APP下载

单环刺螠体壁多糖的组成分析及基于MCM-41的吸附富集研究

2021-10-29马月云马菁英唐世英刘宗浩左依瑾汪秋宽大连海洋大学食品科学与工程学院辽宁大连6023国家海藻加工技术研发分中心辽宁大连6023辽宁水产品加工及综合利用重点实验室辽宁大连6023

食品工业科技 2021年19期
关键词:单环单糖介孔

马月云,马菁英,唐世英,刘宗浩,左依瑾,汪秋宽,2,3,武 龙,2,3,周 慧,2,3,(.大连海洋大学食品科学与工程学院,辽宁大连 6023;2.国家海藻加工技术研发分中心,辽宁大连 6023;3.辽宁水产品加工及综合利用重点实验室,辽宁大连 6023)

单环刺螠(Urechis unicinctus),俗名海肠、海肠子,属于螠虫动物门(Echiurioidea)、螠纲(Echiurida)、无管螠目(Xenopneusta)、刺螠科(Urchidae)、刺螠属[1]。单环刺螠在海洋中分布很广,是我国北方沿海泥沙岸潮间带下区及潮下带浅水区底栖生物的常见物种,有较高的经济价值[2−4]。我国有广阔的海域适合养殖单环刺螠[5]。单环刺螠体壁富含胶原蛋白[6]、肽[7]、纤溶酶[8−11]、蛋白酶[12−13]、凝集素[14]、脂类[15−16]、多糖[17−18]等活性物质。其中,单环刺螠多糖具有抗氧化[19]、抗凝血[11]等生物活性。因此,以单环刺螠为原料制取活性多糖,不仅对于单环刺螠资源的高附加值开发具有重要意义,还可以为我国“蓝色经济”国家战略提供重要的发展途径[20]。

单环刺螠多糖多和蛋白质通过共价键相连接,为了提高多糖的得率和纯度,目前多采用热水浸提和蛋白酶水解法使蛋白质和聚糖分离[18−19,21]。其中酶解法因反应条件温和、作用专一、产物稳定等特点被广泛应用。酶解产物是由不同分子量和单糖组成的多糖混合物,为了获得具有特定分子量和单糖组成并兼具特定功能活性的多糖,必须对混合物进行分离纯化。目前,一般需要经过超滤、层析(阴离子交换柱层析、凝胶过滤层析)、醇沉等多个步骤得到一定分子量范围的多糖[18−19,22],分离步骤繁琐且多糖得率较低,损失严重,因此,急需开发一种新的多糖富集分离方法。介孔材料是指孔径介于2~50 nm的一类多孔材料[23],其具有极高的比表面积、规则有序的孔道结构和狭窄的孔径分布,在吸附分离和催化领域具有很大的应用潜力。氧化硅基材料MCM-41 是M41S介孔家族中重要的成员,其孔径在1.5~10 nm 范围内调节[23],可满足不同待分离样品的需求,进行精准分离[24]。Héctor 等[25]利用MCM-41 分离富集磷脂,结果显示介孔材料是简单有效的富集手段。Jiang 等[26]利用MCM-41 对白头翁超声提取液中4 种三萜皂苷进行了预浓缩和含量测定,为介孔材料在药物分离领域的应用提供了理论支持,为中药复杂体系中痕量化合物的提取和测定提供了参考。

本文利用MCM-41 对酶解单环刺螠体壁多糖进行富集,同时进行了单环刺螠体壁多糖的组成分析,从动力学和热力学角度研究了MCM-41 对多糖的吸附。本文的研究结果将简化多糖的分离过程,降低分离成本,同时还将扩大介孔材料在海洋食品产业中的应用,为糖类物质的富集分离提供一定的理论指导。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

新鲜单环刺螠 大连黑石礁水产市场;单糖标准品(岩藻糖、半乳糖、木糖、鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸) Sigma-Aldrich 公司;介孔材料MCM-41 南京先丰纳米材料科技有限公司;乙腈、甲醇 色谱纯,美国Muskegon 公司;其他试剂均为国产分析纯。

旋转培养混合器 杭州米欧仪器有限公司;iMark 酶标仪 美国伯乐公司;ScientZ-30D 型真空冷冻干燥机 宁波新芝生物科技有限公司;Nexus470 FT-IR 型傅里叶红外光谱仪 美国Nicolet 公司;1260 型高效液相色谱仪 美国Agilent 公司;PANalytical X’Pert PRO 型X-射线衍仪荷兰帕纳科公司;ASAP-2020 型物理吸附仪 美国Micromeritics 公司。

