一个戈谢病Ⅱ型中国家系GBA基因突变分析及文献复习

黄霜?陈素琴

【摘要】目的 鑒定一个戈谢病Ⅱ型中国家系中GBA基因的致病性突变。方法 收集1例戈谢病Ⅱ型10个月女性患儿的临床及家系资料，提取该先证者及其父母外周血DNA，采用PCR扩增GBA基因的11个外显子及剪接位点序列，对PCR产物进行直接测序;对先证者及其父亲的包含第6外显子变异位点的基因序列进行克隆测序。以 “Gaucher disease”“GBA” 和“mutation”为检索词对dbSNP、ClinVar、HGMD和PubMed等数据库进行检索，收集并分析检索到的携带GBA c.680_681delATinsGG突变的病例资料。结合该家系先证者的临床资料以及美国医学遗传学与基因组学学会和分子病理学协会（ACMG/AMP）的指南进行罕见突变的致病性鉴定。结果 该家系先证者GBA基因有2个复合杂合性突变：遗传自父亲的第6外显子的c.680_681delATinsGG（p.N227R）突变和遗传自母亲的第10外显子的c.1448T > C（p.L483P）突变。克隆测序验证了先证者及其父亲的c.680_681位点有2种单体型：突变的GG和正常的AT。c.680_681delATinsGG为罕见突变，尚未有研究对该突变进行致病性鉴定。随访显示先证者有运动、智力进行性减退以及惊厥发作和喂养困难，于出生后16个月因喂养时呛咳、窒息死亡。目前在数据库仅检索到2例患者携带该突变，其中1例患病资料缺乏，另外1例为中国戈谢病Ⅱ型患儿。根据ACMG/AMP的指南，该变异分类为“致病性的”。结论 GBA基因的c.680_681delATinsGG和c.1448T > C复合杂合性突变导致该家系的先证者患病，c.680_681delATinsGG为致病性突变，c.680_681delATinsGG/c.1448T > C基因型与戈谢病Ⅱ型相关。

【关键词】戈谢病;Ⅱ型;  GBA基因;致病性突变

Analysis and literature review of GBA gene mutations in a Chinese family with one member suffered from type 2 Gaucher disease Huang Shuang， Chen Suqin.Department of Laboratory， Panyu Hexian Memorial Hospital，Guangzhou 510530， China Corresponding author， Chen Suqin， E-mail： chensq@mail.sysu.edu.cn

【Abstract】Objective To identify the pathogenic mutations of the GBA gene in a Chinese infant with type 2 Gaucher disease. Methods Clinical data and the family history of the proband， a 10-month-old affected female infant， were investigated. DNA was extracted from the peripheral blood of the proband and her parents. All 11 exons and the intron-exon splice sites of GBA gene were amplified by polymerase chain reaction （PCR）. Mutations were detected by direct sequencing the PCR products. The DNA sequence containing exon 6 variant of the proband and her father were cloned and sequenced. Using the keywords of “Gaucher disease” “GBA gene” and “mutation”， relevant literatures were searched from dbSNP， ClinVar， HGMD， PubMed and other relevant databases. Phenotypic data of these patients with the GBA c.680_681delATinsGG mutation were collected and analyzed. The pathogenicity of the rare mutation was identified by the clinical manifestations of the proband in combination with the ACMG/AMP guidelines. Results The proband was found to be compound heterozygous for two mutations in the GBA gene： c.680_681delATinsGG（p.N227R）mutation in the exon 6 from her father and c.1448T > C（p.L483P）in the exon 10 from her mother. Cloning and sequencing verified both the proband and her father carried mutant GG and normal AT haplotypes at c.680_681 sites. The c.680_681delATinsGG is a rare mutation， and its pathogenicity has not been identified. Subsequent follow-up revealed that the proband developed progressive deterioration in physical activity and intelligence， convulsion and difficulty in feeding， and died of cough and suffocation due to feeding at 16 months after birth. At present， only 2 patients with this mutation have been retrieved， and clinical data were lacking in 1 case and the other case was a Chinese child with type 2 Gaucher disease. According to the ACMG/AMP guidelines， the variation was classified as “pathogenic”. Conclusions The compound heterozygous c.680_681delATinsGG （p.N227R） and c.1448T > C （p.L483P） mutations lead to the incidence of type 2 Gaucher disease in the proband. c.680_681delATinsGG is a pathogenic mutation and c.680_681delATinsGG/c.1448T > C genotype is associated with type 2 Gaucher disease.

