宫颈癌组织中PGRMC1表达水平与临床病理特征、预后的关系

王巧妹，陈建红

苏州高新区人民医院妇产科，江苏苏州 215129

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，占女性生殖系统肿瘤1/2以上，并且近年来其发病人群逐渐趋向年轻化[1]，同时根据相关统计发现，世界每年新发宫颈癌病例超53万，死亡人数达27.5万左右，严重威胁女性的生命安全[2]。既往有研究认为，尽早诊断对于降低宫颈癌患者病死率、改善预后具有重要作用[3]。孕激素受体膜组分1(PGRMC1)是膜相关孕激素受体蛋白家族成员之一，并且参与多种细胞进程[4]，既往研究发现，PGRMC1与乳腺癌预后存在密切关系[5]。目前国内鲜见PGRMC1与宫颈癌的临床特征、预后的相关性报道。本研究拟检测宫颈癌组织中PGRMC1表达水平，探讨其与宫颈癌患者临床病理特征、预后的关系，为宫颈癌的诊断与治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2013年11月至2017年11月本院收治并经空心针活检或术后病理组织学检查确诊的96例宫颈癌患者作为研究对象，96份宫颈癌组织标本作为研究组，96份宫颈癌旁组织标本(距肿瘤边缘4 cm处)作为对照组。患者年龄20～66岁，平均(46.62±5.32)岁。纳入标准：(1)符合2014年世界卫生组织女性生殖器官肿瘤(宫颈癌)的分类标准[6]，并经病理检查已确诊；(2)按照宫颈癌国际妇产科联盟(FIGO)[7]分期标准分为Ⅰa～Ⅱb期；(3)行广泛性全子宫切除术联合盆腔淋巴结清扫术。排除标准：(1)合并严重感染性疾病、免疫系统疾病者；(2)合并子宫内膜癌等其他恶性肿瘤者；(3)术前接受放疗、化疗及生物治疗的患者；(4)既往有精神病史者。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。所有患者出院后经电话、门诊复诊随访3年，随访截止时间为2020年11月30日或出现转移或死亡，随访率为100%。

1.2方法 采用免疫组织化学染色法检测研究对象组织中的PGRMC1表达水平，首先将两组织标本经60 ℃熔点石蜡包埋以及4 μm连续切片后，通过苏木素(武汉谷歌生物科技有限公司)染色，确定病变区域，载玻片上制片后采用柠檬酸修复液高温高压修复抗原，随后加入稀释的兔抗人PGRMC1(1∶100)单克隆抗体(美国HBT公司)4 ℃孵育过夜，再加入二抗孵育20 min，随后使用DAB盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)显色，苏木素复染，树脂胶(武汉谷歌生物科技有限公司)封片，镜下观察染色情况。结果判定[8]：PGRMC1均定位于主要细胞膜或细胞质，肿瘤细胞质出现棕黄色或黄褐色均匀颗粒为阳性细胞。结果判定主要是在10个高倍视野下观察细胞染色情况，并根据细胞染色强度与阳性细胞率评分标准进行综合评分，结果判定由2位高年资的病理医师共同完成。细胞染色强度评分标准：0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色。阳性细胞率评分标准：0分(计数阳性染色细胞占细胞总数百分比<10%)，1分(计数阳性染色细胞占细胞总数百分比为10%～25%)，2分(计数阳性染色细胞占细胞总数百分比为>25%～50%)，3分(计数阳性染色细胞占细胞总数百分比为>50%～75%)，4分(计数阳性染色细胞占细胞总数百分比>75%)。最终得分=细胞染色强度评分×阳性细胞率评分，得分>2分判定为阳性，≤2分判定为阴性。

2 结 果

2.1宫颈癌患者组织标本PGRMC1表达情况比较 宫颈癌组织中PGRMC1阳性表达率高于癌旁组织(67.71%vs.29.17%，P<0.001)，见表1、图1。

表1 宫颈癌患者组织标本PGRMC1表达情况比较[n(%)]

注：A为癌旁组织中阴性表达，B为癌组织中阳性表达。

2.2PGRMC1表达情况和宫颈癌患者临床病理特征的关系 PGRMC表达情况与宫颈癌患者年龄、病理类型、肌层浸润深度、肿瘤大小无关(P>0.05)，但PGRMC表达情况与宫颈癌FIGO分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)，且当宫颈癌患者为FIGO分期Ⅱ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移时，PGRMC阳性表达率明显升高(P<0.05)，见表2。