1.2 实验方法

1.2.1 单环刺螠体壁多糖的提取 新鲜的单环刺螠经清洗、去除内脏、冻干、搅碎、脱脂(3 倍体积的丙酮-石油醚(1:1)浸泡过夜,离心取沉淀)、再次冻干得到单环刺螠体壁粉末。根据酶解法[21]提取多糖,按1:20 g/mL 料液比,调节pH1.9,利用胃蛋白酶在37 ℃酶解4 h。酶解结束后100 ℃水浴加热15 min 灭酶。4 ℃条件下8000 r/min 离心15 min,取上清液,加入上清液三倍体积的95%乙醇(醇沉浓度为80%),4 ℃静置过夜,再次8000 r/min离心15 min,取沉淀部分,经过冷冻干燥得到单环刺螠体壁多糖混合物(标记为PSBWU)。

1.2.2 PSBWU 组成分析

1.2.2.1 PSBWU 总糖含量分析 参考焦绪栋等[21]的方法,稍作修改。采用硫酸-苯酚法对上述多糖混合物的总糖含量进行测定,多糖样品被硫酸水解为单糖,脱水后生成糖醛酸衍生物,与苯酚生成淡黄色化合物。准确称取葡萄糖10 mg,用蒸馏水溶解定容至100 mL 作为标准品母液。分别吸取母液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 于试管中,蒸馏水分别补充至1 mL,摇匀并依次加入1.0 mL 6%苯酚溶液和5.0 mL 浓硫酸,混合均匀,室温放置25 min。于波长490 nm处测定其吸光度绘制标准曲线。准确称取多糖混合物10 mg,蒸馏水定容至10 mL 获得粗多糖溶液,取1.0 mL 按上述方法测定,根据标准曲线计算总糖含量。PSBWU 总糖得率如式(1)所示。(标准曲线方程:y=0.0089x+0.0649,R2=0.9969)

式中,c 表示多糖质量浓度,g/mL;V 表示提取液体积,mL;m 表示PSBWU 干粉质量,g。

1.2.2.2 PSBWU 硫酸基团分析 参考焦绪栋等[21]的方法,稍作修改。采用明胶-氯化钡法对多糖样品硫酸基团含量进行测定。准确称取一定量K2SO4,以1 mol/L HCl 溶解后定容至100 mL 作为硫酸根标准贮备液。分别吸取母液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL 于试管中,1 mol/L HCl 分别补至0.2 mL,摇匀并依次加入3.8 mL 三氯乙酸和1.0 mL 氯化钡溶液,混合均匀,室温放置20 min。于波长360 nm处测定其吸光度A1,以1.0 mL 明胶溶液代替氯化钡溶液测吸光度A2,以硫酸根数(μg)为横坐标,吸光度值(A1-A2)为纵坐标绘制标准曲线。准确称取多糖混合物70 mg,蒸馏水定容至50 mL,加入10 mL 1 mol/L 盐酸 100 ℃水浴水解3 h,冷却后,用1 mol/L盐酸溶液补至刻度线,滤纸过滤除去不溶物,得样品溶液。取1.0 mL 按上述方法测定,根据标准曲线计算硫酸基团含量。(标准曲线方程:y=0.2626x+0.007,R2=0.9905)

1.2.2.3 PSBWU 蛋白质含量分析 采用考马斯亮蓝G-250 法测定蛋白含量。考马斯亮蓝与蛋白质的疏水微区相结合,形成复合物呈蓝色。准确称取牛血清蛋白10 mg,用蒸馏水溶解定容至100 mL 作为标准品母液。分别吸取母液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于试管中,蒸馏水分别补充至1 mL,摇匀并依次加入考马斯亮蓝G-250 溶液,混合均匀,室温静置2~5 min。于波长595 nm 处测定其吸光度绘制标准曲线。准确称取多糖混合物10 mg,蒸馏水定容至10 mL 获得粗多糖溶液,取1.0 mL 按上述方法测定,根据标准曲线计算蛋白质含量。(标准曲线方程:y=2.7757x+0.4484,R2=0.9994)

