儿童特应性皮炎患者血清维生素D、总IgE及嗜酸性粒细胞水平的相关性研究

付金玲， 李其林， 庞纯

1.东莞市妇幼保健院皮肤科，广东 东莞 523000；2.广州市红十字会医院皮肤科，广东 广州 510220

特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种慢性、复发性、炎症性皮肤病，通常起病于婴幼儿时期。近年来，AD的发病率在全世界范围内都呈明显上升趋势。据统计，目前欧美等发达国家发病率约为10%～20%[1]，我国1～7岁儿童AD发病率已高达12%[2]。AD确切发病机制尚不完全清楚，主要包括遗传易感性、环境因素以及免疫因素等。免疫因素方面具体表现为Th1和Th2平衡的破坏[3]。VitD是一种类固醇衍生物，25(OH)D是血清VitD在血循环中的主要存在形式，且半衰期较长，能较好地反映体内VitD水平，因此临床上常用来作为评估体内VitD水平的指标。其不但参与机体的钙、磷代谢，而且还可介导T淋巴细胞，参与机体的免疫调节[4]。为评价VitD与AD患者病情关联性及其在AD发病中炎症与免疫调节中的作用，本研究检测AD患者血清中维生素D、tIgE水平及嗜酸性粒细胞(EOS)比例，为AD的临床治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入2019 年6月至2020年7月就诊于我院皮肤科门诊的AD 患儿120例，其中男58例(48.33%)，女62例(51.67%);年龄0.35～7.30(2.50 ±2.29)岁。对照组60 例均来自于本院儿童保健科健康体检者,其中男20例，女40例;年龄0.76～5.60(2.06±1.17)岁。两组间年龄(t=1.34，P=0.185)及性别(2=2.79，P=0.095)差异均无统计学意义，具有可比性。本研究通过医院伦理审批(202145)，受试者均已签署知情同意书。

纳入标准：①符合Williams特应性皮炎诊断标准[5]；②治疗前4周内未系统使用糖皮质激素、免疫抑制剂及紫外线治疗;③治疗前2周内未使用抗组胺药；④治疗前1周内未使用皮损局部外用治疗药物。排除标准：伴有严重心、肝、肾等重要脏器功能不全者、患自身免疫性疾病者、免疫缺陷者。

1.2 AD患儿病情严重程度评估

采用SCORAD 评分法[6]评价AD患儿病情严重程度，均由2 名皮肤科医生分别进行评分后取平均值,0～24分为轻度，25～50分为中度，51～103分为重度。

1.3 血清VitD、总IgE及EOS水平检测

抽取清晨空腹静脉血2 mL，离心5 min，分离血清，置于-70 ℃冰箱保存。采用25(OH)D ELISA试剂盒(英国IDS 公司)检测25(OH)D水平。依据试剂盒说明书，将血清25(OH)D水平分为4个档次：缺乏:<37.5 nmol/L；不足:37.5～50 nmol/L；充足:50～250 nmol/L；过量：>250 nmol/L。采用上海酶联生物生产的tIgE ELISA试剂盒检测总IgE水平。利用Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪检测EOS百分率，操作均严格按试剂盒说明书要求进行。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 AD组和对照组血清25(OH)D的水平比较

AD组及对照组中均未出现VitD缺乏者及过量者。AD组VitD不足者占20%(24/120)，对照组占8%(5/60)，两组间差异无统计学意义(2=0.11，P=0.057)。AD组患儿血清25(OH)D 水平为(62.99±17.38)nmol/L，对照组血清25(OH)D水平为(72.44±18.07)nmol/L,两组间差异有统计学意义(t=2.92，P=0.004)。

2.2 AD病情严重程度与血清VitD水平相关性

根据SCORAD评分值评估AD患儿病情严重程度，轻度68例，中度48例，重度4例。经比较，三组25(OH)D水平差异无统计学意义(F=1.32,P=0.275,表1)。

表1 AD病情严重程度与血清维生素D水平分析

2.3 血清VitD水平与总IgE、EOS水平的相关性

AD患儿血清VitD水平与总IgE水平[(335.19±516.17)IU/mL]呈负相关(r=-0.38，P=0.003)，但与EOS比例[(7.72±6.04)%]无相关性(r=-0.03，P=0.827)。

