剪切波弹性成像联合尿液dachshund同源基因2检测在膀胱尿路上皮癌级别鉴定中的价值

路会景，于艳艳，吕悦

河南大学淮河医院超声科，河南 开封 475000

膀胱尿路上皮癌的发病率逐年上升，患者临床主要表现为尿频、尿急、尿路刺激征和血尿等。大多数膀胱尿路上皮癌患者早期症状不明显，发现时已进入中晚期。因此，膀胱尿路上皮癌肿瘤分期较高，且输尿管肌层薄，淋巴管丰富，容易发生转移和侵犯周围组织，最常见的远处转移包括肝和肺转移，患者的预后很差。早期诊断和及时有效治疗是提高膀胱尿路上皮癌治疗效果的关键。剪切波弹性成像是一种非侵入性的影像诊断方法，通过检测可以显示出病灶的组织弹性特征，及时发现组织的异常状态，目前在乳腺癌、前列腺癌等早期诊断中取得了较好的效果。但膀胱的解剖位置位于耻骨联合后方，并且结构特殊，是一种肌肉性囊性器官，周围缺乏正常的实质组织，难以获得良好的图像，因此缺乏相关研究。目前对dachshund同 源 基 因（dachshund homolog，DACH）与肿瘤的研究主要集中于DACH1，关于DACH2与肿瘤的研究较少。既往研究证实，DACH2与膀胱尿路上皮癌的恶性生物学行为密切相关，但其在膀胱尿路上皮癌中是否可作为独立的预后标志物尚不明确。本研究主要探讨剪切波弹性成像联合尿液DACH2检测在膀胱尿路上皮癌级别鉴定中的价值，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2017年1月至2020年12月在河南大学淮河医院治疗的88例膀胱尿路上皮癌患者作为观察组。纳入标准：①均经病理学检查确诊为膀胱尿路上皮癌；②初治患者；③在河南大学淮河医院接受剪切波弹性成像等检查；④患者及家属知情同意。排除标准：①剪切波弹性成像图像质量欠佳；②已行放化疗等抗肿瘤治疗。根据世界卫生组织（WHO）膀胱癌病理分级法，低级别54例，高级别34例。同时选取80例尿路上皮增生患者作为对照组，两组患者各基线特征比较，差异均无统计学意义（

P

＞0.05）（表1），具有可比性。本研究获得医院伦理委员会批准，所有患者均知情同意并签署知情同意书。

表1 两组患者的基线特征

1.2 剪切波弹性成像检查

使用aixplorer超声诊断仪，探头频率3～12 MHz，配置swe功能。男性患者经直肠超声检查，女性患者经阴道检查，检查前排空膀胱。男性患者取左侧卧位，女性患者取截石位。对探头进行常规消毒和涂偶联剂对肿瘤进行扫描并找到显示肿瘤最大横截面直径的切面。观察肿瘤位置、血流、内部回声、最大长径等，保存图像。选择“gyn-mew”模式，量程0～100 kPa，移动探头，并将感兴趣区（region of interest，ROI）放置在图像的中心，保存图像，应用q-box定量测量工具测量ROI值，选择质量最硬的区域，使用q-box测量最大弹性值（Emax）、平均弹性值（Emean）和最小弹性值（Emin），3次测量取平均值。

1.3 尿液DACH 2水平检测

在患者术前24 h采集1 ml中段尿，立即按1∶100的比例加入60 g/L牛血清白蛋白溶液，调pH值至7.40，3000 r/min，离心5 min，分离上清液待测。

检测方法：在0.1 ml待测尿样中加入0.1 ml抗体和0.1 ml标记抗原混匀，37℃孵育3 h，然后加入0.5 ml分离剂反应15 min后，3000 r/min离心20 min，弃上清和未结合物质，加入化学发光底物，检测沉淀物中的放射性计数60 s。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 尿液DACH 2水平的比较

