饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能及肠道消化酶的影响

2021-11-10王乙茹肖明霞白华毅王春羲钱锦花程志斌

饲料博览 2021年10期

王乙茹，肖明霞，白华毅，赵平，王春羲，钱锦花，屈娥*，程志斌*

（1.达州职业技术学院，四川达州 635001；2.云南农业大学，昆明 650201；3.昆明三正生物科技（集团）有限公司，昆明 650217；4.玉溪农业职业技术学院，云南玉溪 653100）

饲用益生菌是一类能够平衡畜禽肠道菌群、维持肠道健康、增加营养物质消化吸收的安全饲料添加剂，在我国及世界饲料工业“禁抗”过程中发挥了重要作用[1-3]。凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）是产乳酸的芽孢杆菌属益生菌，因良好的耐热性、适合饲料制粒添加，近年来得到行业的广泛关注[4-6]。体内外大量试验表明，凝结芽孢杆菌显著抑制肠道主要有害菌，对维持畜禽肠道健康具有显著效果，是畜禽生产性能改善的作用机制之一[7-9]。此外，已有动物试验显示，饲用凝结芽孢杆菌能够提高畜禽对饲料营养的消化吸收[10-12]；然而，这一作用的原因鲜有报道。据此，本研究通过检测饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道消化酶活性的影响，揭示凝结芽孢杆菌提高肉鸡营养消化吸收、进而改善生长性能的可能机制。

1 材料与方法

1.1 凝结芽孢杆菌制剂

凝结芽孢杆菌制剂（含菌量1×1010cfu·g-1）、土霉素含量为20%的土霉素预混剂，由昆明三正生物科技（集团）有限公司提供。

1.2 试验动物与试验设计

选用1日龄健康AA 肉鸡240 只，按照体重一致原则分成3 个处理组（对照组、抗生素组、凝结芽孢杆菌组）。对照组肉鸡饲喂基础日粮，抗生素组肉鸡饲喂添加1.5 kg·t-1土霉素预混剂的试验饲粮（含土霉素300 g·t-1），凝结芽孢杆菌组肉鸡饲喂添加1 kg·t-1凝结芽孢杆菌制剂的试验饲粮（凝结芽孢杆菌含量为1.0×107cfu·g-1全价配合饲料）。以上每个处理组8个重复，每个重复10只试验鸡。

1.3 试验日粮

参考NRC（1994）营养推荐标准并结合云南省白羽肉鸡养殖情况，试验饲粮组成及营养水平见表1，并于82 ℃制成颗粒料饲喂。为了保障试验的准确性，所有试验饲粮不添加酶制剂、酸化剂、植物提取物等其他功能性饲料添加剂。

表1 试验基础日粮配方及营养水平

1.4 饲养管理

所有试验鸡自由采食、饮水，免疫、消毒、保健程序规范实施。试验在云南农业大学附属鸡场进行，试验周期21 d。

1.5 指标测定

至肉鸡21日龄，测定试验鸡体重、采食量，计算平均日增重、平均日采食量、料重比。随后每个重复随机抽取1 只鸡，宰后取空肠食糜于-20 ℃保存，测定食糜的总蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶活性。3个酶活性的测定采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒。

1.6 统计分析

数据分析采用SPSS 统计软件对处理组间进行单因素方差分析与多重比较，P＜0.05 表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

测定试验肉鸡的生长性能，结果见表2。

表2 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响 U·mg-1

由表2可知，凝结芽孢杆菌组与抗生素组21日龄体重及平均日增重差异不显著（P＞0.05），且两组均显著大于对照组（P＜0.05）。料重比指标，凝结芽孢杆菌组与抗生素组差异不显著（P＞0.05)，且均显著小于对照组（P＜0.05）。

2.2 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡空肠食糜消化酶活性的影响

测定试验肉鸡空肠食糜消化酶活性，结果见表3。

表3 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡空肠食糜消化酶活性的影响

由表3可知，凝结芽孢杆菌组与抗生素组肉鸡空肠食糜蛋白酶及淀粉酶活性差异不显著（P＞0.05），且两组均显著大于对照组（P＜0.05）。脂肪酶活性指标，3个处理组之间差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

