.823，0.806，0.813 和0.805，均P<0.01）。不良妊娠组的tTG，CYPA 水平分别与收缩压、24h尿蛋白水平、RI 及PI 有正相关性（rtTG=0.815，0.827，0.833，0.807，均P<0.01；rCYPA=0.831，0.812，0.824，0.817，均P<0.01）。

3 讨论

子痫前期(PE)的发病机制目前尚未完全被阐述，但有学者认为,炎症、内皮功能损伤和氧化应激等因素是导致PE 的主要原因。研究认为氧化应激反应可诱导血管内皮细胞损伤及胎盘灌注不足。这些过程可导致血管收缩功能增强及通透性增加,进而引起孕妇血压升高和尿蛋白水平增加[6-7]。本研究Logistic 回归分析结果显示,收缩压和24h 尿蛋白水平为 PE孕妇发生不良妊娠的独立危险因素。目前PE 已被证实与孕妇死亡、早产、死胎和其他不良妊娠有关[8]。本研究的分析显示PE 孕妇不良妊娠发生率明显增高。研究表明,子宫动脉血流阻力状况的变化与PE 孕妇不良妊娠相关[9-10]。本研究Logistic 回归分析结果显示子宫动脉的RI 和PI均为 PE 孕妇发生不良妊娠的独立危险因素。进一步地分析发现PE 孕妇的PI 和RI 随着病情加重明显增大，这与相关文献[10]的报道相符。提示通过分析孕妇子宫动脉血流阻力状况可以预测PE 的发生，进而评估PE 孕妇发生不良妊娠的风险。

CYPA 是近年来发现的新型炎症标志物。研究认为机体过度的氧化应激反应可诱导血管平滑肌细胞、内皮细胞及单核细胞等分泌过量的CYPA。CYPA 可进一步促进炎症细胞聚集并导致血管内皮细胞损伤。同时CYPA 还可抑制细胞内胆固醇外流,增加泡沫细胞内的胆固醇浓度,促进动脉粥样硬化的形成,进而增加高血压的发生风险[11]。目前CYPA 在PE 中的应用价值已被证实。研究发现PE孕妇孕早期CYPA 水平与正常孕妇相比明显升高。CYPA 水平与收缩压和24h 尿蛋白水平均呈正相关性[12]。本研究结果也印证了上述文献的观点。本研究进一步地分析显示CYPA 水平与PE 孕妇子宫动脉的PI 和RI 有相关性。推测CypA 可能参与PE的发病机制。提示血清CYPA 水平的变化可能与PE 孕妇不良妊娠的发生相关。

tTG在人体内的作用相当广泛,其与恶性肿瘤、糖尿病和肝纤维化等疾病的发生有关[13]。相关研究认为肿瘤坏死因子及白细胞介素-6 等炎症因子可能诱导tTG 的表达。PE 孕妇子宫的低氧暴露和炎症状态诱导胎盘合胞体滋养层分泌大量tTG[14]。提示tTG 可能与PE 的发生及病变进展有关。近年来的研究发现PE 孕妇血清tTG 水平、收缩压及24h尿蛋白含量均明显高于对照组,且重度PE 孕妇明显高于轻度患者。进一步的报道认为PE 孕妇血清tTG 水平与收缩压及24 h 尿蛋白水平呈正相关性[15]。本研究对PE 孕妇的分析与上述文献的结论相符。此外,本研究超声分析的结果显示PE 孕妇血清tTG 水平与子宫动脉的PI 和RI 有相关性。提示血清tTG 水平的差异性变化能反映PE 孕妇的血管内皮损伤及PE 病情进展的程度。因此通过检测血清tTG 水平可以为PE 孕妇不良妊娠的风险评估提供依据。

综上所述,tTG 和CYPA 可能参与PE 的发病机制,且两指标过量表达可能诱导妊娠高血压和蛋白尿的发生,进而增加PE 孕妇不良妊娠的发生率。然而本研究仅分析了一个时间点的子宫动脉血流参数及血清tTG 和CypA 水平,并未分析其在不同孕周的动态变化情况。在后续的研究中将整理更多的数据,以得到更有临床价值的结论。