3 讨论

AD病因比较复杂，发病涉及环境、遗传及免疫等多方面因素，其中免疫功能异常在发病机制中占据着主导地位，也成了目前研究的热点、难点。

近年越来越多的临床研究证实，AD患者体内25(OH)D水平存在异常。Robl等[7]研究发现，AD 患者血清25(OH)D水平低于正常人。周顺龙等[8]研究也表明，AD 组患儿血清25(OH)D水平明显低于对照组，提示25(OH)D水平与婴幼儿AD 发病具有相关性。本研究同样也显示，AD组患儿血清25(OH)D水平明显低于对照组。AD患者体内普遍存在Th1/Th2 平衡失调，其中Th2 细胞介导的慢性炎症反应被认为是发病机制的中心环节。当外界致敏原侵入机体，经树突状细胞(dendritic cells,DCs)摄取加工后提呈给T细胞，并刺激T细胞增殖分化为Th2细胞，Th2细胞活化后可分泌多种细胞因子如IL-4、IL-5、IL-10等，导致炎症过程的产生。DC在体内处于成熟过程的各个不同阶段，未成熟DC活化主要功能是致免疫耐受性，成熟DC则是诱导免疫反应，致T细胞增殖。而VitD是抑制DC分化成熟的主要因子，活性VitD能够抑制DCs的成熟及作为抗原提呈细胞激活免疫应答的功能,从而诱导免疫耐受[9]。再者，在AD急性发作期，VitD通过抑制Th2相关细胞因子(如IL-4、IL-10等)产生和促进角质形成细胞抗菌肽表达减轻炎症反应[10]。提示VitD可能参与AD的发生发展过程，提高VitD 水平也许有望成为一项重要的预防措施。另外本研究发现，血清VitD水平与AD病情严重程度无关，与李梅云等[11]研究一致。而李垣君等[12]研究却发现，轻度AD患儿血清25(OH)D水平明显高于中重度AD；刘鹏月等[13]研究也发现，轻中度AD患儿血清VitD水平高于重度AD,推测结果不一致的原因可能有以下两个方面：第一，SCORAD评分由主观与客观两部分组成，临床医生对AD疾病严重程度评判可能存在主观因素的差异；第二，研究样本量偏少导致研究偏差。提示在今后的研究中，对AD患者行SCORAD评分时可适当增加1～2名有经验的临床医师参与以减少主观差异；另一方面，适当扩大研究对象样本量以减少偏倚。

肥大细胞(mast cell,MC)是速发型变态反应的靶细胞,广泛分布于机体各个部位，可被多种变应原激活，通过脱颗粒方式释放多种生物活性介质，在过敏反应性疾病中担任着重要角色。IgE是肥大细胞活化的主要介质，可与肥大细胞膜上的特异性受体结合，当再次接触同种抗原时，可进一步引起肥大细胞脱颗粒释放炎症介质，导致血管通透性增强，炎症因子释放，从而可促进AD 的发生发展。本研究显示，AD患儿血清VitD水平越高，总IgE越低。其可能机制为活性VitD及其受体可促进CD4+T 细胞分化为调节性T 细胞，抑制Th2 反应，使B 细胞合成的IgE 减少，降低特应性疾病的发生风险[14]。动物研究显示，25(OH)D可通过25 羟维生素D-1α羟化酶(CYP27B1)激活肥大细胞表面的VitD受体，从而减弱IgE 介导的免疫应答[15]。提示AD患儿可望通过补充VitD调节其体内总IgE水平，从而改善病情。

EOS主要是通过限制其在速发性过敏反应中的作用而发挥其抗过敏效应。补充VitD可以明显减少小鼠肺组织及支气管肺泡灌洗液中的EOS及炎症细胞总数[16]；VitD缺乏与EOS计数升高有关[17]，VitD对EOS可能存在免疫调节作用。而罗丽萍等[18]发现变应性鼻炎患儿的血清25(OH)D水平与EOS计数及百分率之间均无相关性。本研究也同样显示，儿童AD患者血清VitD水平与EOS比例无相关性。表明VitD与EOS相关性结果仍存在争议，需进一步研究探讨。

综上所述，VitD 不足与高水平tIgE存在一定的相关性，可能与AD的发生发展相关。补充VitD 或可作为AD辅助治疗的一种方法，也为AD的防治提供一种新的临床思路，但目前尚缺乏补充VitD是否可以改善AD预后的随机临床对照试验，仍需进一步研究证实。