长寿花组织培养快繁技术

卢玫璇

（吉林市园林管理中心 吉林·吉林 132108）

长寿花为景天科伽蓝菜属中一种草本植物，又名圣诞伽蓝菜等，是一种常见草本花卉，可露地栽植及盆栽，观赏价值非常好。长寿花观赏效果、开花时节及观赏期极具特点，是园林绿化、室内美化应用中非常好的花材。长寿花常用繁殖方法为扦插繁殖和组培繁殖。扦插繁殖应用较早，技术比较成熟，组培繁殖技术应用较晚，还有开发空间，结合花卉生产实践介绍组织培养快繁技术。

1 长寿花组培外植体的处理

长寿花的茎顶、叶、茎、花芽和花均可以作为外植体，在作者实践中，以茎段做为外植体的效果最好。采集长寿花茎段，带回组培实验室，清水洗净截小段，装进广口瓶，无菌纱布封瓶口，流水冲洗15分钟，沥干水分将截成小段嫩枝再进一步截成2～3厘米长短段，在0.1%升汞（HgCl2）溶液中浸泡3分钟，再用无菌水冲洗4～5次，沥干水分，带入接种室中，放入已经消过毒的超净工作台上。在接种前，外植体还需在75%的酒精溶液中浸泡30分钟，用无菌水冲4～5次后，再用无菌的药棉拭干水分，放在培养皿（垫上无菌滤纸）中。茎段用酒精灯灼烧过的手术刀切割成0.5厘米的小段后再接种，首次接种每瓶只接1块原材料，这样可以降低它的污染率。接种时使茎段保持横卧状态会有较好的效果，保持横卧时，茎段侧面两个切口都能够生成愈伤组织，最后会连到一起，保证产生较大面积的愈伤组织块，为形成大量不定芽做好基础。

2 长寿花组培培养基配方选取

长寿花整个室内组培过程分为初代培养、增殖培养和生根培养三个阶段。前两个阶段基本培养基选取MS，生根培养阶段基本培养基选取1/2MS，然后往基本培养基中添加不同种类和浓度的激素。各配方的培养基均采用固体培养基，添加琼脂量为6g/L，蔗糖量为30g/L，各配方pH值均调整为5.8。所有培养基都要用高压灭菌锅高压灭菌，条件为121℃、131kPa、30分钟。初代培养主要以诱导为目的，可选用MS+6-BA1.0毫克/升+NAA0.1毫克/升配方，在实践中发现该配方除了污染之外，每个组培瓶中均能够100%的形成愈伤组织，而且愈伤组织能够较好地诱导出不定芽。增殖培养主要以扩繁为目的，实践中在基本培养基MS中添加不同配比的细胞分裂素KT和生长素IAA、NAA，结果发现KT添加量为1.0毫克/升时，生长素NAA量增加有利于增殖，但影响苗高生长。另外，玻璃化比率处于上升状态，说明添加生长素NAA，增殖倍数和苗高较IAA效果好，但易导致苗木玻璃化。经多次实践比较，在培养基中添加1.0毫克/升的GA3，可减少玻璃化现象。增殖培养基的配方选取MS+KT1.0毫克/升+NAA0.02毫克/升+GA31.0毫克/升效果最好。生根培养主要以促进增殖苗生根为目的，生根培养基配方可以选用1/2MS+IBA0.5毫克/升，生根率达到100%，且生成的根基部无愈伤组织，根较粗壮。

3 长寿花组培过程及培养条件

外植体茎段以保持横卧状态接种到初代培养基上，为降低污染率，初次接种每瓶只接1块原材料，接种后7天开始形成愈伤组织，到第15天愈伤组织生长达到最旺盛时期，此时愈伤组织上面开始分化出不定芽，经过25天时间，大部分愈伤组织上形成7～8个不定芽，待不定芽长成3～4厘米，将其切成1～2厘米小段转接到增殖培养基配方中，增殖培养基上培养20天将会长成小丛苗，然后再次切割小丛苗进行第二代增殖，总共增殖培养3代，然后进行生根培养，生根培养时间为20～25天。

三个阶段培养过程均在培养室进行，接种、转瓶过程均需无菌条件，培养室、接种室要保证无菌环境。初代阶段，温度控制20～25℃，光照度1000～2000Lx，每天光照8小时；增殖阶段温度控制在 25～28℃，光照度 2000～3000Lx，每天光照时间 8～12 小时；生根阶段温度前期阶段控制25℃，后期阶段控制25～28℃，光照强度先低后高，控制在1500～4000Lx，光照时间14小时。

4 组培苗出瓶移栽及养护

长寿花在生根培养基上长到苗木高达3厘米、具有3～4条1～2厘米长根系时进行出瓶移栽操作。出瓶前炼苗3～5天，出瓶基质可采用蛭石、沙子、草碳、园土等，实践表明采用蛭石∶沙子=2∶1效果较好，出瓶成活率达到98%，苗木生长状况好，叶浓绿，苗健壮，新根粗壮。出瓶后需在大棚温室进行培养1个月，环境随正常大棚环境。在大棚培养前期阶段，需要覆盖塑料薄膜，保证膜内湿度在80%～85%，大棚的遮荫率在50%，另注意病虫害的防治。