脓毒症患者血清γ-干扰素、白细胞介素4表达水平及γ-干扰素/白细胞介素4对预后影响

汪 俊， 张德龙， 张 盛， 鲁厚清

铜陵市人民医院1.重症医学科；2.检验科，安徽 铜陵 244000

脓毒症是因机体对感染的反应失调而导致危及生命的器官功能障碍[1]。机体的促炎/抑炎反应失衡在脓毒症发生、发展中起重要作用，也是导致患者病情加重的重要原因[2]。因此，早期、准确、快速识别患者免疫状态对改善脓毒症患者预后有重要意义。目前，淋巴细胞计数是获得性免疫功能障碍的主要监测指标，其中，T淋巴细胞亚群在评估免疫状态中有着极为重要的作用，并可在一定程度上预测患者结局[3-4]。CD4+辅助性T淋巴细胞根据分泌细胞因子的不同分为Th1和Th2亚群。Th1细胞特异性产生肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)、γ-干扰素(interferon γ，IFN-γ)，主要介导细胞免疫应答；Th2细胞特异性产生白细胞介素4(interleukin 4，IL-4)、白细胞介素10(interleukin 10，IL-10)，主要介导体液免疫应答。当发生脓毒症时，Th亚群中Th1与 Th2处于失衡状态[5]。目前，临床多通过IFN-γ/IL-4评估Th1/Th2的水平[6]。本研究通过检测脓毒症患者入院第1、3、5天的IFN-γ、IL-4水平，计算IFN-γ/IL-4，观察脓毒症患者血清IFN-γ、IL-4及IFN-γ/IL-4的变化趋势，分析IFN-γ/IL-4对患者预后影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取自2020年5月至2021年1月铜陵市人民医院重症监护室(intensive care unit，ICU)收治的75例脓毒症患者为研究对象，根据患者ICU治疗的预后分为存活组(成功治疗并转出ICU，n=52)与病死组(ICU住院期间死亡，n=23)。纳入标准：(1)年龄≥18岁；(2)符合中国脓毒症/脓毒性休克急诊治疗指南(2018)[7]；(3)序贯器官衰竭评分较基线上升≥2分；(4)ICU治疗时间≥3 d，且不是因放弃治疗而转出ICU。排除标准：(1)长期服用激素、免疫抑制剂等严重影响免疫功能药物者；(2)既往有免疫缺陷病史；(3)既往患有严重慢性疾病、严重器质性病变(心肌梗死、脑梗死、心力衰竭)、器官功能衰竭者；(4)患有血液系统疾病、肿瘤等。存活组患者男性30例，女性22例；年龄(65.90±16.75)岁；ICU住院时间(9.80±8.83)d。病死组患者男性18例，女性5例；年龄(71.35±15.74)岁；ICU住院时间(10.26±6.15)d。两组患者性别比例、年龄、ICU住院时间比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准，患者或家属均签署知情同意书。

1.2 研究方法 两组患者均在入院第1、3、5天上午8∶00采血。采集后立刻离心，取血清样本存于-80℃冰箱备用。采用酶联免疫吸附法测定IFN-γ、IL-4水平，试剂盒购自苏州市康达医疗用品贸易有限公司，操作步骤遵循试剂盒技术手册，并计算IFN-γ/IL-4。

2 结果

2.1 存活组与病死组IFN-γ水平比较 两组患者第1天IFN-γ水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者第3、5天IFN-γ水平均低于第1天，且第5天IFN-γ水平低于第3天，差异有统计学意义(P<0.05)。病死组第3、5天IFN-γ水平均低于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 存活组与病死组IFN-γ水平浓度/pg·ml-1)

2.2 存活组与病死组IL-4水平比较 存活组患者第5天IL-4水平高于第1、3天；病死组患者第3、5天IL-4水平高于第1天，且第5天IFN-γ水平高于第3天，差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者第1天IL-4水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。病死组第3、5天IL-4水平均高于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 存活组与病死组IL-4水平浓度/pg·ml-1)

2.3 存活组与病死组IFN-γ/IL-4水平比较 存活组患者第3、5天IFN-γ/IL-4水平低于第1天，且第5天IFN-γ/IL-4水平低于第3天；病死组患者第3、5天IL-4水平低于第1天，差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者第1、5天IFN-γ/IL-4水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。病死组第3天IFN-γ/IL-4水平低于存活组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 存活组与病死组IFN-γ/IL-4水平

2.4 生存分析 生存分析结果显示，低IFN-γ/IL-4组存活率明显低于高IFN-γ/IL-4组，差异有统计学意义(P<0.05)。见图1。

图1 生存分析曲线

3 讨论

机体对感染的反应失调导致免疫功能紊乱是脓毒症主要发生机制之一[1，8]。CD4+T淋巴细胞在脓毒症的发生和发展中起重要作用，其根据功能不同分为辅助性T淋巴细胞、调节性T淋巴细胞、滤泡辅助性T淋巴细胞[9]。IFN-γ是驱动细胞免疫的重要炎症因子，在免疫调节中有促进促炎因子释放、增强单核细胞人类白细胞抗原-DR表达和细胞吞噬功能以及抑制抑炎因子生成、T淋巴细胞凋亡等，其表达水平越低，机体免疫功能越差[10]。有研究报道，抑炎因子IL-4可降低IFN-γ、IL-6、TNF-α等促炎因子表达水平[11]。在脓毒症患者中，Th1细胞来源的IFN-γ随着病程逐渐延长，其表达水平逐渐降低[12]。IL-4作为介导体液免疫的重要抗炎因子，可提高巨噬细胞吞噬功能和T淋巴细胞活性，其抗炎作用可能与抑制骨髓分化初反应蛋白88(myeloid differentiation primary response 88，MyD88)/核转录因子κB(nuclear transcription factor-κB，NF-κB)信号通路活化有关[10]。有研究报道，脓毒症合并多脏器功能不全患者血清IL-4表达水平较健康者明显升高，并在第1、4、7天呈升高趋势[13]。本研究结果显示，脓毒症患者的IFN-γ表达水平总体呈下降趋势，IL-4与之相反，病死组与存活组患者第3、5天IFN-γ、IL-4表达水平差异显著，说明通过检测IFN-γ和IL-4表达水平在一定程度可反应脓毒症患者免疫状态，并评估患者预后。

正常状态下机体内Th0向Th1、Th2转化或Th1、Th2相互转化，以维持Th1/Th2的功能平衡，当发生脓毒症时，Th细胞分化会向Th2型明显极化，导致Th1/Th2比例失调，称为Th1/Th2漂移[14]。本研究发现，脓毒症患者早期IFN-γ呈下降趋势，而IL-4呈上升趋势，这与Th1/Th2失调的变化趋势一致。本研究中，IFN-γ/IL-4在脓毒症患者中有下降趋势，且第3天病死组患者IFN-γ/IL-4显著低于存活组，但两组患者第5天的IFN-γ/IL-4无显著异，这可能是由于部分患者5 d内死亡，样本量较少所致。此外，本研究进一步行生存分析发现，低IFN-γ/IL-4组存活率明显低于高IFN-γ/IL-4组，说明IFN-γ/IL-4变化水平对评估预后存在一定价值。但由于本研究样本量较小，且存在一定局限性，该结论能否普遍适用还需进一步行更大规模的研究验证。

综上所述，炎症因子IFN-γ和IL-4参与脓毒症的发生及发展，检测IFN-γ/IL-4水平的变化对评估预后有一定价值。但单一指标评估价值有限，未来可通过联合多种炎症因子，更及时、准确地评估患者病情，并采取精准治疗，以期为脓毒症治疗提供新策略。