【Key words】Gaucher disease; Type 2; GBA gene; Pathogenic mutation

戈谢病又称葡萄糖脑苷脂酶缺乏症或葡萄糖神经酰胺贮积病，是一种罕见的遗传代谢障碍性疾病。其代谢基础为溶酶体内葡萄糖脑苷脂酶（GBA）缺乏， 导致其底物葡萄糖神经酰胺无法水解成葡萄糖和神经酰胺，大量的底物贮积在多种组织器官的单核巨噬细胞中，形成“戈谢细胞”，出现相应的临床症状[1]。戈谢病的主要临床表现为肝脾肿大、贫血、血小板减少、骨骼病变以及神经系统受累等。但患者临床严重程度差异较大，轻者可无任何症状，重者可在围产期死亡。根据临床特征和病程，戈谢病通常被分为3种类型：Ⅰ型（非神经病变型）、Ⅱ型（急性神经病变型）和Ⅲ型（慢性或亚急性神经病变型）[1-3]。

戈谢病的主要致病基因为GBA基因（NM_0001005741），其确诊依赖于GBA酶活性的测定或GBA基因分析。目前戈谢病在世界各地均有发病，但其发病率具有明显的种族差异性。一般人群中，戈谢病发病率约1/40 000 ～ 1/ 60 000;而在Ashkenazi犹太人中，戈谢病Ⅰ型发病率高达1/850[4-5]。我国于1948年首次报道了该病，其后各地陆续有病例报告，但尚缺乏完善的流行病学数据。新生儿筛查数据显示，台湾地区新生儿发病率为1/103 134，上海地区新生儿发病率为1/ 80 855[6-7]。

病例研究显示，我国戈谢病患者以Ⅰ型为主，Ⅱ型相对少见[8-13]。本文报道1例罕见的戈谢病Ⅱ型患儿的临床表现及其家系的分子遗传学分析结果， 以期为提高医学同行们的诊疗水平提供参考。

对象与方法

一、1例戈谢病Ⅱ型患儿临床资料的收集

本项目研究对象为1例临床诊断为戈谢病Ⅱ型的女性患儿及其父母。收集并分析患儿的病史、体格检查、实验室及辅助检查、治疗等资料（患儿病历资料由其家属提供，应家属要求隐藏部分涉及隐私信息）。

二、患儿及其父母的分子遗传学分析

1. 基因组DNA的提取

经患儿家属知情同意，并经中山大学伦理委员会批准后，取患儿及其父母外周血2 mL，按常规酚/氯仿/异戊醇抽提法进行DNA的提取。

2. GBA基因序列分析

对患儿及其父母的GBA基因的全部（11个）外显子及其剪接位点进行直接序列分析。引物序列及PCR扩增按文献操作[9，14]。对PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳、回收纯化，直接测序。测序结果用Chromos Lite 2.1.1软件分析，所得序列与数据库中的GBA基因序列进行比对。变异位点的描述按人类基因组变异协会所推荐的命名法则[15]。

3. 包含变异位点的第6外显子序列的克隆测序

采用TOPO TA 克隆技术，将患儿及其父亲的包含GBA 基因第6外显子的PCR扩增产物与TOPO 质粒载体连接后转染大肠杆菌，接种于LB 固体平板并在37℃培养过夜，从中挑选出数个克隆转移到LB 液体培养基中增殖，提取质粒DNA 进行测序鉴定，确定标本的单体型。

