输血疗法在奶犊牛感染性出血性腹泻治疗中的应用技术

2021-11-29刘胜丽郭姚蕊秦建华

北方牧业 2021年21期

刘胜丽，郭姚蕊，秦建华

（河北省现代农业产业技术体系奶牛产业创新团队疫病防控，河北农业大学动物医学院，河北保定 071000）

奶牛场犊牛养殖过程中，经常发生感染性腹泻，如伴发消化道出血则称之为出血性腹泻，常规的抗感染、止血、补液、止泻、退热和维持电解质平衡疗法效果欠佳，病死率极高，已成为困扰奶牛养殖主要难题之一。为此，河北省现代农业产业技术体系奶牛产业创新团队历经数年系统研究，形成了输血疗法在奶犊牛感染性出血性腹泻治疗中的应用技术模式，有效控制了出血性腹泻对犊牛健康的危害，现将该技术介绍如下：

1 感染性出血性腹泻的主要病原类别

河北省不同区域和不同养殖模式的奶牛养殖场中，多种致病菌、病毒和寄生虫的单一感染或两种病原乃至多种病原的混合感染，均可引起出血性犊牛腹泻。常见的致病菌有产肠毒素大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌、弯曲杆菌、坏死杆菌和产气荚膜梭菌等；常见的病毒主要有病毒性腹泻病毒、轮状病毒、冠状病毒、传染性鼻气管炎病毒和细小病毒等；常见的寄生虫主要有球虫、微小隐孢子虫和贾第鞭毛虫。

2 出血严重程度划分与预后初判

犊牛出血性腹泻根据出血量不同分为轻度、中度、重度和极重度四个级别。

轻度（隐性）出血：奶犊牛腹泻出血量较少时（小于100 毫升），不造成粪便颜色的改变，肉眼观察粪便无血色，需要借助实验室检验才能确定，此时的出血为轻度出血，也称潜血。检验粪便中隐性出血的方法叫粪便隐血试验。邻联甲苯胺法灵敏度高，使用该方法可检出消化道1～5毫升的微量出血；联苯胺法和无色孔雀绿法中度灵敏，可检出5～10 毫升的出血；若用愈创木法检测，出血量超过20 毫升的才能呈现阳性反应。

显性出血时，腹泻粪便眼观呈不同程度红色，可为微粉、粉红、鲜红、暗红、黑红或柏油状以及有血丝、血块或完全是血液。

中度出血：肉眼观察腹泻粪便有微粉红、粉红色或有血丝，出血量大于100 毫升小于200毫升；

重度出血：肉眼观察腹泻粪便呈鲜红、暗红或有血块，出血量大于200 毫升小于500 毫升；极重度出血；粪便呈黑红或柏油状甚至全是血液，出血量大于500 毫升。

犊牛消化道发生出血后，除少数轻度（隐性）出血性病例会经及时使用止血药物处理，不再出血，预后良好；绝大多数病例，随时间推移，出血量逐渐增加，犊牛会出现急性失血的病理过程，仅凭药物止血效果欠佳，病情进展迅速，向危重死亡迈进；中度和重度出血，在病原诊断的基础上，常规抗感染、止血、补液、止泻、退热和维持电解质平衡治疗的同时，若立即输入足量新鲜血液，可达到更为满意的疗效，病程缩短，病死率降低一半；出血一旦达到极重度程度，随时会发生死亡。因此，犊牛一旦发生感染性腹泻，应立即进行粪便隐血试验检测，及时使用止血药物处理，并同时输注足量新鲜血液，弥补流失的血液，提高抵抗力和耐受性。

3 供血牛选择

供血牛应为体况良好、膘情中等、无传染病和血液寄生虫病的健康奶牛或肉牛，并且6 个月内未接受过输血。首先选用和受血患牛亲缘关系较近的后备母牛或作为肉牛饲养6 月龄内的奶公犊；其次为生母牛。不超过4 胎的泌乳牛亦可。每头供血牛可为受血（患）牛供血3～5 次，尽量不超过3 次。避免一头供血牛同时为多头受血（患）牛供血。

