胶体金法与酶联免疫法检测艾滋病抗体的结果比较

戚爱云

（扬中市疾病预防控制中心 江苏 扬中 212200）

快速检测艾滋病毒感染者为预防艾滋病毒提供了一个重要机会。急性艾滋病毒感染是在可检测到的艾滋病毒抗体出现之前艾滋病毒复制和脱落的疾病阶段。在此期间，血液和生殖器分泌物中的病毒载量达到高峰[1]。艾滋病毒感染的诊断通常基于血清转换，即在暴露后3 ～8 周出现的艾滋病毒抗体的检测。尽管目前使用的HIV 抗体检测方法很敏感，但在此期间，急性HIV 感染者的HIV 抗体检测结果呈阴性，这是一个“窗口期”。这一窗口期可能从几周到几个月不等，具体取决于检测的类型和一个人产生艾滋病毒特异性抗体的速度[2]。目前，美国常规使用3 种艾滋病毒抗体检测系统：第一代和第二代IgG 敏感分析和第三代IgM/IgG 敏感分析。通过检测血浆或血清中是否存在艾滋病毒RNA，可以缩短窗口期。艾滋病毒RNA 检测的灵敏度为50 拷贝/mL，可以在对IgM/IgG 敏感的艾滋病毒抗体检测前大约6 ～11 d 以及在对IgM/IgG 敏感的艾滋病毒抗体检测之前26 ～31 d确定艾滋病毒感染。少数研究表明，结合多级样本池的艾滋病毒RNA 筛查策略对于检测急性艾滋病毒感染是可行的，而且具有成本效益[3]。检测急性艾滋病毒感染对公共卫生有重要影响。首先，这些人存在艾滋病毒二次传播的巨大可能性，这将极大地增加艾滋病毒感染的传播。如果没有意识到自己感染艾滋病毒的新感染者与未感染的人进行高危行为，可能会导致相当大比例的感染。应该对急性HIV 感染者进行诸如禁欲和安全性行为等降低风险策略的咨询。研究表明，在收到艾滋病毒阳性检测结果时进行咨询干预与显著减少危险行为有关，这表明对急性艾滋病毒感染者的识别和咨询应该是艾滋病毒预防方案的优先事项。同时，追踪病源患者及其暴露的伴侣可能有助于确定艾滋病毒传播活跃的性网络和社会网络的特征，并可能促进有针对性的干预。由于细菌性传播疾病的潜伏期与开发可检测的艾滋病毒抗体所需的时间相比相对较短，筛查性传播疾病时的常规艾滋病毒抗体检测可能会漏掉最近的艾滋病毒感染。本研究的主要目的是探索分析胶体金法检测及酶联免疫法检测对于艾滋病抗体检测的临床应用价值。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2018 年12 月—2020 年12 月收取的780 例血清样本，其中男625 例，女155 例。年龄19 ～81 岁，平均年龄（34.19±7.55）岁。纳入标准：①所选取血清的患者均已成年且签署知情同意书。排除标准：①患有其他免疫系统疾病的患者；②思维混乱无法做出主观选择的患者；③正处于孕期或哺乳期的患者；④患有其他严重疾病的患者。

1.2 方法

患者于早晨禁食禁水抽血检测，所需血液量为4 mL，采用离心机3 000 r/min 离心10 min 处理血液。完成离心操作后使用专用HIV 诊断试剂盒进行检测，具体注意事项参照说明书。检测步骤：（1）胶体金法：①标本和试剂盒室温放置0.5 h 时平衡温度，拆包后60 min内完成操作；②首先加入25 μL，随后加入100 μL 稀释液；③静置15 min 后观察结果，20 min 钟后失效。（2）酶联免疫法：①标本和试剂盒室温放置0.5 h 平衡温度；②按照检测需求取板，余板使用密封袋密封防止失效；③完成加样后，打开自动酶标仪，检测样品状态。

1.3 观察指标

根据采取的不同检测方法按照不同标准进行判断。在酶联免疫法操作过程中，如果样本的光密度值超过阈值，则报告阳性，反之为阴性。在胶体金法操作过程中，如果检测域出现紫红色带，则报告阳性，反之为阴性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 18.0 统计软件进行数据处理，计数资料用百分比（%）表示，行χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

采用胶体金法检出79 例患者，检出率为10.13%。采用酶联免疫法检出80 例患者，检出率为10.26%，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