4. 罕见突变的数据库检索

以“gaucher disease”“GBA”和“mutation”为检索词在公共数据库中检索突变的收录情况，包括dbSNP、ClinVar、ESP6500、ExAC、1000genomics、HGMD和PubMed。上述数据库检索的截止时间为2021年8月20日。

5. 罕见突变的致病性鉴定

利用PROVEAN、SIFT 和MutationTaster软件预测突变对蛋白质功能的影响。根据2015年美国医学遗传学与基因组学学会和分子病理學协会（ACMG/AMP）变异分类指南对发现的罕见突变进行分类[16]。

结果

一、1例戈谢病Ⅱ型患儿的临床资料

1. 基本情况及家族史

患儿女，汉族，10个月，足月，剖宫产娩出，出生体质量3.3 kg，出生时有窒息史，阿普加评分1 min 7分、5 min 10分，母亲系孕1产1，妊娠期基本健康。患儿出生后母乳喂养，5月龄时添加辅食，9月龄时断母乳。患儿2月龄会抬头，4月龄会翻身，但竖直躯体时头向后仰，10月龄会咿呀发音，会逗笑，会认人，但不会爬，坐不稳，生长发育落后于正常同龄儿。父母非近亲婚配，身体健康。血缘亲属中无遗传性代谢性疾病或其他遗传病病史。

2. 入院主诉、病史及检查

患儿因面色苍白伴进行性腹胀5个月，咳嗽1周入院治疗。患儿3月龄时开始出现反复发作性咳嗽、喘鸣和呼吸困难，家属自行予“支气管哮喘”药物治疗后症状缓解。患儿5月龄时出现面色苍白，腹胀，继而反复腹泻，8次/日，呈水样便，伴进行性腹胀，以“腹泻病”在当地多家医院诊治，无明显好转。8月龄时加辅食（米糊）后腹泻较前好转，但渐出现舌喜外露，双眼非共同性内斜视，无伴眼球震颤，双眼球运动协调性欠佳，并出现流质食物吞咽困难、呛咳，固体食物吞咽无异常，无伴呕吐。9月龄时盗汗明显，无易惊或畏寒发热。入院1周前出现咳嗽、喘息、喉鸣，当地医院诊断为“喘息性支气管肺炎，贫血原因待查，运动发育落后，先天性喉喘鸣”，经抗感染及输血治疗后咳嗽较前好转。

入院检查：体质量 6.45 kg，身高66 cm，头围 43.5 cm，神志清晰，精神稍差，发育落后，全身皮肤黏膜苍白，毛发稀黄，前囟1.5 cm×1.5 cm，眼球无突出及凹陷，双眼非共同性内斜视，双眼球运动协调性欠佳，无伴眼球震颤。双肺呼吸音稍粗，未闻及干、湿啰音。腹部膨隆，肝下缘位于肋下5.5 cm，剑突下5.5 cm，质中，边缘锐利，肝颈静脉回流征阴性。脾肋下可触及，Ⅰ线9.5 cm，Ⅱ线6.5 cm， Ⅲ线-2.5 cm，质硬。血常规：血红蛋白 73 g/L，红细胞3.2×1012/L， 白细胞5.2×109/L，红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC） 302.0 g/L， 平均红细胞体积73.1 fL，平均血红蛋白含量22.1 pg， 血小板计数46×109/L。腹部超声检查：肝肿大，脾Ⅱ度肿大。尿有机酸、血液氨基酸、染色体微阵列分析、EB病毒检查均未见异常。白细胞溶酶体活性分析：β-葡萄糖苷酶活性[0.5 nmol/（h·mg）]

低于正常参考值[6.8 nmol/（h·mg）]的10%。结合临床表现及实验室检查结果，初步诊断为戈谢病Ⅱ型。

3. 入院治疗过程及随访

入院后给予抗感染及对症治疗，未再咳嗽，患儿家属放弃进一步治疗，住院8 d后要求出院。院外随访，患儿出现运动、智力进行性减退、惊厥发作和喂养困难，16月龄时因喂养时呛咳、窒息死亡。

