载脂蛋白E基因多态性对冠心病患者血脂水平的影响研究

杨 立，陈 葳

(1.西安交通大学，陕西 西安 710049;2.西安交通大学第一附属医院检验科，陕西 西安 710061)

冠状动脉粥样硬化性心脏病简称冠心病，是指冠状动脉粥样硬化使血管腔狭窄或阻塞，或(和)因冠状动脉功能性改变(痉挛)导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病[1]。冠心病的致病因素也包括遗传基因和环境因素[2]。随着分子生物学技术的发展，冠心病相关遗传因素的研究越来越深入，其中载脂蛋白E(ApoE)基因多态性对脂质代谢有很大的影响[3]。ApoE是一种糖蛋白，包括299个氨基酸。相关研究发现，ApoE很有可能是亚洲人发生冠心病的易患基因[4]。ApoE基因位于第19号染色体长臂13区2带(19q13.2)上，含有4个外显子和3个内含子。ApoE基因有3个等位基因，即E2、E3和E4，共构成6种不同的基因型：3种纯合型(E2/E2、E3/E3、E4/E4)和3种杂合型(E3/E4、E2/E3、E2/E4)[5-6]。ApoE基因型由基因上2个单核苷酸多态性位点决定，即112位氨基酸的碱基(c.388T>C)和158位氨基酸的碱基(c.526T>C)，其依据112和158位氨基酸的不同组合，形成不同的基因型。本研究探讨了ApoE基因多态性对冠心病患者血脂水平的影响。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1—6月西安交通大学第一附属医院收治的1 144例冠心病患者，其中男752例(65.7%)，女392例(34.3%)，年龄25～93岁。

1.2方法

1.2.1ApoE基因检测 利用珠海赛乐奇公司生产的核酸提取或纯化试剂对非肝素抗凝管采集的至少400 uL全血进行样本处理，然后利用聚合酶链式反应(PCR)扩增仪进行目的片段的PCR扩增，最后利用基因芯片摄像仪对结果进行判读。

1.2.2血脂水平检测 晨起空腹采血3 mL，3 000 r/min离心10 min后取上清，利用全自动生化分析仪对总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、ApoE及脂蛋白a[Lp(a)] 进行检测。

2 结 果

2.1ApoE基因型及等位基因分布情况 在ApoE基因型中，E3/E3型占比最多，E4/E4型占比最少；在ApoE表现型中，E3型占比最多，E2型占比最少。见表1。

表1 ApoE基因型及等位基因分布情况(n=1 144)

2.2不同ApoE基因型冠心病患者血脂水平比较 不同ApoE基因型冠心病患者TC、TG、ApoE、LDL水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而Lp(a)水平比较，差异无统计学意义(P=0.056)。其中，E2/E2型冠心病患者ApoE、TG水平高于其他基因型冠心病患者，而E4/E4基因型冠心病患者TC、LDL、Lp(a)水平高于其他基因型冠心病患者。见表2。

表2 不同ApoE基因型冠心病患者血脂水平比较

2.3不同ApoE表现型冠心病患者血脂水平比较 不同ApoE表现型冠心病患者TC、TG、ApoE、LDL水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而Lp(a)水平比较，差异无统计学意义(P=0.167)。其中，E2型冠心病患者ApoE、TG水平高于其他表现型冠心病患者，而E4型冠心病患者TC、LDL、Lp(a)水平高于其他表现型冠心病患者。见表3。

表3 不同ApoE表现型冠心病患者血脂水平比较

3 讨 论

ApoE作为人体非常重要的载脂蛋白之一，其主要在肝脏和脑组织中合成，在其他组织如单核细胞(含巨噬细胞)中也有合成能力。ApoE是LDL受体的配体，也是肝细胞乳糜微粒(CM)残粒受体的配体，可介导清除血浆中的CM和低密度脂蛋白，在TG和TC的代谢中发挥关键作用[7]。ApoE基因型和表现型可影响冠心病患者血脂水平，因此ApoE基因在冠心病易感性中占据重要地位。ApoE基因型和表现型检测对于冠心病的早期预防、诊断及预后均有重要的指导意义，同时治疗冠心病的他汀类药物也因不同基因型患者而存在个体差异性。有研究发现，瑞舒伐他汀的疗效与ApoE基因多态性有关，其对E2型冠心病患者的疗效最好，其次为E3型，E4型最差[8-9]。因此，ApoE基因型和表现型检测在不同基因型冠心病患者的临床用药上起到了非常重要的作用。本研究结果显示，在ApoE基因型中，E3/E3型占比最多，E4/E4型占比最少；在ApoE表现型中，E3型占比最多，E2型占比最少，与文献[10-11]结论基本一致。

本研究结果显示，E2/E2、E2型冠心病患者TG水平明显高于其他基因型和表现型冠心病患者。这是由于ApoE异构体与LDL受体结合能力不同。ApoE2与LDL受体结合能力最低，导致TG水平升高；而ApoE4与LDL受体的结合能力较强，导致TC和LDL水平升高，而对TG水平影响不大[12]。本研究结果显示，E2型冠心病患者TC和LDL水平最低，而E4型冠心病患者TC和LDL水平最高。提示E2型对冠心病的发生和发展中具有一定保护作用，而E4型则可能会加剧冠心病的发生、发展[13-14]。本研究结果显示，不同ApoE基因型和表现型冠心病患者Lp(a)水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，但E4型冠心病患者Lp(a)水平高于其他表现型冠心病患者。高水平Lp(a)是公认的致动脉粥样硬化的独立危险因素，其可竞争性与纤溶酶原受体结合,而抑制纤溶酶原转化为纤溶酶,导致机体纤溶能力下降,加重动脉粥样硬化,进而引起血栓形成，其对冠心病的转归有预后价值[15]。

综上所述，ApoE基因多态性与冠心病患者血脂水平具有一定相关性，对冠心病的发生、发展及患者预后有重要影响，其中，E2型为保护型，对冠心病的发生、发展有正面保护作用；E3型为野生型；E4为高危型，对冠心病的发生、发展有负面影响。在临床应用中，ApoE基因检测可在基因层面上指导冠心病的早期鉴别和诊断，有助于冠心病的早发现、早治疗。ApoE基因检测联合血脂水平监测，对冠心病发展和预后具有一定指导意义。本研究不足之处是没有关注不同ApoE基因型冠心病患者用药差异。