微柱凝胶免疫检测技术与盐水试管检测技术在临床输血治疗中的应用

黄丹云

福州市长乐区医院血库 (福建福州 350200)

输血作为临床常见的治疗方式，有助于快速补充患者的血容量，但若血液质量差、血型不符，则易导致不良输血反应，降低治疗安全性，进而引起医疗纠纷，因此，在行输血治疗前，应确保血液质量及进行血型鉴定，并应严格配对，避免发生不良输血反应[1]。目前，临床进行血型鉴定及交叉配血常用的方法包括盐水试管检测技术与微柱凝胶免疫检测技术[2]。基于此，本研究比较微柱凝胶免疫检测技术与盐水试管检测技术在临床输血治疗中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年5月至2020年5月我院收治的500例输血患者作为研究对象，采用随机数字表法分为对照组与试验组，每组250例。试验组男130例，女120例；年龄21～75岁，平均(37.10±8.70)岁。对照组男125例，女125例；年龄22～76岁，平均(36.90±9.03)岁。两组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。纳入标准：符合输血治疗适应证；均了解研究目的，同意参与研究；病历资料完整。排除标准：既往有精神疾病史；不配合研究。

1.2 方法

分别抽取患者及供血者清晨空腹静脉血4～8 ml作为血液样本，均分成2份，其中1份进行血型鉴定，另1份进行交叉配血。

试验组采用微柱凝胶免疫检测技术进行血型鉴定与交叉配血。(1)血型鉴定：选择ABO正反定型、RhD血型定型试剂卡(由湘仪集团提供)，在18～25 ℃条件下平衡30 min，使用长沙湘智离心机仪器有限公司提供的TG16WS离心机以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心2 min，确保外观无气泡、干胶和杂质后缓慢撕膜待用；取患者与供血者血液样本，经抗凝处理后以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心10 min后取上层血清，在18～25 ℃条件下平衡30 min，防止冷凝集；然后分别加入适量0.9%氯化钠注射液将患者与供血者血清样本分别配置成浓度为0.5%的红细胞悬液，外观检查呈均匀淡红色，无血块及絮状物后待用；对ABO正反定型、RhD血型定型试剂卡做好标记，分别为A、B、C、D、E、F，将浓度为0.5%的红细胞悬液分别加入A、B、C、D管中，各50 μl，并将已知A型、B型的0.5%红细胞悬液加入E、F凝胶微管中，各50 μl，然后以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心5 min后肉眼观察血型鉴定结果。(2)交叉配血：对微柱凝胶卡[由强生(上海)医疗器材有限公司提供]做好标记，并在凝胶微管上标记主侧与次侧，在主侧凝胶微管内滴注50 μl供血者红细胞悬液与25 μl患者血清样本，在次侧凝胶微管内滴注25 μl供血者血清样本与 50 μl患者红细胞悬液，待操作完成后将其置于37 ℃下孵育，在孵育15 min后以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心9 min，然后进行结果判定。

对照组采用盐水试管检测技术进行血型鉴定与交叉配血。(1)血型鉴定：将所有血液样本经抗凝处理后以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心10 min后取上层血清，然后加入适量0.9%氯化钠注射液将血清样本配置成浓度0.5%的红细胞悬液；取小试管2支，分别标明A、B字样，在A试管中加入A型标准血清与患者的红细胞悬液各50 μl，在B试管中加入B型标准血清与患者的红细胞悬液各50 μl，混匀后均以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心1 min；取出试管后用手指轻弹试管底，使沉淀物被弹起，在良好的光源下观察结果。(2)交叉配血：采用聚凝胺法，将供血者与患者的血液样本以1 000 r/min离心速率、15 cm离心半径离心10 min后取上层血清，加入适量0.9%氯化钠注射液将血清样本配置成浓度0.5%的红细胞悬液；取2支微管，分别标记为主侧管和次侧管，在主侧管中滴注30 μl供血者红细胞悬液与 50 μl患者血清样本，在次侧管中滴注50 μl供血者血清样本与30 μl患者红细胞悬液，然后每管再加入0.6 ml低离子介质溶液后混匀，静置1 min后每管再滴注2滴聚凝胺溶液(上海翊圣生物科技有限公司)，混匀后以1 300 r/min离心速率、15 cm离心半径离心15 s后弃去上清液，然后轻摇试管，观察有凝集后(若无凝集必须重做)取管底0.1 ml凝集液，并加入2滴重悬液，然后轻转试管以混匀，肉眼观察结果。