二、分子遗传学分析

基因测序显示，患儿GBA基因存在2个复合杂合性突变：c.680_681delATinsGG（p.N227R）和c.1448T > C（p.L483P）。其中位于第6外显子的c.680_681delATinsGG，使第227位密码子AAT变为AGG，导致正常的天冬酰胺（N）变为精氨酸（R），即 p.N227R错义突变;位于第10外显子的c.1448T > C突变，使第483位密码子CCT变为CCC，导致正常的赖氨酸（L）变为脯氨酸（P），即p.L483P（图1）。其中，c.680_681GG突变来自父亲，父亲为该突变的杂合子。克隆测序验证了患儿和父亲的c.680_681位点有2种单倍型：突变的GG和正常的AT（图2）。患儿的c.1448T > C突变来自母亲，母亲为该突变的杂合子。该突变在此家系中的传递符合孟德尔遗传规律，遗传方式符合常染色体隐性遗传病的特征。

三、罕见突变相关的文献检索

c.680_681delATinsGG的dbSNP数据库编号为rs786200979;ClinVar数据库显示其为可能致病性突变 （likely pathogenic），审查状态为1星突变（基于单个提出注释功能的研究成果）。通过查询该突变的提交信息，提示该变异为临床检测中发现的生殖系突变杂合子，但被检测者的患病状态不详（http：//www.egl-eurofins.com/emvclass/emvclass.

php？approved_symbol=GBA）。在HGMD、ESP6500、ExAC和1000genomics数据库均未检索到该突变。在PubMed数据库检索到1例临床确诊的戈谢病Ⅱ型中国患儿，该患儿的基因型与本例患儿的基因型完全相同，其主要临床表现为肝脾肿大、斜视、惊厥发作和生长发育迟缓等，于12月龄时死亡[10]。因此，c.680_681delATinsGG突变在患者组的频率明显大于健康人群。

四、本例患儿罕见突变的致病性鉴定

PROVEAN 、SIFT 和MutationTaster对c.680_ 681delATinsGG突变的预测结果分别为“有害的（deleterious）”“破坏性的（damaging）”和“致病性突变（disease causing）”。在HGMD、ClinVar以及PubMed等数据库检索发现，该突变同一氨基酸位置还存在另外3种不同的突变，分别为p.N227S （c.680A > G） 、p.N227I （c.680A > T） 和p.N227K （c.681T > G）突变，上述突变已证实是致病性突变。在患儿的复合杂合性突变中，另一突变c.1448T > C（p.L483P）已明确是致病性突变。

根据ACMG/AMP变异分类指南，GBA c.680_681delATinsGG突变满足以下条件：PS4，突变在患者组的频率明显大于健康人群;PM2，即在ESP6500、1000genomics和 ExAC数据库中的等位基因频率为0，对于隐性遗传的突变频率允许为低频;PM3，即对于隐性遗传的突变，先证者检出复合杂合突变，与其组成复合杂合的另一突变致病性已明确;PM5，即错义突变所在的同一位置存在其他不同氨基酸变化的致病性突变，该突变便存在PM5证据;PP3，多项计算机模拟计算预测有害;PP4，突变相关的疾病与患者的临床表型高度吻合。c.680_681delATinsGG突变满足：1个PS 证据、3个PM证据及2个PP证据，该变异分类为“致病性的（pathogenic）”。

GBA基因的c.680_681delATinsGG和c.1448T > C复合杂合性突变是本例戈谢病Ⅱ型患儿的致病原因。

讨论

戈谢病Ⅱ型是戈谢病中最少见的类型，也称“急性神经病变型”，除有贫血、肝脾肿大、骨骼损害等广泛且严重的脏器受累外，还有严重的神经系统受累症状，如颈项强直、眼科损伤（如斜视和眼球运动不能）、吞咽困难、喉喘鸣、惊厥和癫痫发作等。患儿多在 1 岁以内发病，病情进展迅速，多于2岁前死亡。本例患儿3月龄时开始出现呼吸道受累症状，5月龄时出现消化道受累症状，10月龄时已有明显的肝脾肿大、贫血、生长发育迟缓等;同时有严重的神經系统受累症状，病情进展迅速，于16月龄因喂养时呛咳、窒息死亡。其β-葡萄糖苷酶活性极低，诊断为戈谢病Ⅱ型。

