缺血性脑卒中患者血清Lp-PLA2和Cys-C的表达与其认知功能变化的相关性分析 ①

何淼红

(南方医科大学附属花都医院(广州市花都区人民医院)急诊科， 广东 广州 510000)

缺血性脑卒中(Ischemic stroke ,IS)又称脑梗死，具致残率和病死率高的特点，其病理机制为动脉粥样硬化(therosclerosis，AS)致使脑部血液供应障碍而病发IS[1]。IS发生后局部组织血供障碍引发组织缺氧、缺血坏死，继发引起神经系统炎症水平升高，而IS又具病发迅猛和突然特点，患者常难以及时行溶栓治疗干预，以致高炎症反应持续损伤神经系统功能[2]。卒中后认知功能障碍(post-stroke cognitive impairment，PSCI)是IS最常见并发症之一。研究显示[3]，约33%PSCI患者病情可进行性发展至痴呆。然而临床针对PSCI尚无特异性治疗方案，早期的预防和及时阻断病情发展十分重要。神经系统的炎症反应学说被认为是PSCI发生的重要病理机制，但其具体分子机制尚未明确。脂蛋白相关磷脂酶 A2(lipoprotein associated-phospholipase A2,Lp-PLA2)是特异性的炎症标志物，可通过调节氧化磷脂类物质的水解而促进炎症水平升高[4]。血清胱抑素c(cystatin C.CysC)是调节动脉内膜下细胞外基质降解和沉积的重要细胞因子，其可通过下调内源性半胱氨酸蛋白酶活性参与到斑块和动脉粥样硬化形成的炎症反应环节[5]。但现阶段国内尚缺乏Lp-PLA2和CysC联合检测对评估IS患者认知功能下降相关报道。基于此背景，本研究拟以缺血性脑卒中患者为研究对象，探索卒中后发生和未发生认知功能障碍患者血清Lp-PLA2和Cys-C的表达差异，旨在明确二者联合检测在临床评估预测卒中患者罹患认知功能障碍风险的临床价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

对我院2018-07～2020-08我院收治的缺血性脑卒中患者120例，参考《美国精神障碍诊断与统计手册》[6]第V版(DSM-V)相关诊断标准将入组患者分为痴呆组20例和非痴呆组100例，并采用MoCA评分进一步将非痴呆组分为认知功能正常组51例和认知功能障碍组49例。纳入标准：①符合中华医学会缺血性脑卒中相关诊断标准[7]；②临床及生化检查资料完整者；③经MRI或其他影像学手段确诊；④其他实质性脏器功能无异常，且年龄>60岁者；⑤发病时间距离就诊或人院14d内；⑥患者或家属自愿签署知情同意书。排除标准：①严重的心、肝、肾、血液系统疾病；②由心脏疾病或动脉夹层等诱发脑卒中；③合并有急性冠脉综合征或周围血管性疾病；④既往有认知功能障碍病史者；⑤伴抑郁、精神分裂、躁狂症等精神疾病。本次研究所纳入病例经我院伦理委员会批准。

1.2 方法1.2.1 临床资料采集

患者入组后，采集年龄、性别、BMI、吸烟、饮酒、高血压、教育水平、糖尿病、冠心病和高脂血症等。采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)[8]评分对患者神经功能状态进行评价。

1.2.2 血清检测

于患者入院后次日清晨采集空腹(6h)外周静脉血5mL，经3000r/min低速离心后分离上清液，置入-80℃冰箱待测。检测采用电化学发光法检测Cys-C水平,酶联免疫吸附法检测Lp-PLA2水平。

1.2.3 认知功能障碍评定

采用简易智能状态检查量表(MMSE)[9]和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)[10]对患者认知功能进行评定。其中MMSE评分包括视空间、延迟记忆、计算力及注意力、即刻记忆、地点定向力、定向力和语言，该量表满分30，判断标准为MMSE评分≤17分(文盲)、20分(小学受教育程度)和24分(初中及以上受教育程度)即刻视为认知功能障碍。MoCA评分包含定向力、计算、抽象思维、视结构技能、语言、记忆、执行功能及注意与集中等检测项目，满分30分，以26为分界线，<26分即可视为认知功能障碍，>26分既可视为认知功能正常。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 三组受试者一般资料比较

三组受试者一般资料比较，见表1。

表1 三组受试者一般资料比较

2.2 三组血清Lp-PLA2和Cys-C表达水平比较

痴呆组血清Lp-PLA2和Cys-C水平显著高于正常组和认知功能障碍组(P<0.05)，且认知功能障碍组显著高于正常组(P<0.05)；见表2。

表2 三组血清Lp-PLA2和Cys-C表达水平比较

2.3 血清Lp-PLA2和Cys-C表达的相关性分析

血清Lp-PLA2和Cys-C的表达与NIHSS评分、颈动脉狭窄情况、梗死部位、MoCA评分、MMSE评分和年龄显著相关(P<0.05)，而与受教育程度、BMI、糖尿病、高血压和高血脂无关(P>0.05)；见表3。