3.讨论

早期患者的检测和治疗具有重要的诊断、临床和公共卫生意义。治疗对感染者是有益的，早期开始治疗可能会带来长期的免疫-病毒学益处，而且广泛的研究已经证明了早期抗逆转录病毒疗法的优势，无论采用何种方案[4]。即时抗逆转录病毒疗法对未感染的性伴侣也是有利的，在抑制病毒血症的情况下降低了感染的风险。

尽管在许多地区进行了全面的艾滋病毒干预并扩大了抗逆转录病毒疗法服务，但每年仍有200 万新的成人艾滋病毒病例。许多艾滋病毒携带者既没有接受抗逆转录病毒治疗，也没有受到病毒抑制，现有预防举措的失败可能解释了一些正在发生的传播事件[5]。然而，艾滋病毒发病率基本没有变化的部分原因肯定是当前的规划未能发现和治疗急性艾滋病毒感染。根据分类，急性感染被定义为从病毒感染到HIV 特异性抗体出现之间的一段时间，通常伴随着病毒血症的爆发[6]。相比之下，包括急性期在内的早期感染意味着大约6 个月的传播效率提高。急性或早期感染的人可能在HIV 传播中扮演不成比例的角色；加强对早期患者的识别和管理是降低发病率的关键。

艾滋病患者的免疫缺陷程度远远大于服用类固醇或环磷酰胺类药物的患者。在艾滋病患者中，严重的细胞免疫紊乱与相对正常的体液免疫形成对比。细胞免疫和体液免疫由两类淋巴细胞定义。每个类别都有不同的功能。所有淋巴细胞都有专用于亚群的表膜结构。体液免疫系统由B 淋巴细胞组成，它们产生抗体，直接与细菌结合，并覆盖细菌以增强吞噬功能。细胞免疫系统由T细胞组成：这些细胞是致敏的淋巴细胞，表面有类似抗体的分子。这些表面分子影响细胞介导的免疫并引起迟发型超敏反应。T 细胞被产生的针对其表面结构的单克隆抗体进一步脱线成亚群。这种抗体结合描绘了具有特定功能的T 细胞。T-4 细胞有助于诱导或增强免疫反应；因此，它们被称为“辅助细胞”。T-8 细胞抑制这些效应或发展成杀伤细胞。在艾滋病患者中，T-4 和T-8 的比例与正常比例相反，是因为T 辅助细胞的绝对不足，而不是这两个亚群的变化。健康人群的辅助抑制比平均为1.75 ～2.1，而许多艾滋病患者的辅助抑制比远小于1。艾滋病患者的细胞免疫缺陷也表现为皮试无能、白细胞减少、淋巴细胞减少，以及T 细胞对一系列有丝分裂原的体外反应性降低。相比之下，艾滋病患者的体液免疫功能保持完好，大多数患者免疫球蛋白水平升高（特别是IgG，较少一致的IgA 和IgM）。这种增加可能反映了B 淋巴细胞过度活跃人类白细胞抗原（HLA）-DRS（即在艾滋病患者中发现频率较高的基因组）、自身免疫性血小板减少症和循环中一种不寻常的酸不稳定干扰素的患病率也有增加的报道。

性传播疾病的存在是艾滋病毒感染的一个重要风险因素。生殖器溃疡性疾病，特别是疱疹和梅毒，以及淋病等炎症性疾病增加了艾滋病毒的获得率。在这项研究中，艾滋病毒感染者在艾滋病毒检测时比未感染艾滋病毒的人更有可能患上性传播疾病。这表明，使用艾滋病毒RNA 检测可以很容易地识别出患有急性艾滋病毒感染和其他急性性传播感染的人。这些双重感染者具有很高的传染性，甚至更有可能将艾滋病毒传染给其他人。性病门诊就诊者急性艾滋病毒感染的流行率很高。性病诊所可能是筛查急性艾滋病毒感染的理想地点，以避免艾滋病毒的进一步传播。对艾滋病毒早期感染期间传播率的经验估计表明，大约17 000 例新感染可能是由急性感染者造成的。因此，应将相当大的努力和资源用于评估对急性艾滋病毒感染者的识别、咨询、伴侣预防服务，以及可能的早期治疗。

综上所述，本文结果显示，使用胶体金法及酶联免疫法开展艾滋病抗体检测效果相同，对于艾滋病患者都有较好的检出率，临床上可根据具体情况选择应用。