血清淀粉样蛋白A、白细胞介素-35及可溶性髓样细胞触发受体-1诊断脓毒症患者中的价值

张 垒

河南省人民医院医学·华中阜外医院医学·郑州大学华中阜外医院检验科，河南 郑州 450000

临床上脓毒症的发生具有较高的病死率和发病率，在不同人群中，由于机体抵抗力的下降、炎症反应的激活，脓毒症的发生率可进一步的上升［1-2］。通过对于脓毒症的早期诊断，能够为临床上脓毒症的诊断和治疗提供参考，从而改善脓毒症患者的整体性临床预后。血清学方面的细胞因子指标，能够在脓毒症的诊断过程中发挥重要的作用。淀粉样蛋白A（SAA）上糖蛋白相关调控因子，其能够通过诱导上皮细胞的变性，加剧组织器官的功能障碍，最终促进感染性疾病的发生［3］；白细胞介素-35（IL-35）是自身免疫性调控因子，其能够通过诱导T淋巴细胞的功能紊乱，抑制机体的免疫功能能力［4］；可溶性髓样细胞触发受体-1（sTREM-1）是趋化相关因子，其对于下游炎症性因子的激活作用，能够显著促进脓毒症的病情进展［5］。为了揭示SAA、IL-35及sTREM-1的表达与脓毒症患者的病情关系，从而为临床上脓毒症的诊断提供参考，本次研究选取确诊的脓毒症患者110例，探讨了SAA、IL-35及sTREM-1的表达及其诊断学价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取确诊的脓毒症患者110例（脓毒症组），全身炎症性反应综合征（SIRS）患者110作为对照组，研究对象纳入时间2015年7月—2018年12月。纳入标准：（1）脓毒症的诊断参考中华医学会制定的诊断标准［6］者；（2）年龄范围19～79岁者；（3）在明确脓毒症病情后24 h内抽取肘静脉血实施相关检测者；（4）原发疾病明确者；（5）本研究获得医学伦理委员会的批准，获得研究对象或其家属的知情同意者。排除标准：（1）恶性肿瘤者；（2）人类获得性免疫缺陷病毒感染者；（3）长期使用糖皮质激素、免疫抑制剂者；（3）近3个月伴有脑血管病史者。

脓毒症组，年龄34～79岁，平均年龄（55.0±9.8）岁，性别：男60例、女50例；原发疾病构成：肺炎22例、急性胰腺炎17例、胆囊炎29例、阑尾炎23例、泌尿系统感染12例、其他7例；其中脓毒症患者90例、严重脓毒症患者20例。对照组，年龄27～79岁，平均年龄（54.0±13.6）岁，性别：男54例、女56例；原发疾病构成：肺炎25例、急性胰腺炎12例、胆囊炎31例、阑尾炎20例、泌尿系统感染10例、其他12例。两组患者的年龄、性别、原发疾病构成比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

采用ELISA法进行SAA、IL-35及sTREM-1的检测：采用患者的肘部静脉血5 ml，1 000 r/min离心10 min，取上清液待测。空白对照孔中加入生物素抗体稀释液100 μl，检测孔中加入生物素SAA、IL-35及sTREM-1抗体检测液100μl，胶纸封闭实验表条孔，36℃条件下孵育30～60 min，空白对照孔中加入酶结合稀释液100μl，检测孔中加入酶结合检测液100μl，胶纸封闭实验表条孔，磷酸盐缓冲液清洗5次，加入TMB底物显色试剂盒（ELISA HRP显色 杭州弗德生物科技有限公司），避光36℃孵育15 min，加入终止液100μl，3 min内检测OD450值，BioTek酶标仪购自美国伯腾仪器有限公司。

1.3 统计学方法

统计分析采用SPSS 21.0软件，患者的SAA、IL-35及sTREM-1及APACHEⅡ评分、SOFA评分等计量资料采用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验；疾病构成、性别比较采用χ2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 脓毒症组的SAA、IL-35及sTREM-1及APACHEⅡ评分、SOFA评分与对照组比较

脓毒症组患者的SAA、IL-35及sTREM-1测定值及APACHEⅡ评分、SOFA评分均高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组SAA、IL-35及sTREM-1及APACHEⅡ评分、SOFA评分比较（±s）

表1 两组SAA、IL-35及sTREM-1及APACHEⅡ评分、SOFA评分比较（±s）

组别脓毒症组（n=110）对照组（n=110）tP SAA（mg/L）378.9±104.2 194.8±55.4 16.362 0.000 IL-35（pg/mL）38.75±9.71 27.11±7.02 10.189 0.000 sTREM-1（μg/L）4.89±1.52 2.20±0.84 16.245 0.000 APACHEⅡ评分（分）17.20±5.59 7.86±2.41 16.092 0.000 SOFA评分（分）6.31±2.11 3.20±1.14 13.601 0.000

2.2 不同病情程度的脓毒症患者的SAA、IL-35及sTREM-1及APACHEⅡ评分、SOFA评分比较

严重脓毒症患者的SAA、IL-35及sTREM-1测定值及APACHEⅡ评分、SOFA评分均高于脓毒症患者，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 不同病情程度的脓毒症患者的SAA、IL-35及sTREM-1及APACHEⅡ评分、SOFA评分比较（±s）

病情程度脓毒症组（n=90）严重脓毒症组（n=20）tP SAA（mg/L）351.8±97.68 471.0±90.05-5.003 0.000 IL-35（pg/mL）26.21±9.03 46.91±8.81-9.313 0.000 sTREM-1（μg/L）4.41±1.30 6.29±1.48-5.703 0.000 APACHEⅡ评分（分）15.82±4.81 21.39±5.22-4.613 0.000 SOFA评分（分）5.89±1.74 7.48±2.08-3.564 0.001