戈谢病常由GBA基因突变引起。GBA 基因位于1q21，全长跨度约7.6 kb，cDNA全长2564 bp，包含11个外显子，编码多肽链长度为497个氨基酸。GBA下游16 kb处有1个高度同源的假基因GBAP，易与GBA 基因发生同源重组导致序列的缺失或插入而致病[17-18]。在编码区，GBA和GBAP的同源性达96%以上;在内含子8和3非翻译区之间的区域，两者同源性增加到98%左右;GBAP在外显子9中缺少55 bp的片段，这是2个序列之间的主要外显子差异。目前国际上报道的 GBA 突变约 581 种，突变主要类型为错义突变，占75 %以上;其余突变依次为小片段缺失、剪接突变、基因重组、小片段插入、大片段的缺失或插入等。其中大部分突变在各群体中散在分布，但部分常见突变的分布具有群体差异性。在Ashkenazi犹太人中，最常见的突变是c.1226A > G（p.N419S），其次为c.84-85ins G、c.1448T > C（p.L483P）、c.115+1G > A（IVS2+1G > A）。上述4种突变类型约占该群体戈谢病总突变类型的96%[4]。c.1226A > G（p.N419S）和c.1448T > C（p.L483P）是非Ashkenazi高加索人群最常见的突变，占该群体戈谢病总突变类型的62% [4]。相反， c.1226A > G（p.N419S）突变在亚洲人群中少见。中国戈谢病患者GBA突变最常见的类型为c.1448T > C（p.L483P），占中国总突变类型的33% ～ 52.6%[8-13]。本例患儿存在复合杂合性突变，其中1个等位基因突变为c.1448T > C（p.L483P），验证了c.1448T > C（p.L483P）是中国人最常见的戈谢病突变类型的观点，另一等位基因突变c.680_681delATinsGG（p.N227R）为罕见突变，尚未有研究对该突变进行致病性鉴定。根据ACMG/AMP指南，该变异分类为“致病性的”。除了c.680_681delATinsGG（p.N227R）突变外，p.227位置还存在另外3种不同的核苷酸变化，p.N227S （c.680A > G）、p.N227I （c.680A > T） 和p.N227K （c.681T > G）突变，表明c.680和c.681位点为突变热点[19-20]。值得注意的是，Martínez-Arias 等[17]检测了世界上多种人群的100条染色体，发现对应于GBA基因第227位密码子（AAT）的后2个核苷酸（c.680-681，AT），GBAP基因的主要单体型为GG（占66%，与本例的突变型相同），次要单体型为AG（占34%）。作者认为，当在GBA基因中检测到p.N227R 突变（即c.680_681delATinsGG），应考虑GBA与GBAP基因间是否存在重组。本文采用的PCR扩增方法为巢式PCR扩增，避免了GBAP基因的扩增，同时整个GBA基因序列未发现其他重组突变位点，排除了基因重组的可能[9，14]。