1.3 评价指标

(1)比较两组正反定型符合情况：管内红细胞部分或全部与柱内凝胶结合(试验组)或红细胞出现凝集(对照组)为阳性，管内红细胞完全沉积到微柱管尖底部(试验组)或呈散在游离状态(对照组)为阴性；若正反定型均为阴性则表示正反定型相符，若正反定型出现任一阳性表示正反定型不符，正反定型符合时可进行下一步交叉配血操作，正反定型不符时必须将标本复查，并进一步查明原因，获得准确的检验结果。(2)比较两组交叉配血结果：微柱凝胶法的判定标准，红细胞沉积于凝胶微管底为匹配，红细胞聚集于凝胶微管上、中部位为不匹配；聚凝胺法的判定标准，主侧管及次侧管内红细胞凝集在1 min内散开属于聚凝胺引起的非特异性凝集，表示患者与供血者血型匹配，红细胞凝集不散开属于异体抗体所引起的免疫性凝集，表示患者与供血者血型不匹配。(3)比较两组输血服务质量(按照《临床科室输血质量自查评分细则》进行评定，0～100分，分值越高代表输血服务质量越高)及输血意外事件发生情况。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 两组血型鉴定结果比较

两组正反定型符合情况比较，差异无统计学意义(χ2=0.145，P=0.703)，见表1。

表1 两组血型鉴定结果比较[例(%)]

2.2 两组交叉配血结果比较

试验组交叉配血成功率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组交叉配血结果比较[例(%)]

2.3两组输血服务质量及输血意外事件发生情况比较

试验组输血服务质量评分高于对照组，输血意外事件发生率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 两组输血服务质量及输血意外事件发生情况比较

3 讨论

临床急诊急救中常采用输血治疗，可及时为患者补充血容量，避免由于血液流失过多导致的休克等意外事件，而于输血前采取适宜的手段进行准确的血型鉴定及交叉配血非常必要[3]。

既往临床多采用盐水试管检测技术进行血型鉴定，采用聚凝胺法进行交叉配血，结果易受药物等因素的影响，无法满足临床实际需要[4]。随着医疗技术的进步，微柱凝胶免疫检测技术被广泛用于血型鉴定与交叉配血中。有研究表明，与传统检测方法相比，微柱凝胶免疫检测具有检测步骤简便、准确率和灵敏度高、自动化程度和标准化高、输血安全等优点[5]。本研究结果显示，两组正反定型符合情况比较，差异无统计学意义(P>0.05)；试验组交叉配血成功率及输血服务质量评分均高于对照组，输血意外事件发生率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。经分析，其原因为，微柱凝胶免疫检测技术是将抗原抗体反应与凝胶过滤层析原理相结合的血型血清型检测技术，其本质是红细胞凝集试验，在进行微柱凝胶免疫检测时，在装有超细凝胶介质的凝胶微管中红细胞和相应抗体结合后可形成红细胞凝集团块，在一定的离心作用力下，该凝集团块位于凝胶介质表面或者中间，说明配血不合，而若血清中不含有针对红细胞膜上血型抗原的抗体，红细胞便不能和抗体结合，在同样的离心作用力下，红细胞可沉降到凝胶微管底部，说明配血成功；通过上述肉眼可见的红细胞凝集反应便可准确判定患者与供血者的配血结果，利于提高交叉配血成功率，进而保证临床输血安全性和有效性，对提升输血服务质量、减少输血意外事件发生具有重要意义。

综上所述，将微柱凝胶免疫检测技术应用于临床输血治疗中，可提高交叉配血成功率及输血服务质量，减少输血意外事件的发生。