表3 血清Lp-PLA2和Cys-C表达的相关性分析

2.4 缺血性脑卒中患者认知功能障碍的logistics回归分析

以缺血性脑卒中患者认知功能为因变量纳入logistics回归分析，单因素分析结果显示， NIHSS评分、颈动脉狭窄情况、梗死部位、糖尿病、高血压、MoCA评分、MMSE评分、高血脂和年龄为危险因素，多因素结果显示，NIHSS评分、颈动脉狭窄情况、MoCA评分和MMSE评分为独立危险因素，见表4。

表4 缺血性脑卒中患者认知功能障碍的logistics回归分析

3 讨论

脑卒中后认知功能下降发生率较高，约70%患者出现不同程度认知功能降低。丘脑、基底节、额叶和白质损伤是PSCI发生的重要病理生理学机制，炎症因子的过度释放被认为是引发这一个过程的重要因素。卒中后炎症反应的持续激活释放的神经毒性和神经损伤作用累及脑组织，致使局部组织脑白质受损进而引起认知功能障碍[11]。胡维维等[12]研究证实，老年缺血性脑卒中患者认知功能的下降程度与其炎症反应水平密切相关。高满满等[13]报道显示，炎性介质是预测评估缺血性脑卒中患者认知功能下降的可靠指标。重要的是动物实验证实，脑组织缺血后认知功能受损与β-淀粉样蛋白的过表达密切相关。刘菡等[14]研究发现，注射Aβ毒性片段后卒中大鼠的神经免疫炎症被显著激活，而其远期认知功能明显更差。这均表明卒中后组织缺血、缺氧产生的外源性刺激，使局部炎症反应被激活，而炎症因子的过表达进而累及脑组织引发丘脑、基底节和额叶等发生病理改变，进而表现为PSCI。然而卒中后炎症反应的激活受复杂因子网络调控，现阶段，对其具体分子机制仍尚未明确。故进一步明确PSCI的发生、发展机制为后续临床早期预测评估提供新思路意义重大。

Lp-PLA2是特异性的血管炎性标志物由巨噬细胞和淋巴细胞分泌，其分子量为45kD，与血管炎性反应、不稳定斑块形成和动脉粥样硬化的基础病理发生和发展十分相关[15]。重要的是粥样硬化性斑块的脱落和破裂是导致脑组织炎症反应进一步升高的重要诱因，而Lp-PLA2作为血管斑块水解酶，可直接作用于脆弱斑块的脱落和破裂。邓小莹等[16]证实，Lp-PLA2预测IS后认知功能障碍的敏感度和特异度分别为58.3%和86.4%。提示在卒中后认知功能改变的基础病理发展中Lp-PLA2可能扮演了尤为重要的角色。Cys-C是半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员，其相对分子量较小，可通过与半胱氨酸蛋白酶结合使下游溶酶体内组织蛋白酶活性降低。赵宇等[17]证实，血清Cys-C的过表达与认知障碍密切相关。本次实验结果显示，痴呆组血清Lp-PLA2和Cys-C水平显著高于认知障碍组和正常组，认知障碍组显著高于对照组，提示随着认知障碍病情的恶化血清Lp-PLA2和Cys-C的表达亦随之上调。考虑丘脑、基底节和额叶白质的损伤加重是认知功能持续下降的重要病理机制，而卒中发生后早期组织炎症反应被激活Lp-PLA2和Cys-C的表达亦随之上调，过表达的Lp-PLA2可通过水解ox-LDL激活溶血卵磷脂和氧化型游离脂肪酸的分泌，而后两者的表达上调可介导细胞因子和粘附因子活化，进而使巨噬细胞向促进炎症反应的M1表型转化。盛昌宏等[18]研究发现，血清Lp-PLA2的表达与急性心脑血管疾病患者血管炎症的严重程度密切相关。张浩等[19]亦证实，冠状动脉疾病的严重程度与血清Lp-PLA2的表达密切相关。而Cys-C的表达上调可直接损伤血管壁，使血管动脉粥样硬化病情恶化。李土明等[20]证实，脑微出血越严重血清胱抑素C水平越高，相应认知障碍亦越严重。Pearson相关性分析发现，血清Lp-PLA2和Cys-C的表达与NIHSS评分、颈动脉狭窄情况、梗死部位、MoCA评分、MMSE评分和年龄显著相关。表明血清Lp-PLA2和Cys-C均参与了IS后认知功能改变的病理发展。进一步以认知功能为因变量纳入logistics回归模型，多因素结果显示，NIHSS评分、颈动脉狭窄情况、MoCA评分和MMSE评分为独立危险因素，考虑动脉粥样硬化或狭窄是诱发IS的重要因素，血管炎症反应的持续被激活是粥样硬化的重要病理机制，而IS病发后局部组织缺氧、缺血使神经炎性进一步被激活并由罪犯血管处累及至各脑区域，高神经炎症反应易损伤丘脑、额叶等认知功能重要组织，而Lp-PLA2、Cys-C的表达伴随了这一过程的发生和发展，证实IS后认知功能改变与血清Lp-PLA2和Cys-C的表达密切相关，亦明确了临床早期可通过联合监测患者二者表达情况作为预测评估其认知功能状况的可靠指标。

综上所述，缺血性脑卒中患者血清Lp-PLA2和Cys-C的表达与其认知功能损伤密切相关，可作为评估其认知功能状态的可靠血清标志物。