戈谢病的基因型与表型的相关性十分复杂。研究表明，部分基因型与临床表型谱有一定的相关性，对判断疾病的分型和预后具有一定的指导作用。比如c.1226A > G（p.N419S）突变与较温和的表型相关，或能阻止患者出现神经系统损害。c.1226A > G杂合子个体仅仅表现为戈谢病Ⅰ型;纯合子个体甚至无任何症状[4]。另一方面，c.1342G  > C （p.D448H） 突变与戈谢病Ⅲ型中的亚型有关，症状包括心脏瓣膜钙化或纤维化、角膜混浊和脑积水等[21]。而c.1448T > C（p.L483P）突变与严重表型相关：纯合子个体可表现为不同严重程度的神经型或严重的Ⅰ型;复合杂合子个体的表型与携带的另一等位基因有关，如重组突变RecNciI与严重表型相关，故c.1448T > C / RecNciI基因型与神经型戈谢病有关[8-10]。包括本文在内的2例基因型为c.680_681delATinsGG/c.1448T > C的患儿均为戈谢病Ⅱ型，表明c.680_681delATinsGG与严重表型相关[10]。尽管存在这些突变的特异临床表型谱，但大多数突变可以出现在各种戈谢病类型中，而且相同基因型的戈谢病患者可表现出很强的临床表型异质性。由于戈谢病为常染色体隐性遗传病，大多数患者为复合杂合性突变，有些突变在特定的家系中可能是独特的，因此，很难从基因型准确预测复合杂合子的表型。影响戈谢病表型的因素很多，包括环境因素、遗传背景以及各种修饰基因等[22]。识别这些重要表型的影响因素有助于最终揭开基因型和表型之间的复杂关系，并将改善戈谢病的治疗效果。

目前针对戈谢病的特异性治疗包括酶替代疗法、底物减少疗法、造血干细胞移植、分子伴侣治疗法、基因治疗和纳米囊泡等[23-24] 。其中戈谢病Ⅰ型和部分Ⅲ型有可用的药物，但存在治疗费用极其昂贵、需终生使用和部分患者存在免疫反应等缺点，戈谢病Ⅱ型尚无有效治疗方法。因此，遗传携带者的检出、症状前诊断、产前诊断及胚胎种植前诊断，对于戈谢病的早期治疗及防止戈谢病重症患儿的出生有着极其重要的意义。

参 考 文 献

[1] Riboldi G M， Di Fonzo A B. GBA， Gaucher disease， and Parkinsons disease： from genetic to clinic to new therapeutic approaches. Cells，2019，8（4）：364.

[2] 韩冰，陈苗，杨辰.戈谢病多学科诊疗专家共识. 协和医学杂志， 2020，11（6）：682-697.

[3] 中华医学会血液学分会红细胞疾病（贫血）学组. 中国成人戈谢病诊治专家共识（2020）. 中华医学杂志，2020，100（24）： 1841-1849.

[4] Nalysnyk L， Rotella P， Simeone J C， Hamed A， Weinreb N. Gaucher disease epidemiology and natural history： a comprehensive review of the literature. Hematology，2017，22 （2）：65-73.

[5] Zimran A， Belmatoug N， Bembi B， Deegan P， Elstein D， Fernandez-Sasso D， Giraldo P， Goker-Alpan O， Lau H， Lukina E， Panahloo Z， Schwartz I V D; GOS Study group. Demographics and patient characteristics of 1209 patients with Gaucher disease： descriptive analysis from the Gaucher Outcome Survey （GOS）. Am J Hematol，2018，93（2）：205-212.

[6] Liao H C， Chiang C C， Niu D M， Wang C H， Kao S M， Tsai F J， Huang Y H， Liu H C， Huang C K， Gao H J， Yang C F， Chan M J， Lin W D， Chen Y J. Detecting multiple lysosomal storage diseases by tandem mass spectrometry-a national newborn screening program in Taiwan. Clin Chim Acta，2014，431：80-86.

[7] Kang L， Zhan X， Gu X， Zhang H. Successful newborn screening for Gaucher disease using fluorometric assay in China. J Hum Genet，2017，62（8）：763-768.

[8] 张为民，邓亮生，孟岩，姚凤霞，邱正庆，段彦龙，黄尚志，施惠平.中國人戈谢病基因突变的分析.中华医学杂志，2009，89（48）：3397-3400.

[9] Feng Y， Huang Y， Tang C， Hu H， Zhao X， Sheng H， Zhang W， Tan M， Xie T， Zheng J， Liu Z， Su X， Shao Y， Li X， Cheng J， Mao X， Liu L. Clinical and molecular characteristics of patients with Gaucher disease in Southern China. Blood Cells Mol Dis，2018，68：30-34.

