中药汤剂成品质量控制方法回顾与探索*

2021-11-04郭晓帆桂新景王艳丽张璞侯富国王小鹏李海洋李学林刘瑞新

医药导报 2021年11期

郭晓帆，桂新景，，王艳丽，张璞，侯富国，王小鹏，李海洋，李学林，6，7，刘瑞新，6，7

[1.河南中医药大学药学院，郑州 450046；2.河南中医药大学第一附属医院药学部，郑州 450000；3.国家中医药管理局中药制剂三级实验室，郑州 450000；4.河南省中药饮片临床应用现代化工程研究中心，郑州 450000；5.河南省中药临床药学中医药重点实验室(建设单位)，郑州 450000；6.河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心，郑州 450046；7.河南省中药临床评价技术工程实验室，郑州 450000]

中药汤剂是中医治疗疾病的主要手段之一[1]，其成品质量评价作为中药应用于临床前的最后一个检测环节，直接关系到临床疗效与用药安全。随着社会发展，越来越多患者选择更加方便的医院代煎汤剂[2]，中药汤剂的制备趋近于工业化生产，其成品质量控制也受到广泛关注。中药汤剂成品质量控制方法分为快速检验质控(针对患者个人代煎的中药汤剂)和全面质量检验质控(针对批量生产的中药汤剂)。其中批量生产的中药汤剂因组方固定其质控方法可效仿成方制剂，但针对个人代煎的中药汤剂，因“千人千方”、制备周期短、检测时限要求强等多方面的影响，不能简单照搬成方制剂的质控方法，应根据其特点建立适合的方法保障成品质量。

中药汤剂处方组成灵活多变，适应中医辨证施治的原则[3]，多为针对患者具体病情而临时开具，为保障患者及时用药，其制备周期较短，检测时限要求强。因此，为制定符合中药汤剂特点的成品质量控制方法，笔者查阅文献，对近年来中药汤剂成品质量控制方法进行了系统梳理，并总结了笔者所在课题组在中药汤剂成品质量控制方面的探索和实践，包括建立《中药汤剂煎煮规范》团体标准、中药煎药数据库以及中药煎药规则库，研发中药煎药软件，初步建立科学的中药汤剂成品质量控制方法等工作。

1 中药汤剂成品质量控制方法研究回顾

近年来，我国中药汤剂质量控制取得了较大的进步，陆续提出并实践了一系列质量控制方法。目前常见的质量控制指标有整体性状、物性参数、指标成分含量以及微生物限度等，这些指标被单独或共同用于评价中药汤剂成品质量。

1.1基于性状的中药汤剂成品质量评价中药汤剂成品的颜色、气味、煎液得量等是判断其质量的重要指标[4]。①颜色：由多味药组成的中药汤剂，其颜色应根据饮片的固有颜色进行综合判断，其性状应澄明、纯净无杂质、无沉淀物等。房伟[5]在探讨不同煎煮方法对补中益气汤药效的影响时，以煎煮液性状(颜色、沉淀)与其口感、水溶性成分煎出物质量、煎出率以及两组患者治疗效果为指标评价补中益气汤的质量；②气味：应以饮片原有气味而定，应无霉味、馊味等异味。李泽仟[6]在筛选西洋参煎煮最佳工艺时，以西洋参煎煮液的药草味等5个气味，同3种人参皂苷的总含量一起作为指标，用于评价中药汤剂质量；③煎液得量：中药汤剂煎煮一般不进行浓缩，要求得液量应符合常规和医嘱要求，且浓稠适度。张万福[4]提出药渣、药汁色味检查法，即以药渣透烂度、药汁颜色、药汁气味、药汁煎出量为指标，判断中药汤剂成品质量的优劣。

1.2基于物性参数的中药汤剂成品质量评价 pH值、出膏率、转移率、相对密度等物性参数常被作为指标，应用于中药标准汤剂质量评价以及处方工艺优化等研究。郝亚冬等[7]将相对密度、pH值、出膏率、转移率等作为指标，确定了杭白菊标准汤剂质量评价方法。陈天朝等[8]选用物性参数、大分子和小分子化学成分3种指标，探究丹参不同炮制品饮片与其标准汤剂的物性参数及化学成分间的相关性，并预测其标准汤剂的质量，为制定相关质量标准提供了一定参考。周向明等[9]在优选当归补血汤传统煎煮最优工艺时，采用正交设计实验方法，以当归补血汤色谱峰信息、最大吸光度值、相对密度和干浸膏得率为考察指标，对中药汤剂质量进行综合评价。基于上述研究，以物性参数为指标可以客观、科学和有效地判断中药汤剂成品质量。

