荆防感冒口服液的制备及研究

陈景坚，罗 瑜，李学明

(韶关市中医院，广东 韶关 512000)

近年来，随着中医学的快速发展，制备安全有效且质量可控的抗流行性感冒口服中药制剂成为医学领域的一大研究重点。荆防感冒口服液由防风、黄芩、柴胡等诸多中药材组成，有平喘化痰、辛温祛湿、疏风化表以及镇痛等功效，可用于治疗流行性感冒症状。为确保该口服液的安全性有效性，从制备工艺的角度入手展开分析。

1 仪器和方法

1.1 仪器

在此次研究中，采用的仪器主要包括由日本岛津提供的高效液相色谱仪LC-2010AHT和分析天平AUV220D，由上海奥谱乐仪器有限公司提供的756紫外-可见分光光度计，以及由广东固特超声股份有限公司提供的超声仪KMH-100U等。

1.2 处方

荆防感冒口服液的组方为甘草6g，金银花、茯苓各15g，防风、黄芩、柴胡、荆芥、桔梗、前胡、薄荷各10g，连翘12g，南板蓝根30g[1]。

1.3 制备工艺

利用多功能提取炉，将处方中的药材在其中浸泡2h。浸泡完成后，在水蒸气加热下，进行煎煮，2次冷凝回流后收集由其产生的乳浊液和挥发油。其中，第一次进行水煎时，时间为2h，药材量是原药材量的8倍；在第二次进行水煎时，时间为2.5h，药量是原药材量的6.5倍。在此基础上，将2次水煎液进行过滤，浓缩，直至比重为0.9后，加入乙醇，沉淀静置，静置时间为4h-6h。在完成上述操作后，取上清液，过滤，将乙醇回收，直至比重达到1.05。在挥发油-环胡精的比例为1∶8下，称取环胡精，并在蒸馏水的作用下研磨、加热成糊状，然后加入乳浊液、挥发油，搅拌5h，并加入适量的蜂蜜、蔗糖等，灌封，以完成制备。

2 结果

2.1 防风溶液的制备

在制备防风供试品溶液时，选取10mL该制剂样品，在加入15mL的乙醚后，经2次萃取，将水层取出，将正丁醇加入其中，进行2次提取，合并溶液后，在其中加入40mL的氨试剂，然后将上层溶液保留，蒸发，选取1mL甲醇溶解残留物，完成供试品溶液的制备。阴性对照品溶液为缺少防风的该口服液，制备方法同上。在制备对照药材溶液时，选取1g防风，在其中加入20mL丙酮，经20min超声处理后，将药渣滤除，在1mL甲醇中溶解残留物，完成对照药材溶液的制备。对照品溶液制备的过程中，采用甲醇配制成含1g 5-O-甲基维斯阿米醇苷和1g升麻素苷的混合溶液。

在TLC法下，取8μL供试品溶液，2μL其他溶液，通过观察同一硅胶G薄层板，在展开剂下展开、取出，晾干后，在紫外灯下进行检视。显示在于对照药材和对照品相应位置呈现出的颜色相同的荧光斑点，并且阴性无干扰。

2.2 黄芩苷溶液的制备

黄芩苷溶液制备时，1mL样品+2mL乙醇(75%)，经摇匀以完成制备。阴性对照溶液是选取缺少黄芩的该口服液，方法同上。对照药材溶液制备的过程中，1g黄芩+30mL甲醇—乙醇乙酯(1∶3)，提取、过滤，蒸干，然后采用5mL的甲醇进行溶解。在制备对照品溶液的过程中，采用乙醇配制含0.1mg黄芩苷的溶液。在TLC法下，展开剂为醋酸，显示出在相应位置上呈现的颜色相同的斑点，并且阴性不受到干扰。

在制备黄芩素、汉黄芩素溶液时，供试品溶液制备的过程中，20mL制剂样品+20mL乙酸乙醇，经2次提取，然后进行溶液合并，蒸发，采用2mL的乙醇将残留物溶解，完成供试品溶液的制备。阴性对照溶液与对照药材溶液制备的方法同黄芩苷对应溶液的制备方法。对照品溶液制备的过程中，采用甲醇配制成含0.5mg的黄芩素、汉黄芩素。在TLC法下，显示出在相应位置上呈现的颜色相同的斑点，并且阴性无干扰。