1.2.2.4 PSBWU 单糖组成分析 采用完全酸水解后PMP 柱前衍生高效液相色谱法分析其单糖组成[27]。称取一定量的单糖标准品(甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸)、内标物乳糖,配制成浓度为1.0 mmol/L 混合溶液。将待测样品溶解于超纯水中并溶胀过夜,利用三氟乙酸(TFA)溶液进行酸解,酸解后的样品经1-苯基-3-甲基-吡唑啉酮(PMP)衍生化。衍生反应终止后利用三氯甲烷反复萃取,除去溶液中的有机相,过水系膜,衍生样品利用高效液相色谱分析。

色谱条件:Agilent 1260 高效液相色谱仪,色谱柱Agela·Venusil XBP-C18,二极管阵列检测器(diode array detector,DAD)(245 nm),流动相A 为15%乙腈+50 mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH6.0),流动相B 为40%乙腈+50 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液(pH6.0)。进样量为20 μL,流速为1.0 mL/min,柱温为30 ℃。

1.2.2.5 PSBWU 红外谱图分析 通过傅里叶变换红外光谱(FT-IR)测定PSBWU的结构和官能团。测定参数:背景扫描次数32 次;扫描范围400~4000 cm−1,分辨率4.0 cm−1检测器:氘化三甘氨酸硫酸酯检测器(deuterated triglycine sulfate detector detector,DTGS),干燥KBr 和多糖样品按照1:100 比例混合研磨均匀压片。

1.2.3 介孔材料MCM-41 表征 利用荷兰PANalytical X’Pert PRO 型X-射线衍仪,通过小角X 线衍射验证材料是否含有介孔结构。采用Cu,Kα射线(λ=1.54 Å),石墨单色器,Ni 滤波,管电压40 kV,管电流40 mA,扫描速度5(°)/min,扫描范围0.5°~5°。

采用美国Micromeritics 公司ASAP-2020 型物理吸附仪上测定MCM-41的比表面积和孔径分布。测量前MCM-41 样品在200 ℃下抽真空加热预处理3 h,以He 为介质测量样品管自由体。然后在液氮温度(77 K)下按照固定程序进行N2物理吸附和脱附测试测定MCM-41的孔结构。N2分子横截面积取0.162 nm2。通过BET(Brunauer-Emmett-Teller)模型计算材料的比表面积,利用BJH(Barret-Joyner-Halenda)模型通过脱附曲线计算材料的平均孔径。

1.2.4 PSBWU 在MCM-41 上的吸附动力学 称取40 mg MCM-41,孵育溶液分别为30 mL pH3.0 磷酸缓冲溶液、pH8.0 磷酸缓冲溶液以及去离子水,超声溶解5 min。加入30 mg 多糖样品,利用旋转培养混合器分别振荡吸附,分别在0.5、1、1.5、2、3、5、7、9 h,吸取1 mL 吸附溶液,以10000 r/min的转速离心10 min,收集上清液。吸取0.1 mL 上清液,用苯酚-硫酸法测定上清液中的多糖含量。利用差值法计算得到多糖在MCM-41 上的吸附量Q(mg PSBWU/g MCM-41),如式(2)所示。

式中,m 表示MCM-41的质量,g;V 表示吸附液体积,mL;C0和C 分别表示初始溶液和吸附后上清液中多糖的浓度,mg/mL。

通过准一级(PFO)和准二级吸附动力学(PSO)模型进行吸附动力学拟合[28−30],如式(3)和式(4)所示。

式中,Qt表示t(min)时刻的吸附量,mg/g;Qe表示平衡吸附量,mg/g;k1(min−1)、k2(g·mg−1·min−1)分别表示PFO 和PSO 常数;ν0=k2Qe2表示PSO 吸附初速度。

1.2.5 PSBWU 在MCM-41 上的吸附热力学 孵育溶液为去离子水,其他条件与动力学研究相同,进行吸附等温线测定,吸附时间为3 h,多糖初始浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.5、0.75、1、1.5 mg/mL。

通过单层吸附的Langmuir 模型(式(5))和多层吸附的Freundlich 模型(式(6))对热力学吸附数据进行拟合[31−32]。

式中,Qe表示某浓度下材料对目标物的平衡吸附容量,mg/g;Ce表示达到吸附平衡时,溶液中残留的目标物浓度,mg/mL;KL表示吸附结合常数,mL/mg;Qmax表示材料对目标物的最大吸附容量,mg/g;Kf和n 是Freundlich 模型常数。