表2 PGRMC1表达情况与宫颈癌患者临床病理特征的关系(n)

2.3PGRMC1表达情况与宫颈癌预后的关系 所有患者出院后随访3～36个月，3年生存率为67.71%(65/96)。PGRMC1阳性、阴性患者3年生存率分别为58.46%(38/65)、87.10%(27/31)，采用Kaplan-Meier法进行分析，两组间的差异有统计学意义(χ2=18.168，P<0.001)。

2.4影响宫颈癌预后的单因素分析 FIGO分期Ⅱ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、PGRMC1阳性表达的宫颈癌患者3年生存率均显著降低(P<0.05)，见表3。

2.5影响宫颈癌预后的多因素Cox回归分析 肿瘤低分化、有淋巴结转移、FIGO分期Ⅱ期、PGRMC1阳性表达均为影响宫颈癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)，见表4。

表4 影响宫颈癌预后的多因素Cox回归分析

3 讨 论

宫颈癌是主要由人乳头瘤病毒感染导致的女性疾病。该疾病早期症状不明显，一般出现明显症状时已处于中晚期，目前其发病机制尚不明确，但与病毒感染、多次人工流产、长期使用避孕药等因素有关[9]。导致肿瘤病死率升高的重要因素是肿瘤出现侵袭和转移，有研究发现，80%以上的宫颈癌死亡是由肿瘤转移和侵袭导致的[10-11]。因此，早期诊断并防止肿瘤转移、侵袭是改善宫颈癌预后的重要措施。近年来，随着宫颈癌发病率逐渐升高，我国对宫颈癌分子生物学的研究也进入更深的探索阶段，已发现并证实多项分子指标在宫颈癌的诊断、预后评估等方面具有重要作用[12-13]。

PGRMC1是近年发现的相对分子质量为22×103～26×103的多蛋白孕酮复合物，广泛存在于真核生物膜相关的孕激素受体蛋白家族，目前的研究发现，PGRMC1能够结合并调节细胞色素17450酶，具有参与调节细胞周期、P4信号通路和类固醇应答等作用[14]。既往已有研究发现，PGRMC1的表达水平在多种肿瘤中升高[15-16]。

本研究结果显示，宫颈癌组织中PGRMC1阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05)，提示PGRMC1在宫颈癌组织中表达水平升高。而既往也有研究发现，PGRMC1在交界性卵巢肿瘤与卵巢癌组织中的表达水平高于正常卵巢组织[17]。同时本研究发现，PGRMC1表达水平与宫颈癌FIGO分期、分化程度、淋巴结转移情况有关，且当宫颈癌为FIGOⅡ期、低分化、有淋巴结转移时，PGRMC1阳性表达率明显升高(P<0.05)，表示PGRMC1表达水平与宫颈癌严重程度有关，并与疾病的发生发展存在密切关系，其阳性表达提示患者预后不良。既往也有研究发现，PGRMC1表达水平与乳腺癌患者的临床分期、淋巴转移情况密切相关[18]。本研究经随访以及单因素分析发现，PGRMC1阳性表达患者的3年生存率低于阴性表达患者(P<0.05)，提示PGRMC1表达水平能够反映宫颈癌患者预后。同时本研究经多因素Cox分析发现，肿瘤低分化、淋巴结转移、FIGO分期Ⅱ期、PGRMC1阳性表达均为影响宫颈癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)，进一步证实PGRMC1对宫颈癌的发生、进展有着重要的影响，能够作为评估患者预后的生物标志物。可能是由于PGRMC1在介导孕激素的非基因组效应中发挥重要作用，同时还能够与血红素直接结合激活细胞色素P450参与调节体内类固醇、药物代谢及性激素的合成，并且当其表达水平升高时能够导致肿瘤对化疗产生抵抗。而宫颈癌的发生、发展与雌孕激素相关，当PGRMC1表达水平升高时能够使性激素合成异常，从而导致宫颈癌患者病情逐渐加重，且预后不良。

综上所述，PGRMC1的表达水平在宫颈癌组织中升高，且与宫颈癌患者临床病理特征有关，PGRMC1阳性表达的宫颈癌患者预后相对较差，因此，PGRMC1有望作为宫颈癌病情判断及预后预测的有效生物标志物。