2.3 SAA、IL-35及sTREM-1诊断脓毒症的价值

根据ROC曲线分析：SAA鉴别诊断脓毒症与SIRS患者的灵敏度为78.56%、特异度为85.29%、ROC曲线下面积AUC值为0.821；IL-35鉴别诊断脓毒症与SIRS患者的灵敏度为68.34%、特异度为78.09%、ROC曲线下面积AUC值为0.742；sTREM-1鉴别诊断脓毒症与SIRS患者的灵敏度为91.17%、特异度为80.66%、ROC曲线下面积AUC值为0.875；SAA、IL-35及sTREM-1联合应用诊断脓毒症与SIRS患者的灵敏度为96.44%、特异度为87.18%、ROC曲线下面积AUC值为0.926，见表3、图1。

3 讨论

感染性病原体的扩散、自身免疫性功能的下降或者先天性合并症，均能促进脓毒症的发生，在合并有先天性心肺循环障碍或者淋巴细胞功能抑制的患者中，脓毒症的发生率或者致残率均可进一步的上升［7］。临床上观察研究发现，脓毒症患者的病死率可超过3.5%以上，同时脓毒症患者感染性休克或者心脑血管意外的风险也明显上升［8-9］。通过对于脓毒症的早期诊断，能够为临床上脓毒症的抗感染治疗或者糖皮质激素辅助治疗提供参考。影像学检查虽然能够在感染性疾病的诊断过程中发挥作用，但影像学检查对于感染性疾病诊断的滞后性较为明显。虽然细胞因子能够在脓毒症的诊断过程中发挥作用，例如超敏C反应蛋白或者降钙素原等，能够在脓毒症的发病早期即可发生明显的变化。但依靠超敏C反应蛋白或者降钙素原诊断脓毒症的灵敏度或者特异度均较低，其对于脓毒症诊断的可靠性及一致性率较低［10］。本次研究通过对于脓毒症患者血清中SAA、IL-35及sTREM-1的表达分析，能够在揭示脓毒症病情进展机理的同时，为临床上脓毒症的诊疗提供现实参考。

SAA上糖蛋白相关家族受体成员，其能够在糖蛋白受体的结合方面发挥作用，加剧上皮细胞的凋亡［11］。IL-35不仅能够诱导炎症反应的激活，同时还能够调控机体抗原提呈细胞的功能，导致CD4+T淋巴细胞的功能状态的改变［12］。sTREM-1是粒细胞趋化相关因子，其对于下游中性粒细胞的诱导激活作用，能够显著加剧炎症反应的扩散。部分研究者探讨了sTREM-1在脓毒症患者血清中的变化情况，认为在脓毒症患者血清中，sTREM-1的表达浓度可明显上升［13］，但缺乏对于SAA、IL-35的表达分析。

本次研究发现在脓毒症患者血清中，SAA、IL-35及sTREM-1的表达浓度明显上升，高于全身炎症性反应综合征（SIRS）患者，统计学差异显著，表明SAA、IL-35及sTREM-1的高表达能够影响到脓毒症的病情进展。之所以存在较高的SAA、IL-35及sTREM-1表达，主要由于脓毒症患者体内抗炎系统及免疫调控机制系统的紊乱有关，过度的炎症瀑布反应的激活，能够显著诱导单核细胞或者巨噬细胞的激活，最终促进SAA、IL-35及sTREM-1的合成和释放［14］。有其他研究者也认为，在脓毒症患者中，IL-35的表达可随着脓毒症患者病情的加重而上升，在合并有较多脏器损害或者功能失代偿的患者中，IL-35的标的浓度可持续上升，IL-35的表达浓度越高，脓毒症患者病死的风险也越高［15］。急性生理与慢性健康评分（APACHEⅡ评分）、序贯器官衰竭评分（SOFA）是评估脓毒症患者脏器功能损害程度的指标，可以发现在脓毒症患者中，APACHEⅡ评分、SOFA评分较高，同时脓毒症患者的病情约为严重，APACHEⅡ评分、SOFA评分也越高，提示脓毒症患者的病情越重，其脏器损害程度越为明显。在不同病情的脓毒症患者中，SAA、IL-35及sTREM-1可随着病情的加重而上升，特别是在严重脓毒症患者中，SAA、IL-35及sTREM-1的上升更为明显。表明SAA、IL-35及sTREM-1的表达能够影响到脓毒症患者的病情，这主要由于SAA、IL-35及sTREM-1浓度越高，炎症信号通路的激活越为明显，自然杀伤性T淋巴细胞的毒性作用越强，这些均可最终促进脓毒症患者病情的进展。诊断学价值分析可见，SAA、IL-35及sTREM-1在单独诊断脓毒症的过程中均具有一定的价值，其中SAA、IL-35诊断的灵敏度相对较低，而sTREM-1诊断的灵敏度和特异度相对较高，提示了SAA、IL-35及sTREM-1对于辅助诊断脓毒症的作用价值。SAA、IL-35及sTREM-1联合诊断后，可以进一步提示脓毒症的诊断灵敏度和特异度水平，提示了SAA、IL-35及sTREM-1联合诊断的临床应用价值。

综上所述，脓毒症组患者的SAA、IL-35及sTREM-1水平较SIRS患者升高显著，病情与患者病情程度有关，早期检测这三项指标对于鉴别诊断脓毒症与SIRS患者有一定的价值。