1.3基于指标成分含量的中药汤剂成品质量评价指标成分是评价中药汤剂成品质量的重要依据，其含量高低直接影响临床疗效[10]。早期主要通过借鉴化学药品与天然药物的质量控制模式，将单味药的定性定量检测方法应用于中药汤剂成品质量控制，主要有薄层色谱法、紫外分光光度法等[11]。然而中药汤剂具有多组分、多途径协调作用的特点，上述方法不能全面真实地反映中药汤剂的整体质量。随着科学技术与医疗水平的提高，目前多指标成分同步质量控制方法已成为中药汤剂成品质量控制的优先方法[12]，如指纹图谱法、一测多评法等。但受“千人千方”的影响，患者个人代煎的中药汤剂不能使用统一的检测条件进行质量评价，故上述方法常被应用于科学研究以及批量生产中药汤剂的成品质量控制。

1.3.1单味药的定性定量检测薄层色谱法是许多国家药典推荐使用的药物杂质以及含量检测方法，是药典中记载最多的物质检验方法之一[13]。郝雨等[14]采用薄层色谱法区分麦冬与山麦冬，从而判定麦冬及含麦冬复方制剂质量。王敏等[15]通过显微鉴别法、薄层色谱法定性鉴别蒙药乌兰三味汤散中的紫草茸等3味药材，采用高效液相色谱法定量测定熊果酸含量，结果表明上述方法准确稳定且重复性好，可用于蒙药乌兰三味汤散的质量控制。

紫外-可见光谱法作为一种传统的光谱分析方法，在中药质量控制领域得到广泛应用[16]。杜胜国等[17]通过紫外-可见分光光度法建立橙皮苷含量测定方法，研究了不同配伍对青皮汤中指标成分含量的影响，可为青皮汤成品质量评价提供依据。王義雯等[18]在探讨熟地黄标准汤剂的质量标准时，采用紫外-可见分光光度法测定总多糖含量，采用高效液相色谱法测定地黄苷D含量，结果表明所建立的质量标准可为熟地黄标准汤剂的质量评价提供参考。

1.3.2多味药的定性定量检测高效液相色谱法在仪器自动化水平上有很大优势，现已成为中药复杂体系研究中强有力的技术支撑，是中药汤剂质量控制中最常用的方法之一[19]，其结合一测多评法可以达到对中药汤剂多成分、多指标同时进行质量控制的目的。招志辉等[20]选用黄芩苷等4种成分为指标，建立“一测多评”高效液相色谱方法进行多指标成分同时测定，并结合抑菌效果评价葛根芩连汤质量。邵金鑫等[21]采用一测多评法对临床常用药对人参-柴胡及其制剂中的人参皂苷等5种皂苷成分进行测定，为含有人参-柴胡的复方中药制剂质量控制方法的建立提供了参考。

中药指纹图谱的整体性、宏观性分析特点较符合中医药传统理论，可鉴别饮片真伪，评价中药汤剂稳定性，是目前中药汤剂质量控制体系中的主流模式之一[22]。成颜芬等[23]建立了15批桃红四物汤中药汤剂的化学指纹图谱及多指标成分含量测定方法，结果表明该方法适用于桃红四物汤复方制剂质量控制与评价。陈蒙等[24]建立了经典名方苓桂术甘汤的高效液相指纹图谱及3种成分含量测定方法，结果表明该方法简便、稳定、准确可靠，可用于苓桂术甘汤物质基准的质量控制。

1.4基于微生物限度的中药汤剂成品质量评价微生物限度不合格容易造成中药汤剂变质，储存时间缩短，对患者健康造成潜在的危害，故微生物限度检查法是评价中药汤剂成品质量不可或缺的方法之一，常与其他检测方法共同使用。薛敏菲等[25]采用微生物限度检查法、薄层色谱法、高效液相色谱法，建立了两煎常压煎药机所制清湿外洗汤的质量控制体系。周敏华等[26]采用高效液相色谱法和微生物限度法，对在不同储存温度及时间下的2种含黄芪中药袋装煎煮液的指标性成分含量以及卫生学进行考察，研究不同条件对补阳还五汤和补中益气汤质量稳定性的影响，结果表明该方法可用于两种袋装中药汤剂的质量评价。微生物限度检查法能够较好反映中药汤剂成品卫生学情况，然而目前常用的微生物限度检查方法检测周期较长，而中药汤剂的制备周期短、检测时限要求高，故该方法通常作为批量生产中药汤剂成品质量抽检方法。

2 中药汤剂成品质控探索

2.1建立中药汤剂成品质量标准汤剂作为中药传统剂型之一，其成品质量优劣直接关系到临床疗效。目前代煎中药汤剂占中药饮片使用的比例较大[27]，且医院代煎中药汤剂的制备趋近于工业化生产。本文通过回顾近年来中药汤剂成品质量控制的研究，发现目前的质量控制方法不能完全适应患者个人代煎中药汤剂。基于此，笔者所在课题组根据前期研究与实践经验，从建立中华中医药学会团体标准《中药汤剂煎煮规范》、研制中药煎药数据库与中药煎药规则库等方面入手，主要通过性状、包装、相对密度等方面评价中药汤剂成品质量，为中药煎药软件的研发奠定了基础。