1.2.6 MCM-41 吸 附PSBWU的洗脱 MCM-41与多糖样品振荡孵育3 h 后,离心收集吸附PSBWU的MCM-41 材料,分别利用20%ACN、1 mol/L NaCl、10% SDS 洗涤三次,离心测定上清液多糖洗脱量。洗脱率为洗脱量与吸附量的比值。如式(7)所示。

式中,C(mg/mL)是洗脱液中PSBWU的浓度,V(mL)是洗脱液的体积,m(mg)是MCM-41的质量,Q(mg/g)是PSBWU 在MCM-41的吸附量。

1.3 数据分析

试验数据用平均值±标准差(means±SD)表示,采用SPSS20.0 软件进行单因素方差分析(ANOVA)。

2 结果与分析

2.1 PSBWU的组成分析

测得PSBWU的总糖含量为(78.82%±1.40%),硫酸根含量为(0.52%±0.06%),蛋白含量为(10.5%±1.07%)。杨玉品等[33]通过80 ℃热水提单环刺螠体壁多糖,总糖含量为30.3%,蛋白含量为53.1%;朱佳利等[19]通过碱提联合两步酶解法提取单环刺螠体壁多糖,通过Seveg 法除蛋白后得到单环刺螠多糖,分离后得到两个组分UP-1 和UP-2,其中UP-1 不含有蛋白和硫酸基,UP-2 总糖含量67%,蛋白含量3%,硫酸根的含量为7.4%。动物中含有丰富的蛋白质,很多动物多糖和蛋白质通过共价键相连接,蛋白酶水解法和热水浸提法是目前动物多糖提取过程中使蛋白质和多聚糖分离广泛应用的两种方法,本文通过动物来源的胃蛋白酶酶解提取多糖,可以实现蛋白和多糖的分离。

将多糖完全酸水解后,通过PMP 柱前衍生结合高效液相色谱法分析其单糖组成。图1 分别显示了单糖标准品和PSBWU的PMP-HPLC 图谱。可以看出,PSBWU的单糖主要有葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖等。通过内标法计算了PSBWU 中各单糖的摩尔含量分别为葡萄糖95.37%、半乳糖1.18%、岩藻糖0.72%、木糖0.70%、鼠李糖0.67%、甘露糖0.57%、半乳糖醛酸0.48%、葡萄糖醛酸0.30%。

图1 单糖标准品和PSBWU的 PMP 衍生物液相洗脱图Fig.1 Liquid-phase elution diagram of PMP derivative of monosaccharide standard and PSBWU

PSBWU的红外光谱结构如图2 所示。从图可以看出,3441 cm−1的信号峰是多糖O-H的伸缩振动吸收峰,2936 cm−1附近的吸收峰是糖环中次甲基和亚甲基中C-H的伸缩振动吸收峰,1030 cm−1吸收峰是多糖环醚C-O-C 伸缩振峰。以上吸收峰是糖类红外光谱的特征吸收峰。2000~500 cm−1是多糖的指纹区[34]。1610 cm−1和1417 cm−1附近出现明显的吸收峰是C=O 非对称和对称伸缩振动引起的,表明PSBWU 中含有己糖醛酸组分,与单糖分析结果含有葡萄糖醛酸一致。1026 cm−1和1076 cm−1的吸收信号是C-O 伸缩振动的特征吸收峰,由于C-H、CO 和C-O-C 同时存在,表征了吡喃糖环的伸缩振动峰。在1238 cm−1的弱吸收峰对应O-SO3中的S=O键的伸缩振动,845 cm−1是C-O-S 伸缩振动峰,也说明多糖结构中存在硫酸基。

图2 PSBWU的红外光谱图Fig.2 FT-IR spectrum of the PSBWU

2.2 介孔材料MCM-41的表征

图3(a)为本研究中使用的MCM-41 介孔材料的X 射线衍射图。从图中可以看出,在1.5°~5o范围内出现3 个明显的衍射峰,分别对应于(100),(110),(200)晶面,说明介孔材料MCM-41 具有规则的六方孔结构,这与文献报道的MCM-41 介孔材料的XRD谱图一致[23]。

图3(b)为介孔材料MCM-41的N2吸附脱附等温线,图3(c)为孔径分布图。按照IUPAC 分类标准,吸附等温线属于IV 型,具有明显的回滞环,这可能是N2分子在介孔内发生毛细管凝聚所致[35]。吸附等温线中吸附陡增点所对应的相对压力P/P0值表示样品的孔径大小。通过BET 模型计算得到MCM-41的比表面积1036 m2/g,利用BJH 模型通过脱附曲线计算得到平均孔径为3.85 nm,孔容1.25 cm3/g。