2.3 柴胡溶液的制备

在制备柴胡供试品溶液时，20mL样品+25mL正丁醇，2次提取后，在50mL的氨试液下进行洗涤，然后再次加入正丁醇，蒸发，然后采用1mL甲醇将残留物溶解。阴性对照品溶液制备的过程中，选取缺少柴胡的该口服液，制备方法同上。对照药材溶液制备的过程中，0.5g柴胡+20mL乙醇，经10min超声处理，滤除、浓缩，直至5mL，完成制备。在制备对照品溶液的过程中，采用甲醇进行配制，制成含量0.5mg柴胡皂角α对照品的溶液。经TLC法，显示在相应位置处呈现颜色相同的荧光斑点，并且阴性无干扰。

2.4 含量测定

2.4.1色谱条件

在含量测定的过程中，其色谱条件如下：色谱柱：Inertsil ODS-SP(150.00mm×4.60mm，5.00μm);流动相：磷酸—甲醇溶液，比例为57∶43；柱温度：25℃；进样量：10μL；流速：每分钟1.00mL/min；波长：280nm；理论塔板数：≥3000。

2.4.2试品溶液制备

在制备试品溶液时，其中对照品溶液的配制方法为首先称取11.00mg的黄芩苷对照品，然后将其配制为含黄芩苷0.22mg/mL的溶液。在制备供试品溶液时，其方法为取2mL荆防感冒口服液，将其放置在容量瓶中，容量瓶为25mL，在甲醇定容下，20min超声，对于减失质量采用甲醇补足，均匀摇晃后过滤，供试品溶液为续滤液。在制备阴性对照品溶液时，即制备缺少黄芩的阴性对照溶液时，方法同供试品溶液制备方法。

2.4.3稳定性试验

量取同批次荆防感冒口服液各20mL，经计算样品中黄芩苷含量的平均值，显示其为44.35mg/mL,RSD为2.53%。在稳定性试验中，量取供试品溶液10μL，并于0～10h偶数整时(如2h、4h时)进样，并对其峰面积进行测定，经计算显示RSD为0.95%。可见，该方法在含量测定时，其不仅具有较好的重复性，而且具有较高的稳定性。在10h以内，供试品溶液的稳定性均较高。另外，还选取10μL对照品溶液，进样5次，对其峰面积进行测定，经计算显示，RSD为0.48%。可见，采用的仪器其具有较为良好的精密度。

2.4.4试品的线性关系

在对照品溶液中，加入不同质量浓度的黄芩苷对照品溶液，经均匀振动、摇晃并过滤，在规定的色谱条件下展开含量测定。其中，X轴、Y轴分别代表横纵坐标。横、纵坐标分别表示进样量、峰面积积分。最终获得如下线性回归方程：

Y=3.059×10-5-0.0095

其中，r=0.9998。也就是说，在8.80～88.00μg这一范围内，黄芩苷呈良好的线性关系。

2.4.5加样回收率试验

选取同一批次下的荆防感冒口服液共9份，取样量、样品含量分别为1.00mL、2.80mg。在此基础上进行分组，共分为3组，每组3份。然后，在各组中分别加入质量浓度为2.78mg/mL的黄芩苷对照溶液0.80mL、1.00mL、1.20mL。制备加样回收供试品溶液，对峰面积进行测定，对其中的黄芩苷回收率进行计算。经计算显示，其平均回收率为101.62%，RSD为1.12%。如表1所示。

表1 黄芩苷加样回收率试验结果[n(%)]

通过对3批荆防感冒口服液的含量进行测定，进样为10μL时，1、2、3批该口服液对应的黄芩苷含量分别为2.85mg/mL、2.76mg/mL、2.81mg/mL，平均含量为2.81mg/mL，RSD为1.18%。经对该口服液中黄芩苷的含量进行初步测定，其含量最低为2.23mg。

综上所述，在制备荆防感冒口服液时，采用蒸馏法和水煮法进行制备，制备工艺不仅科学，而且合理，同时经定性鉴别和含量测定，这一制备工艺可促使该口服液中的黄芩苷含量达到要求。