[10] Kang L， Wang Y， Gao X， Qiu W， Ye J， Han L， Gu X， Zhang H. Genotypes and phenotypes in 20 Chinese patients with type 2 Gaucher disease. Brain Dev，2018，40（10）：876-883.

[11] 庄超，梁卉. 婴儿戈谢病一例. 新医学， 2016，47 （5）：343-345.

[12] 孙芳，鲁伟，朱敏，杨艳玲，许鹏飞.GBA基因复合杂合型突变导致罕见戈谢病Ⅱ型患儿1例. 中国科学：生命科学， 2018， 48（10）：1093-1100.

[13] 和宁辛，张文乾，张继要，董伟，罗强，王浩，赵亚梅.戈谢病三家系GBA基因突变分析.临床儿科杂志， 2018， 36（6）：459-462.

[14] Koprivica V， Stone D L， Park J K， Callahan M， Frisch A， Cohen I J， Tayebi N， Sidransky E. Analysis and classification of 304 mutant alleles in patients with type 1 and type 3 Gaucher disease. Am J Hum Genet，2000，66（6）：1777-1786.

[15] den Dunnen J T， Dalgleish R， Maglott D R， Hart R K， Greenblatt M S， McGowan-Jordan J， Roux A F， Smith T， Antonarakis S E， Taschner P E. HGVS Recommendations for the Description of Sequence Variants： 2016 Update. Hum Mutat，2016，37（6）：564-569.

[16] Richards S， Aziz N， Bale S， Bick D， Das S， Gastier-Foster J， Grody W W， Hegde M， Lyon E， Spector E， Voelkerding K， Rehm H L; ACMG Laboratory Quality Assurance Committee. Standards and guidelines for the interpretation of sequence variants： a joint consensus recommendation of the American College of Medical Genetics and Genomics and the Association for Molecular Pathology. Genet Med，2015，17（5）：405-424.

[17] Martínez-Arias R， Comas D， Mateu E， Bertranpetit J. Glucocerebrosidase pseudogene variation and Gaucher disease： recognizing pseudogene tracts in GBA alleles. Hum Mutat，2001，17（3）：191-198.

[18] Woo E G， Tayebi N， Sidransky E. Next-Generation Sequencing Analysis of GBA1： the challenge of detecting complex recombinant alleles. Front Genet，2021，12：684067.

[19] Mechtler T P， Stary S， Metz T F， De Jesús V R， Greber-Platzer S， Pollak A， Herkner K R， Streubel B， Kasper D C. Neonatal screening for lysosomal storage disorders： feasibility and incidence from a nationwide study in Austria. Lancet，2012，379（9813）：335-341.

[20] Germain D P， Puech J P， Caillaud C， Kahn A， Poenaru L. Exhaustive screening of the acid beta-glucosidase gene， by fluorescence-assisted mismatch analysis using universal primers： mutation profile and genotype/phenotype correlations in Gaucher disease. Am J Hum Genet，1998，63（2）：415-427.

[21] Kurolap A， Del Toro M， Spiegel R， Gutstein A， Shafir G， Cohen I J， Barrabés J A， Feldman H B. Gaucher disease type 3c： new patients with unique presentations and review of the literature. Mol Genet Metab，2019，127（2）：138-146.

[22] Goker-Alpan O， Hruska K S， Orvisky E， Kishnani P S， Stubblefield B K， Schiffmann R， Sidransky E. Divergent phenotypes in Gaucher disease implicate the role of modifiers. J Med Genet，2005，42（6）：e37.

[23] Menozzi E， Schapira A H V. Exploring the genotype-phenotype correlation in GBA-Parkinson disease： clinical aspects， biomarkers， and potential modifiers. Front Neurol，2021，12：694764.

[24] Sam R， Ryan E， Daykin E， Sidransky E. Current and emerging pharmacotherapy for Gaucher disease in pediatric populations. Expert Opin Pharmacother，2021 ，22（11）：1489-1503.

（收稿日期：2021-07-22）

（本文編辑：洪悦民）