Her-2 和Ki-67 在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床病理意义

朱 婷 孙晓冲 吕艳关

扬州大学附属淮安市妇幼保健院检验科，江苏淮安 223002

乳腺浸润性导管癌是一组异型肿瘤，在浸润性乳 腺癌分类中占比最大。近年来，乳腺癌发病率呈逐年上升趋势，严重危害着女性的身体和心理健康[1-2]。相关研究提示，乳腺癌具有高度的异质性，其发生和发展是一个多因素、多阶段的过程，因而具有广泛的临床及病理特征[3]。人类表皮生长因子受体2（human epidermal growth factor receptor 2，Her-2）是一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，其在细胞内外分别执行不同的生理功能，可引起细胞的增殖、分化和迁移，促进新生血管的生成，增加肿瘤细胞的侵袭性[4]。此外，Her-2 的过表达与乳腺癌的发生、发展和转移均相关，因而是其进展过程中最有用的预后指标[5]。细胞增殖被认为是肿瘤发生、发展和转移的重要原因之一，细胞增殖指数Ki-67 作为与细胞增殖有关的核抗原，对于细胞增殖和凋亡的判断具有重要的价值，同时其在乳腺癌的治疗和预后方面也具有十分重要的作用[6-7]。本研究旨在探讨Her-2 和Ki-67 在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床病理意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017 年1 月至2020 年1 月扬州大学附属淮安市妇幼保健院病理科乳腺浸润性导管癌包埋石蜡块标本91 例作为实验组，随机选择30 例距离肿瘤组织5 cm 以上的正常乳腺组织作为对照组。所有患者均为女性，年龄29～77 岁；有淋巴结转移42 例，无淋巴结转移49 例；肿瘤直径＜2 cm 16 例，≥2 cm 75 例；TNM 分期Ⅰ或Ⅱ期71 例，Ⅲ或Ⅳ期20 例。患者均为经术后病理确诊且未行放化疗的初诊患者，排除合并肝脏、肾脏、妇科及心血管系统等其他方面疾病。

1.2 方法

术后将肿瘤组织标本立即使用10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，4 μm 厚连续切片，采用免疫组织化学方法完成乳腺癌组织中Her-2 和K-i67 表达的测定。一抗Her-2（货号：E31575）及相关试剂购于罗氏诊断产品有限公司，一抗Ki-67（批号：2011110672m）购于迈新生物技术开发有限公司，所有步骤均严格按说明书进行。

1.3 结果判断

Her-2 表达以细胞膜出现清晰棕色颗粒为阳性，每张切片任选10 个高倍视野，根据切片所选视野中阳性细胞占全部细胞比例分为：阳性＜10%为阴性（-），≥10%为阳性（+）[8]。Ki-67 表达以细胞核出现黄色或棕黄色颗粒为阳性[9]，选取任意5 个高倍视野（400 倍），计数阳性细胞占全部细胞的百分数：Ki-67≥14%为阳性（+），Ki-67＜14%为阴性（-）[10-11]。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件进行数据分析，计数资料用例数和百分比表示，采用χ2检验；相关性分析选择Spearman 检验。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组Her-2 和Ki-67 在乳腺组织中表达的比较

实验组Her-2 阳性表达率为40.7%（37/91），高于对照组的10%（3/30）；Ki-67 阳性表达率为74.7%（68/91），高于对照组的6.7%（2/30），差异均有统计学意义（P ＜0.05）。见图1。

图1 乳腺癌部分免疫组化（100×）

2.2 乳腺浸润性导管癌患者Her-2 和Ki-67 表达与临床病理特征的关系

乳腺浸润性导管癌患者Her-2 和Ki-67 的表达与TNM 分期相关（P ＜0.05），而与年龄、淋巴结转移、肿瘤直径无关（P ＞0.05）。见表1。

表1 Her-2 和Ki-67 表达与临床病理特征的关系

2.3 Her-2 和Ki-67 表达的相关性分析

Her-2 阳性表达而Ki-67 阴性表达4 例；Her-2阴性表达而Ki-67 阳性表达35 例；Her-2 和Ki-67共同阳性表达33 例，Her-2 和Ki-67 共同阴性表达19 例。Spearman 相关性分析结果显示，Her-2 和Ki-67 表达呈正相关（r=0.275,P ＜0.05）。

3 讨论

乳腺癌是世界上最常见的癌症之一，女性发病率很高。虽然手术切除、化疗、放疗和分子靶向治疗可以延缓乳腺癌的进展，但预后仍较差[12]。复发和转移是乳腺癌患者死亡率提高的重要原因，因此早期发现并及时治疗复发转移灶是延长乳腺癌患者生存期的关键[13-14]。

Her-2 是一种酪氨酸蛋白，在细胞内外区域分别执行不同的生理功能，胞外区能够与相应配体结合获得激活信号，而胞内区具有酪氨酸酶活性和ATP 结合位点，通过PI3K-Akt 途径降解抑癌基因p53 的表达，抑制细胞凋亡，增加肿瘤细胞的侵袭性[15-16]。因此，Her-2 是肿瘤诊断及治疗研究中的一个重要靶点，对于乳腺癌患者预后的判断非常重要，其过表达可刺激肿瘤细胞增长，进而增加细胞的侵袭和转移能力[17-19]。韩冬艳等[20]研究显示，Her-2 过表达与患者肿瘤分化程度、异型性及淋巴结是否转移有关，而与年龄及肿瘤大小无关，Her-2 表达越高，患者预后越差。Ki-67是一种表达于增殖细胞的核抗原，与细胞有丝分裂有关，主要用于检测肿瘤细胞的增殖活性，其增殖指数高低与包括乳腺癌在内的多种恶性肿瘤进展、转移及预后有关，因而常用于肿瘤预后的判断[21-27]。Mlco 等[28]研究显示，Ki-67 表达与乳腺癌浸润、转移密切相关，其高表达可用于浸润性乳腺癌的早期识别，并能评估患者的恶性程度及预后。本研究结果显示，乳腺浸润性导管癌患者Her-2 和Ki-67 阳性表达率增高，Her-2和Ki-67 表达与患者TNM 分期相关，提示Her-2和Ki-67 阳性表达能反映乳腺癌细胞的增殖活性和速度，其表达水平越高，越易发生侵袭和转移。但是，Her-2 和Ki-67 表达与年龄、淋巴结转移、肿瘤大小无关。分析其原因可能是：随机入选标本存在生物学差异，组织内部基因结构因人而异。此外，各病理中心缺乏统一的临界值判定标准及读片的主观性，这可能都是导致部分结果不一致的原因。本研究中，Her-2和Ki-67 在乳腺浸润性导管癌中的表达呈正相关，提示两者共同促进乳腺癌的发展。Shokouh 等[29]发现，乳腺癌组织中Her-2 表达与Ki-67 表达呈正相关，Her-2表达水平越高，Ki-67 表达则越强，其结果与本实验一致。

综上所述，本研究显示，术前乳腺浸润性导管癌患者Her-2 和Ki-67 阳性表达增高且呈正相关，共同促进肿瘤的发生、发展和转移，其表达越高预示恶性程度越大，有助于乳腺癌患者预后的临床判断。