温度对刀额新对虾繁育的影响研

陈相峰，胡利华，罗 奎，张 敏，冀德伟

(浙江省海洋水产养殖研究所，浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室，浙江 温州 325005)

刀额新对虾亦称基围虾、泥虾，隶属于节肢动物门、甲壳纲、十足目、对虾科、新对虾属，主要分布在中国东南沿海，是新对虾属中个体较大的品种。近年来的大量海底拖网捕捞作业对刀额新对虾的种质资源造成了一定的破坏，刀额新对虾的资源量大幅降低。因此，有必要对刀额新对虾进行种质保护。

温度是影响甲壳动物生长与繁殖的重要因素。赵玉超等(2019)研究显示，温度对凡纳滨对虾受精卵的孵化率有显著的影响，随温度的上升，平均孵化率呈阶梯式上升；而超出孵化适宜温度，会导致胚胎发育异常甚至死亡(张彬等，2014)。本文以海区捕捞的自然成熟、性腺饱满的刀额新对虾雌虾所产的受精卵为实验材料，研究不同温度下刀额新对虾胚胎及幼体发育情况，为刀额新对虾的人工繁育提供参考，以减少刀额新对虾的海捕需求，对刀额新对虾的种质资源进行保护。

一、材料与方法

1.实验材料

亲本取用从广东饶平外海区捕捞的自然成熟、卵巢发育至4期左右的刀额新对虾雌虾，平均规格(15.0±1.0)克/尾，通过亲虾袋活水充氧运输到浙江省海洋水产养殖研究所清江基地暂养。

卵巢发育期根据性腺发育进行分期：l期(01)的GSI 值为0.43±O.02，此时卵巢呈透明细线状；2 期(02)的GSI 值为0.89±0.02，卵巢呈白浊色细带状；3 期(03)的GSI 值为2.45±0.33，卵巢体积继续增大，呈白色；4 期(04)的GSI 值为6.30±0.31，卵巢体积明显增大，呈淡黄色；5期(05)的GSI值为8.95±1.75，卵巢体积达到最大，呈灰绿色(贾锡伟等，2011)。

亲虾暂养：将亲虾放入水泥池中，养殖密度为8 尾/米2。池水为盐度23 的自然海水经过沉淀、沙滤后用浓缩机浓缩调整到所需盐度28，再用双层滤水棉袋过滤入池，然后用消毒剂消毒，曝气36 小时后泼洒10 毫克/升EDTA 溶液，络合水中重金属离子，温度为(30±0.5)℃。

受精卵的获得：从亲虾池中挑选性腺发育至5 期的雌虾，将其放入200 升聚乙烯桶内，微充气，产卵后移走雌虾。

幼体的获得及培育：对在聚乙烯桶内的受精卵继续培养，到无节幼体期后进行灯诱收集，用水体比例法定量放入其他200升聚乙烯桶内，充气养殖。所有养殖桶的养殖条件除温度外均相同，从Z1(溞虾1 期)开始喂食金藻，从M1(糠虾1 期)开始喂食配合饲料，从M2开始用轮虫(蛋羹)和配合饲料轮换喂食，日换水1/4，饵料量均为适当过量。

用水体比例法进行计数：将收集的受精卵放入装有5升水体的水桶中，用500毫升的玻璃烧杯取样，每个桶取两次计数，再取平均值。

2.实验设计

(1)不同温度下受精卵孵化实验。设置4 个温度梯度(24、27、30、33℃)，同时设置3 个平行，共12 个实验组。整个实验都在控温系统中进行，温度误差在±0.5℃，盐度均为28。对移走产卵后雌虾的养殖桶，每过1 小时用搅卵棒轻轻搅拌1 次，防止受精卵沉底和结块。从第6 小时开始观察受精卵孵化情况，每0.5小时计数1次，每次取50粒受精卵，记录各个实验组的孵化时间。

(2)不同水温下幼体发育实验。设置4 个温度梯度(24、27、30、33℃)，同时设置3个平行，共12 个实验组。整个实验都在控温系统中进行，温度误差在±0.5℃，盐度均为28。每个实验组放5 000 尾无节幼体于200 升聚乙烯桶内，充气培育。从糠虾期开始观察记录幼体的发育情况。

用水体比例法进行计数：用500毫升的玻璃烧杯从水体充气“鼓沸”处取样，每个桶取两次计数，取平均值。

3.数据处理与统计分析

(1)数据处理。初孵时间(h0)为受精卵从胚胎发育开始到无节幼体(N)破膜而出所需最短时间。幼体集中孵化时间(h)为受精卵孵化60%～90%的平均用时。幼体生长时间为从N开始到60%～90%的幼体达仔虾(P)的时间。