图3 MCM-41的XRD 图谱(a)、N2 吸附-脱附等温线(b)和孔径分布(c)Fig.3 X-Ray Diffraction(a),N2 adsorption-desorption isotherms(b)and pore size(c)of MCM-41

2.3 介孔材料MCM-41 吸附PSBWU的动力学研究

在多糖浓度为1 mg/mL、孵育溶液分别为水、pH3.0、pH8.0的磷酸缓冲溶液时,介孔材料MCM-41 对PSBWU的不同时间的吸附结果如图4 所示。从图中可以看出,随着吸附时间延长,吸附量上升。在不同pH 值孵育溶液下,3 h 内都基本达到吸附平衡。其中孵育溶液为水时介孔材料MCM-41的吸附量最大,最高可达350 mg/g。MCM-41的表面含有大量羟基,PSBWU 主要有葡萄糖组成,因此多糖和MCM-41 之间靠亲水作用、氢键作用以及静电作用进行吸附,在碱性或酸性条件下,由于亲水作用被抑制、氢键作用被削弱、静电排斥等原因,吸附量下降。为了量化研究介孔材料MCM-41的动力学吸附行为,将动力学数据带入模型,拟合结果如表1 所示,通过对比拟合系数R2发现,准二级速率方程的线型相关系数R2>0.99,且拟合后Qe与实验值接近,说明MCM-41的动力学吸附行为符合准二级吸附动力学模型(PSO)假设条件。准二级反应动力模型不仅包括吸附用的外表面扩散、表面吸附等,还包含了分子颗粒内部扩散的过程,与准一级动力学模型相比,该模型可以更确切地描述MCM-41 对PSBWU的吸附反应过程。

图4 MCM-41 对PSBWU的吸附时间曲线Fig.4 Adsorption time curves of the PSBWU on MCM-41

表1 PSBWU 在MCM-41 上的动力学吸附数据拟合Table 1 Kinetic adsorption data fitting of the PSBWU on MCM-41

通常,吸附过程都由以下吸附步骤组成:(i)外扩散,溶质分子从水相主体扩散到吸附剂颗粒的表面,(ii)颗粒内扩散,表面吸附的溶质分子向颗粒内部的孔隙扩散,(iii)吸附,溶质分子在内部吸附位点吸附[36]。一般,内部吸附点位的吸附较为迅速因而可以被忽略。因此,吸附速率控制步骤取决于外扩散或颗粒内扩散的快慢。若颗粒内扩散是吸附的速率控制因素,吸附量和时间的关系符合方程式(8)[37−38]。

式中,Qt(mg/g)是t(min)的吸附量,C(mg/g)为与边界层厚度相关的系数,ki(mg·g−1·min−0.5)为内扩散速率常数。当Qt与t0.5呈良好的线性关系且通过原点时,说明颗粒内扩散过程是吸附速率的唯一控制步骤。

由图5 为Qt与t0.5的关系图可以发现,曲线由多条线段组成,且不过原点,说明颗粒内扩散不是唯一的控制步骤,外扩散与内扩散均在其中起作用。吸附过程由两步组成,第一步快速吸附过程由多糖与表面活性位点的结合,第二步缓慢吸附过程由于吸附位点饱和使得吸附逐渐达到平衡。拟合方程中C 值由第一阶段的98.473 mg/g 增大至第二阶段的247.67 mg/g,说明随着吸附的进行边界层厚度在增加[38]。

图5 Qt 与t0.5的关系图Fig.5 The plots of adsorption capacity Qt versus t0.5

2.4 介孔材料MCM-41 吸附PSBWU的热力学研究

介孔材料MCM-41 对PSBWU的吸附热力学行为如图6 所示。随着样品浓度升高,吸附量也随之升高。为了量化研究介孔材料MCM-41 对PSBWU的热力学吸附行为。

图6 MCM-41 对不同浓度PSBWU的吸附量Fig.6 Adsorption of PSBWU with different concentrations on MCM-41

拟合结果如表2 所示。通过对Langmuir 模型回归以及Freundlich 模型回归的拟合发现,二者均有较好的回归效果,其中,Langmuir 模型拟合系数大于0.99,表明该方程更符合MCM-41 对PSBWU的吸附过程,同时说明MCM-41的吸附过程主要为单分子层并伴随着多分子层的吸附。Freundlich 模型中参数n 与吸附强度、和吸附剂-吸附质相互作用有关,n 值大于1,说明PSBWU 易于吸附在MCM-41的表面活性位。

