高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留的方法与应用

张亚萍

（玉溪市江川区农产品质量安全检测站，云南玉溪 652600）

氨基甲酸酯类农药是一种良好的杀虫农药，这种农药在使用过程中，有高效、低毒、低残留的效果，经常被用在果蔬杀虫上，现已成为果蔬及粮食主要的杀虫剂。但由于农户环保意识以及相关部门的管理意识不够，这类农药仍存在一些不合理使用情况，且这些不合理的使用也给当地的生态跟食品安全造成了一定影响，因此对蔬菜中的氨基甲酸酯类农药进行检测十分必要。现如今可以完成氨基甲酸酯类农药残留检测的方法主要包括高效液相色谱法、质谱法以及液相柱后衍生法等，其中酶抑制法存在着局限性，但可以将其作为仪器分析法进行补充[1]。高效液相色谱法在检测过程中，比较常用的检测器是紫外检测器，该检测器的灵敏度不够高，而荧光检测器的灵敏度较高，操作起来也较为简便，在众多分析方法中比较突出。基于此，主要以我国农业行业标准——蔬菜和水果中有机磷、有机氮、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定作为参考，使用配荧光检测器以及柱后衍生系统的高效液相色谱仪测定随机抽取的蔬菜中的7 种氨基甲酸酯类农药残留量，对蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留测定技术进行探讨。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 主要的材料为市面上销售的白菜、黄瓜以及芹菜；主要的试剂包括甲酯、色谱纯、二氯甲烷、醋酸氨、氨基甲酸酯类标准储备液。

1.2 主要的仪器与设备 仪器设备包括超高效液相色谱系统、质谱仪、高速分散匀浆机、旋转蒸发仪、氮吹仪及固相萃取小柱。

1.3 样品的前处理 首先称取25 g 样品放入广口瓶中，准确加入100 mL 的色谱纯匀速摇1 min 左右过滤后放入5 g 氯化钠，进行剧烈地摇动，然后将其静置20 min 左右，待其分层，准确地吸取色谱纯20 mL，放入圆底烧瓶中，用50℃的水浴旋转蒸发，将其蒸发至干，再加入2 mL 的二氯甲烷甲酯溶液，然后对其进行溶解，等待净化。

1.4 样品净化 将10 mL 的二氯甲烷甲酯溶液进行萃取，待溶液流至吸附填料时，立刻加入样品浓缩液20 mL 的离心管收集液，使用2 mL 的二氯甲烷甲酯溶液对圆底烧瓶进行洗涤，将其转移至固相萃取柱，然后重复上述操作2 次，把收集到的洗脱液放置于氮吹仪上，吹至蒸发近干，然后使用甲酯醋酸氨溶液将其定容至2 mL，用滤膜进行过滤，等待测量[2]。

1.5 仪器条件 ①色谱条件。色谱柱的柱温控制在40℃，样品室的温度控制在10℃，流速控制在0.25 mL/min，整个流程的分析过程大约9 min。②质谱条件。毛细管电压为3.2kV，离子源的温度控制在110℃，脱溶剂气的温度为400℃，光电倍增器的电压为650 V。

2 结果与分析

2.1 分离条件的选择 为了能获得更好地分离效果，需要对甲醇与水的体积比进行多次配比试验，这样才能考察甲醇跟水作为流动相的分离效果。通过研究发现，甲醇的配比越大，其出峰越快，且峰型越好，但分离效果较差；水的配比较大，分离效果会较好，但峰型较宽，且分析时间较长，出峰也较慢。综合来讲，甲醇与水配比下基线基本上呈现峰形对称的情况，和其他杂质峰并未出现重叠，且能够做到完全分离，因此可以选择甲醇和水配比作为流动相进行研究。

2.2 组分分离情况 在已经设定的试验条件下，7 种氨基甲酸酯类农药得到了非常好的分离，经过跟单标的比较定性，这7 种农药的出峰顺序依次为涕灭威砜、涕灭威亚砜、灭多威、3－羟基克百威、涕灭威、克百威和甲萘威。

2.3 方法的添加回收率以及精密度 在各种蔬菜样品中添加了3 种浓度的7 种氨基甲酸酯类农药的标样，分别为0.05 mg/kg，0.10 mg/kg，0.50 mg/kg，在添加完3 种浓度后，考察添加的回收率。从研究可以发现，7 种浓度的回收率均固定在74.6%～107.6%，其精密度在10%以内，由此说明其精密度处理较好，且在前期处理跟仪器方面都比较稳定，能够有效地满足农药多残留分析的需求[3]。

2.4 样品定溶液的确定 样品定溶液会影响到药物在色谱柱中的分离行为以及离子效率，因此可以选用不同比例的甲醇+水溶液来进行样品的定溶液。试验发现，使用甲醇—醋酸氨溶液作为样品的定溶液，各种农药的丰度较其他的定溶液来说有着不同程度的提高，且峰型较好，因此可以选择甲醇—醋酸氨溶液作为最佳的样品定溶液。

3 结论与讨论

氨基甲酸酯类农药本身具有一定的热不稳定性，使用气相色谱法来测定时，实际上测定的是该类药物高温降解的产物，且响应值较低。蔬菜生长期较短，但流通速度非常快，用更加灵敏准确的方法，才能真正地检测出氨基甲酸酯类农药的残留，因此这对检测技术提出了更新的要求。自2006 年日本推出了相关的农产品制度及欧美各国修改了食品安全法规后，新一轮的贸易壁垒对这类农药检测提出了更高的要求[4-5]。试验主要基于现有的标准与文献基础对样品前处理的条件进行了相关对比及优化，使用荧光检测器以及柱后衍生系统对蔬菜中的多种氨基甲酸酯类农药的残留进行了相关检测。试验过程中，以乙腈作为提取溶液并高速匀浆提取出样品，利用氨基固相萃取柱净化后采用高相液相色谱进行测定，查看蔬菜中7 种氨基甲酸酯类农药的具体残留量，使用该方法能够有效地简化样品处理步骤、节省时间，提升灵敏度。该方法的稳定性较好，简单方便，利于工作人员操作，且更加具有实用性，能快速检测出农药残留含量，能完全满足现在社会所需的效率、质量。