幼体孵化率(%)＝N/总卵数×100

幼体存活率(%)＝P/N×100

(2)统计分析。实验结果数据均采用“平均值±标准差”表示，借助SPSS 17.0软件进行数据处理，利用单因子方差分析(one-way ANOVA)比较不同处理间的差异，利用LSD 法进行多重比较，P＜0.05为差异显著。

二、结果

1.温度对胚胎发育的影响

实验结果表明，在实验温度范围内温度影响平均孵化率，不同温度下平均孵化率呈峰值变化。24～33℃条件下，随温度的上升，平均孵化率先上升、后下降；30℃时平均孵化率明显高于24℃(P＜0.05)；27、33℃时平均孵化率虽然比24℃高，但差别不明显(P＞0.05)。刀额新对虾平均孵化率随温度的升高而升高，在超出一定温度后下降，在30℃时平均孵化率最高，为91.7%。刀额新对虾受精卵的孵化时间，24℃和27℃时明显长于30、33℃(P＜0.05)；30℃与33℃时的孵化时间相当，无显著差异(P＞0.05)。在实验范围内，随温度的升高所需孵化时间缩短，孵化率先升高、后降低。

2.温度对刀额新对虾幼体发育的影响

实验结果表明，24℃时与27、30、33℃时刀额新对虾幼体发育时间相比显著延长(P＜0.05)，存活率明显降低(P＜0.05)。由此看出，24℃及以下温度对刀额新对虾幼体的发育有较大的影响，不适合幼体培育；27、30、33℃时刀额新对虾幼体发育时间差别不明显(P＞0.05)；幼体存活率在33℃时明显低于27℃和30℃(P＜0.05)而高于24℃(P＜0.05)，虽然30℃时的存活率高于27℃，但差别不明显(P＞0.05)。这表明实验中刀额新对虾幼体适宜的培育温度为27～30℃，而最适温度应为30℃，刀额新对虾的平均存活率为81.0%，幼体平均发育时间为7.7天。

三、讨论

1.刀额新对虾胚胎的发育

温度是影响刀额新对虾胚胎和幼体发育的重要因素。刀额新对虾受精卵在不同温度下，所需的孵化时间不同，孵化率也不同。30℃时刀额新对虾受精卵的孵化率明显高于24℃时(P＜0.05)，而24℃时的孵化率虽然低于27、33℃，但却没有显著性差异(P＞0.05)，这说明在30℃左右，刀额新对虾受精卵的孵化率达到了最高。温度影响孵化率，在一定范围内升高温度可以提高孵化率，这与薛素燕等(2012)的研究结果相似。但温度过高，则会导致胚胎发育异常，孵化率降低(林伟雄等，1991)。

刀额新对虾受精卵的孵化时间在24℃和27℃时与30、33℃有显著性差异(P＜0.05)，前两者孵化时间显著长于后两者；30℃和33℃之间孵化时间相当，无显著性差异(P＞0.05)。这说明在一定温度范围内，升高温度会缩短胚胎发育时间。实验结果表明适当提高孵化温度，有利于受精卵的孵化。刀额新对虾受精卵的初孵时间最短在30～33℃，结合温度对刀额新对虾孵化率和孵化时间的影响，可得出理想的孵化水温是30℃左右，这应该与相关胚胎发育酶的活力有关，适宜的温度有助于提高相关胚胎发育酶的活力，而过高或者较低的温度则会降低相关胚胎发育酶活力(杨世平等，2014)，导致孵化率降低，孵化时间变长。在本次实验中，温度为30℃时，刀额新对虾受精卵的孵化率最高，孵化时间最短，而在33℃和27℃时，受精卵孵化率降低，孵化时间变长，所以最适孵化温度在30℃左右。

2.刀额新对虾幼体的发育

不同温度下刀额新对虾幼体的发育情况不同，在24℃的条件下平均存活率为44.3%，平均生长时间10.2 天，其存活率明显低于27、30、33℃时(P＜0.05)，生长时间显著长于27、30、33℃时(P＜0.05)。升高温度会减少幼体发育时间，但过高的温度也会导致幼体存活率下降。33℃时刀额新对虾幼体存活率62.0%，明显低于27℃时的75.3%和30℃时的81.0%(P＜0.05)，这可能是温度超过一定范围时，对虾消化酶活力降低，摄食能力减弱，从而影响了幼体的健康和抗病力，导致其存活率下降。从实验结果可以看出，温度过低或过高都不适合幼体的培育，27～30℃是刀额新对虾幼体发育的适宜温度范围。结合实验结果中刀额新对虾幼体的生长时间和存活率，在温度为30℃时，刀额新对虾幼体的存活率为81.0%，生长时间为7.7 天，优于24、27、33℃时，可得出30℃左右是刀额新对虾幼体发育的最适宜温度。