表2 PSBWU 在MCM-41 上的热力学吸附数据拟合结果Table 2 Langmuir adsorption isotherm model fitting of adsorption isotherm of the PSBWU on MCM-41

2.5 吸附在MCM-41 上的单环刺螠体壁多糖的脱附

不同洗脱剂(20%ACN 溶液、1 mol/L NaCl、10%SDS)对吸附在MCM-41 上的单环刺螠体壁多糖的脱附结果,如图7 所示。二氧化硅材料MCM-41 和多糖均含有丰富的羟基,两者均为亲水性物质,10%SDS 具有比水更强的极性,能够破坏MCM-41 与多糖之间的氢键作用,从而能够将吸附在MCM-41 表面的单环刺螠体壁多糖脱附;由于MCM-41 与多糖之间的静电作用力较弱,因此离子型洗脱剂NaCl的洗脱能力有限;MCM-41 与多糖均为亲水性物质,两者间的疏水作用力很小,因此ACN 洗脱能力较低。目前的洗脱率相对较低,推测可能是因为MCM-41 表面拥有大量的羟基,与多糖作用力较强,不易洗脱。张洪坤[39]以AB-8 型大孔树脂作为吸附材料,对茯苓多糖进行动态吸附-洗脱,茯苓粗多糖回收率为75.4%。相对于本实验结果,分析原因可能是因为吸附质与吸附剂的结构不同,两者间的作用力不同,导致脱附效果存在差异。

图7 不同洗脱液剂的洗脱效果Fig.7 The elution effect of different eluents

经MCM-41 吸附、10%SDS 洗脱的多糖透析脱盐后经PMP 柱前衍生结合高效液相色谱法分析单糖组成,如图8 所示。与图1(b)对比可以看出,洗脱后PSBWU的单糖含量发生了变化,洗脱后PSBWU中各单糖的摩尔含量分别为葡萄糖65.78%、半乳糖13.76%、岩藻糖8.72%、木糖7.44%、鼠李糖1.88%、甘露糖1.65%、半乳糖醛酸0.42%、葡萄糖醛酸2.23%。可以看出洗脱后单糖组成发生变化,这可能是由于不同单糖组成的多糖与介孔材料MCM-41 间的作用力不同引起的。通过分析,总糖的纯度较富集前提高了51.14%,这可能是因为蛋白类物质在极性的MCM-41 表面吸附较弱,而极性的糖类物质在极性的MCM-41 表面进行了选择性富集,所以富集后多糖纯度提高。

图8 PSBWU 洗脱后的PMP 衍生物液相洗脱图Fig.8 Liquid-phase elution diagram of PMP derivative of PSBWU after elution

3 结论

针对目前海洋活性多糖分离步骤繁琐、多糖得率低、损失严重等问题,本文分析研究了单环刺螠多糖的组成并发展了基于介孔材料MCM-41的单环刺螠多糖的富集新方法。研究结果显示多糖中总糖含量为(78.82%±1.40%),蛋白含量为(10.5%±1.07%),主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖和木糖等单糖组成,O-H、C-O-C、C=O、S=O 等特征基团说明单环刺螠体壁多糖中含有糖醛酸组分,且存在硫酸基的取代。介孔材料MCM-41 对单环刺螠体壁多糖的吸附量为350 mg/g,吸附动力学符合准二级吸附动力学模型,吸附过程由外部扩散和颗粒内扩散控制;多糖在MCM-41的吸附过程主要为单分子层并伴随着多分子层的吸附。在后续研究中,将重点研究多糖与MCM-41 表面基团的相互作用,筛选合适的洗脱剂,改进洗脱方法,提高洗脱率。

猜你喜欢

单环单糖介孔
响应面法优化开发单环刺螠罐头食品
pH、氨氮和亚硝酸盐对单环刺螠稚螠耗氧率和排氨率的影响
不同炮制工艺熟地黄多糖单糖分析及其对卵巢颗粒细胞的影响
杂原子介孔MCM-41分子筛的制备及其对含喹啉模拟柴油的吸附脱氮性能
海藻多糖的单糖组成对体外抗氧化活性的影响
锂离子电池有序介孔材料研究进展
谷胱甘肽功能化有序介孔碳用于选择性分离富集痕量镉
一类具(拟-)Baer性的特殊Morita Context环
巧断银链