2.1.1性状整体性状是可以直接肉眼观察到的评价中药汤剂成品质量的指标，但同时也最易受主观因素影响。笔者所在课题组根据前期工作，建立了《中药汤剂煎煮规范》，并以外观、气味以及得液量三项指标作为判断中药汤剂成品整体性状的依据，具体内容为：①外观上不得有明显的大颗粒物、焦糊块、纤维等，允许有少量摇之易散的沉淀物；②气味上中药汤剂应有原特征气味，一般不得有焦糊味；③凡出现药液煎干或焦糊情况，不得服用；④不应有异味，凡出现药液污染、变质的情况，不得服用；⑤总煎液量(mL)=饮片总重量(g)×1 mL·g-1×2(误差不超过±10%)，每剂重量超过270 g的处方不建议使用煎药机煎煮。

2.1.2包装中药汤剂包装可保证其成品药效，使其免受外界环境破坏，便于储存、运输和流通[28]，应对其制定相应标准以保障中药汤剂成品质量安全。笔者所在课题组借鉴中药制剂包装相关管理规范和标准，制定的《中药汤剂煎煮规范》中具体要求密封包装需做到：①无破损，无污染，无胀袋；标签项目齐全，内容完整，字迹清晰；②总袋数应为总剂数的2或3倍，或遵医嘱；③每袋药液量应为50～300 mL，每袋装量与标示装量相比，装量误差不超过±10%。

2.1.3相对密度为适应患者个人代煎中药汤剂制备周期短、检测时限要求强的特点，其质量检测方法与批量生产的中药汤剂略有不同，需要实现中药汤剂的快速检验，使患者服用的中药汤剂安全有效。通过相对密度等物性参数能够客观、科学地反映中药汤剂成品质量，同时实现中药汤剂煎煮过程以及成品质量的在线监控，为实现个性化中药汤剂成品质量控制模式奠定基础。

不同药用部位的中药饮片所煎煮出的中药汤剂相对密度往往不同，需要经过大量实验总结其煎煮前后变化规律，设计出预测模型。笔者所在课题组通过测定分析46种常用中药饮片煎煮后得液量、相对密度及出膏率等相关参数，建立校正相对密度(Y)对出膏率(X)的线性回归方程：Y=0.041 3X+1.003 7，r=0.930 9(P<0.01，n=46)，线性范围为1.94%～65.75%，构建了中药汤剂相对密度预测模型雏形[29]。此外，笔者所在课题组经过大量实验测得全草类[30]、果实及种子类[31]、根及根茎类[32]、动物类及矿物类[33]等不同药用部位中药饮片的吸水率(图1)、出膏率以及相对密度等，建立了中药煎药数据库和中药煎药规则库。并根据上述工作得出复方相对密度预测公式，应用于中药汤剂质量评价[34]，以麻杏石甘汤为例，建立中药汤剂煎煮相对密度95%预测区间的数学模型[34]。

图1 不同药用部位吸水率均值

2.2研发中药煎药软件中医临床讲究三因制宜[35]，分别为因人、因地、因时制宜，即临床用药应考虑患者体质，居住的地理环境，所患疾病是否存在时间周期[36]，故制定个性化质量标准是针对患者个人代煎的中药汤剂质量控制最科学、有效的方法。笔者所在课题组基于前期工作，研发了可生成个性化质量控制标准、个性化用药说明的中药煎药软件。中药煎药软件主要通过联通医院信息系统(hospital information system，HIS)中患者处方信息和中药煎药数据库信息，并依据中药煎药规则库形成个性化煎药工艺，最终向煎药设备发出个性化煎药指令并提供个性化用药说明，以及包含所煎中药汤剂预期得液量和相对密度的个性化质量控制标准，使中药汤剂成品质量控制更加科学严谨，保障了患者用药安全。

2.3探索人工智能感官技术在中药饮片及汤剂质量评价中的应用近年来，智能感官技术在中药饮片及汤剂质量评价领域发挥了重要作用。智能感官是加入现代科学技术、基于模拟人体感觉器官逐渐发展起来的与人类感觉器官相对应的人工智能感官，如电子眼、电子舌、电子鼻、电子耳和电子皮肤等[37]。为寻找更加科学、有效且快速的中药汤剂成品质量控制方法，笔者所在课题组尝试利用智能感官技术评价中药质量。经过前期研究发现，在鉴别中药饮片真伪方面，电子舌[38]、电子鼻[39]等技术在时效性和正判率方面均具有显著优势；在天然药物四味辨识方面，电子舌表现良好，同时可以用于四类不同味道天然药物的区分[40]等。基于此，笔者所在课题组将进一步探索智能感官技术在中药汤剂成品质量评价中的应用。