本试验结果表明，与饲喂基础饲粮的对照组肉鸡相比，饲喂1×107cfu·g-1凝结芽孢杆菌组肉鸡平均日增重显著增加约8.3%，料重比显著降低。A.T.Hung等[13]试验表明，1～21 d期间饲喂高剂量2.5×107cfu·g-1凝结芽孢杆菌的肉鸡平均日增重比基础饲粮组肉鸡显著增加了7.8%。本试验结果与A.T.Hung 等[13]等报道的结果基本一致。Zhang B.等[10]研究表明，与基础饲粮组肉鸡比，1～21 d 期间饲喂5×106cfu·g-1凝结芽孢杆菌的肉鸡平均日增重显著增加了4.6%，但料重比指标两组之间差异不显著。赵娜等[14]试验显示，1～21 d期间饲喂低剂量3×105cfu·g-1凝结芽孢杆菌的肉鸡平均日增重及料重比指标，与基础饲粮组肉鸡差异均不显著。以上结果表明，凝结芽孢杆菌改善肉鸡生长性能的作用具有剂量效应，这一观点在Wang Y.B.等[15]报道的试验中得以验证。

表2中数据进一步显示，凝结芽孢杆菌组肉鸡生长性能与饲用抗生素组差异不显著。这一结果表明，肉鸡饲喂1×107cfu·g-1较高剂量的凝结芽孢杆菌能够替代抗生素保障肉鸡较好的生长性能。A.T.Hung 等[13]报道，1～21 d 期间饲喂2.5×107cfu·g-1凝结芽孢杆菌的肉鸡平均日增重及料重比指标，与饲喂杆菌肽锌组肉鸡差异不显著。吴正可等[16]最新报道也显示，饲喂凝结芽孢杆菌组肉鸡的生长性能总体与复合抗生素组（金霉素、黄霉素、吉他霉素）肉鸡差异不显著。

3.2 饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡空肠食糜消化酶活性的影响

Li C.L.等[11]研究表明，与基础饲粮组比，凝结芽孢杆菌组肉鸡对饲粮粗蛋白和能量的表观代谢率显著增加。Zhang B.等[10]研究显示，饲用凝结芽孢杆菌显著提高了肉鸡对饲粮氮的利用率。显然，饲料营养物质的利用率提高是凝结芽孢杆菌改善肉鸡生长性能的重要原因，然而这一作用的机制却鲜有试验研究与报道。由于蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多种肠道消化酶是表征畜禽对饲料营养消化利用的关键指标[17]，因此本研究进一步检测了试验肉鸡空肠食糜消化酶活性。

表3结果显示，与基础饲粮组肉鸡比，凝结芽孢杆菌组肉鸡空肠食糜的蛋白酶、淀粉酶活性分别显著增加了13.2%和11.6%；尽管凝结芽孢杆菌组肉鸡空肠食糜的脂肪酶活性也增加了8.7%，但与基础饲粮组肉鸡无显著差异。仅有的一篇试验报道显示[15]，凝结芽孢杆菌能够显著增加42日龄AA 肉鸡十二指肠食糜的蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性，这与本研究结果基本一致。一般而言，肉鸡肠道食糜中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的来源包括二类[17]：其一，内源分泌。主要由胰腺、肠黏膜、胃黏膜等消化器官的细胞分泌[18-19]；其二，外源补充。主要包括饲用酶制剂、微生态制剂等饲料添加剂[20-21]。由于本研究所有饲料没有添加饲用酶制剂，据此推测凝结芽孢杆菌可能具有胞外分泌各类消化酶增强肉鸡对饲料营养物质消化利用的作用。赵丽娜[22]体外培养凝结芽孢杆菌试验显示，凝结芽孢杆菌（菌株编号BC147）培养液中含有蛋白酶、淀粉酶。张韵等[23]通过体外试验也发现，凝结芽孢杆菌（菌株编号BC303）具有胞外分泌蛋白酶和淀粉酶的能力。张维娜[24]体外试验表明，凝结芽孢杆菌（菌株编号JSSW-07）能够同时分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶。以上体外消化酶检测的报道，验证了本研究饲用凝结芽孢杆菌对肉鸡肠道食糜消化酶活性的提高效果，这也与表2饲用凝结芽孢杆菌改善肉鸡料重比的结果相符。