观察组患者尿液DACH2水平为（7.29±1.16）ng/ml，明显高于对照组的（2.34±0.87）ng/ml，差异有统计学意义（

t

=31.044，

P

＜0.01）。

2.2 剪切波弹性成像参数的比较

高级别膀胱尿路上皮癌患者Emax和Emean均明显高于低级别患者，差异均有统计学意义（

P

＜0.01）。（表2）

表2 不同病理分级膀胱尿路上皮癌患者剪切波弹性成像参数的比较（±s）

2.3 不同临床特征膀胱尿路上皮癌患者尿液DACH 2水平的比较

高级别膀胱尿路上皮癌患者尿液DACH2水平明显高于低级别患者，差异有统计学意义（

P

＜0.01）；不同性别、年龄、体重指数膀胱尿路上皮癌患者尿液DACH2水平比较，差异均无统计学意（

P

＞0.05）。（表3）

表3 不同临床特征膀胱尿路上皮癌患者尿液DACH 2水平的比较（ n=88）

2.4 剪切波弹性成像参数及尿液DACH 2鉴别高级别膀胱尿路上皮癌的价值

Emax、Emean、DACH2以及联合检查诊断高级别膀胱尿路上皮癌的ROC曲线下面积分别为0.684、0.819、0.704和 0.982，差异有统计学意义（

P

＜0.05）。（表4、图1）

表4 剪切波弹性成像参数及尿液DACH 2鉴别高级别膀胱尿路上皮癌的价值

图1 剪切波弹性成像参数、尿液DACH 2单独及联合检测鉴别高级别膀胱尿路上皮癌的ROC曲线

3 讨论

膀胱癌是一种常见的泌尿系统肿瘤，好发于中老年男性。膀胱尿路上皮癌发生部位在膀胱的两侧和三角形区域，可单发或多发。大多数患者发病无明显不适，当发现病灶时才进行治疗，疗效较差。早发现、早治疗对改善患者预后具有重要意义。尽管肿瘤分期和分级等指标可以提供一些预后信息，但肿瘤的转移潜力等信息仍然难以预测。DACH2与肿瘤发生发展密切相关，因此本研究分析尿液中该指标的变化与病理分级的关系。本研究结果显示，观察组患者尿液DACH2水平明显高于对照组（

P

＜0.01），并且尿液DACH2水平与病理分级有关（

P

＜0.05），病理分级较高的患者，其尿液DACH2水平也较高。说明尿液DACH2水平测定可作为膀胱尿路上皮癌的早期诊断方法。

研究发现，应用超声造影技术可以在一定程度上提高膀胱肿瘤的分期和分级诊断水平。但超声造影检查时需要静脉注射造影剂，使用成本高，少数患者可能存在禁忌证，在膀胱癌的使用中有局限性。剪切波弹性成像技术具有无依赖性、重复性好、无创、适用范围广等优点，逐渐得到应用，可以为临床医师提供ROI内实时灰阶图和彩色图。研究表明，与传统检查相比，剪切波弹性成像用于良恶性病变的诊断灵敏度和特异度均较高。但膀胱的解剖位置和结构较为复杂，经腹检查时常导致探头位置距离病灶较远，难以获得良好的剪切波弹性图像。本研究对于不同患者分情况经直肠或阴道进行膀胱肿瘤探查，以期缩小探头与病灶之间的距离，获得理想的剪切波弹性图像。

本研究结果显示，高级别膀胱尿路上皮癌患者Emax和Emean均明显高于低级别患者（

P

＜0.01）。说明剪切波弹性成像技术可以客观、定量地评价病变组织，可以弥补传统二维超声受主观影响较大的不足，但对于高、低级别膀胱尿路上皮癌不同弹性模量值的机制有待进一步探讨。本研究进一步以术后病理检查结果为金标准，分析剪切波弹性成像联合尿液DACH2水平诊断膀胱尿路上皮癌的灵敏度和特异度。在选择案例时有效避免偏见是非常重要的。通过严格的纳入标准，最大限度地减少病例选择的偏差。本研究中不同性别、年龄、体重指数膀胱尿路上皮癌患者尿液DACH2水平比较，差异均无统计学意义（

P

＞0.05），说明本研究不同患者之间具有较好的可比性。Emax、Emean、DACH2联合检测诊断高级别膀胱尿路上皮癌的价值均明显提高。

检查时应注意，通过直肠探查膀胱肿瘤时，探头与病灶之间的距离受前列腺大小的影响；对于女性患者，由于其解剖优势，膀胱肿块经阴道剪切波弹性显像效果较好。本研究对不同性别的患者分别采取不同的探查方法，使结果准确性更高。本研究创新性地将剪切波弹性成像和尿液DACH2检测结果联合分析，有利于提高膀胱尿路上皮癌的诊断检出率，提高患者预后，有一定的研究价值。但本研究也存在一定的局限，研究样本量较小，因此下一步研究中还需要加大样本量进一步验证剪切波弹性成像联合尿液DACH2检测在膀胱尿路上皮癌诊断中的可行性。

综上所述，膀胱尿路上皮癌患者尿液DACH2水平上调，与病理分级有关；剪切波弹性成像联合尿液DACH2鉴别低级别和高级别膀胱尿路上皮癌有较好的价值。