4 输血量和输血次数确定

轻度出血患牛：体重小于40 千克输血量150～200 毫升；体重在40～80 千克输血量200～400 毫升。一般经一次输血即可，不需重复；第一次输血后48 小时粪便隐血试验检测仍为阳性，需要再次输血。

中度出血患牛：体重小于40 千克输血量200～300 毫升；体重在40～80 千克输血量300～500 毫升。大多数经3 次输血即可。

重度出血患牛：体重小于40 千克输血量400～600 毫升；体重在40～80 千克输血量800～1000 毫升。需经3～5 次输血。

5 交叉配血试验

5.1 采血

对供血牛和受血牛（患牛）分别采集10 毫升血液，其中5 毫升血液置于促凝管，另外5 毫升血液置于抗凝管，采集的血样分别进行标记，标记需清晰明确、不易去除。

5.2 血清分离和红细胞生理盐水混悬液制备

将供血牛和受血牛（患牛）的已经凝固血样，以2000 rpm，3 分钟离心分离血清，析出的血清分别单独转移到无菌试管中备用。

将采集的供血牛和受血牛（患牛）的抗凝血液加10 倍体积生理盐水，以2000 rpm，3 分钟反复离心清洗5 次，弃去上清即为100%红细胞泥，吸取20 微升，加入含有3800 微升生理盐水的试管中，吹吸混匀即成5%红细胞生理盐水混悬液。

5.3 交叉配血步骤

选取凹面载玻片或普通载玻片一张。两个凹窝，分别用记号笔标号A 和B，A 凹窝进行交叉配血试验主侧试验，滴加受血（患）牛的血清50 微升（2 滴）和供血牛的5%红细胞生理盐水混悬液25 微升（1 滴）；B 凹窝进行交叉配血试验次侧试验，滴加供血牛的血清50 微升（2 滴）和受血（患）牛5%红细胞生理盐水混悬液25 微升（1 滴）；血清与红细胞悬液滴加后，充分进行上下、左右震荡混匀或分别用牙签搅拌均匀，室温下静置5～10 分钟，在显微镜下观察结果。

5.4 交叉配血结果判定

在显微镜下观察主侧与次测试验均无凝集反应，表示配血完全相合，可以输血；如主侧管无凝集及溶血，而次侧出现凝集，但凝集较弱，可以输少量(不超过200 毫升)血液；不论何种原因导致主侧有凝集时，坚决不可输用。

6 采血和输血

交叉配血合格后根据输血量对供血牛进行采血。

6.1 采血

无菌盛血瓶或血袋需预先注入5%柠檬酸钠抗凝剂，抗凝剂与血液的比例为1∶9～10，每个盛血瓶或袋抗凝剂总量不能超过50 毫升，即每个盛血瓶或袋最多采集450 毫升血液。

对供血牛确实保定，在牛颈部近心端1/3 处用止血带进行结扎使颈静脉弩张；再用20 号采血针连接无菌盛血瓶或袋采血，让血液沿瓶或袋壁缓慢流入，边采血边轻微摇晃输血瓶（袋），使血液与抗凝剂均匀混合。采血接近完成时，解开结扎止血带，达到采血量拔出针头。实际采血量应该比输血量多5%。

6.2 输血步骤

将采集好的含有抗凝剂的全血尽早使用16号针头通过颈静脉输入到患（受血）牛体内；若使用一次性输液器连接储血瓶或袋应剪掉过滤网；血液输入速度开始时控制在每分钟3～5 毫升，同时密切观察犊牛10 分钟，看其是否有输血反应，如有震颤、焦躁不安、不停嘶鸣、站立不稳、呼吸频数、心跳加快、呕吐、眼结膜充血、流泪、流涎和抗拒等异常，立即停止输血，30 分钟后症状可自行消失；如无异常，10分钟后可将速度调至每分钟5～15 毫升。输血完毕后留观30分钟。