流感病毒抗原检测在流感筛查中的应用效果研究

熊倩妤，杨兴林，洪章萍，屠大朋，杨 俊

（贵阳市公共卫生救治中心检验科，贵州 贵阳 550004）

流行性感冒（流感）是指由流感病毒感染引起的一种急性呼吸道传染病。流感病毒具有传染性强、易变异、传播迅速等特点。流感在学校、托幼机构等人群聚集场所可大规模爆发，严重危害人们的健康[1]。世界卫生组织报道，每年全球有20%～30%的儿童和5%～10%的成年人会发生季节性流感，其中有300 万～500 万例患者为重症患者，有29 万～65 万人可因患此病死亡[2]。引起流感的常见病毒有甲型流感病毒、乙型流感病毒和丙型流感病毒。近年来，甲型流感（由甲型流感病毒感染引起的流感）和乙型流感（由乙型流感病毒感染引起的流感）在世界各地的流行趋势均有所上升[3]。建立快速的流感检测方法，可为临床诊疗工作的开展提供依据，提高抗病毒药物应用的合理性，也利于对流感疫情采取更有效的控制措施。本文主要是探讨流感病毒抗原检测在流感筛查中的应用效果。

1 资料与方法

1.1 基线资料

选择贵阳市公共卫生救治中心2019 年11 月至2020 年9 月期间接诊的5442 例发热（体温＞37.3℃）患者作为研究对象。在这些患者中，有男性3083 例，女性2359 例；其年龄最大为97 岁，最小为1 个月，平均年龄为12.2 岁。

1.2 方法

1.2.1 流感病毒抗原检测 对患者进行流感病毒抗原检测的方法是：采集其鼻咽拭子，标本采集后立即置于消毒干燥、严格密封的塑料管中保存并送检，若不能立即送检需在2℃～8℃的冷藏柜中保存（最长可保持8 h）。采用胶体金免疫层析法和甲型/ 乙型流感病毒抗原检测试剂盒（由广州万孚生物技术有限公司提供）对标本进行流感病毒抗原检测，在15～20 min 内观察检测结果。整个检测必须在生物安全柜中进行。将剩余的样本提取液标注好患者姓名等信息后放入－ 80℃的冰柜中保存待检（核酸检测）。

1.2.2 核酸检测 采用逆转录-聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）法对患者进行核酸检测，方法是：以磁珠法提取病毒的核酸，RNA 提取仪为EX2400 核酸自动提取仪，严格按照试剂盒（由上海之江生物有限公司提供）的说明书提取病毒的核酸。用罗氏Z480 扩增仪对病毒的核酸进行基因扩增，严格按试剂盒（试剂盒为湖南圣湘生物有限公司提供的甲型、乙型流感病毒核酸检测试剂盒）的说明书进行操作。整个检测必须在生物安全柜中进行。当Ct值＜38时表示检测结果呈阳性，当Ct值≥40 时表示检测结果呈阴性，当Ct值介38～40 之间时需进行复检。

1.3 观察指标

观察对5442 例患者进行流感病毒抗原检测的阳性检出率及检测结果呈阳性的患者性别及年龄的分布情况。统计甲型、乙型流感病毒抗原检测的阳性检出率。在5442 例患者中随机抽取153 例患者进行流感病毒抗原检测及核酸检测，观察其检测结果。统计用流感病毒抗原检测诊断153例患者甲型流感及乙型流感的准确率、特异度及敏感度。准确率=（真阳性例数+真阴性例数）/ 总例数×100%。灵敏度=真阳性例数/（真阳例数+假阴性例数）×100%。特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%。

1.4 统计学方法

用SPSS 25.0 软件处理本研究中的数据，计数资料用%表示，用χ² 检验，计量资料用表示，用t检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 进行流感病毒抗原检测的阳性检出率及检测结果呈阳性的患者性别及年龄的分布情况

对5442 例患者进行流感病毒抗原检测的结果显示，其中检测结果呈阳性的患者有519 例，阳性检出率为9.54%。在519 例检测结果呈阳性的患者中，男女患者的占比相比（P＞0.05）；不同年龄的患者相比（P＜0.05），其中年龄为6～18 岁患者的占比高于其他年龄段患者的占比（P＜0.05）。详见表1。

表1 进行流感病毒抗原检测的阳性检出率及检测结果呈阳性的患者性别及年龄的分布情况

2.2 甲型、乙型流感病毒抗原检测的阳性检出率

对5442 例患者进行流感病毒抗原检测的结果显示，其中甲型流感病毒抗原呈阳性的患者有388 例，阳性检出率为7.13%；乙型流感病毒抗原呈阳性的患者有131 例，阳性检出率为2.41%。5442 例患者甲型流感病毒抗原的阳性检出率高于乙型流感病毒抗原的阳性检出率（P＜0.05）。详见表2。

表2 甲型、乙型流感病毒抗原检测的阳性检出率

2.3 随机抽取153 例患者进行流感病毒抗原检测及核酸检测的结果

随机抽取153 例患者进行流感病毒抗原检测的结果显示，其中甲型流感病毒抗原呈阳性的患者有86 例；对其进行核酸检测的结果显示，其中甲型流感病毒抗原呈阳性的患者有69 例。随机抽取153 例患者进行流感病毒抗原检测的结果显示，其中乙型流感病毒抗原呈阳性的患者有21 例；对其进行核酸检测的结果显示，其中乙型流感病毒抗原呈阳性的患者有24 例。详见表3、表4。

表3 甲型流感病毒抗原检测及核酸检测的结果（例）

表4 乙型流感病毒抗原检测及核酸检测的结果（例）

2.4 用流感病毒抗原检测诊断其中153 例患者流感的准确率、特异度及敏感度

用流感病毒抗原检测诊断其中153 例患者甲型流感的准确率、特异度、敏感度分别为86.27%、77.38%、97.10%。用流感病毒抗原检测诊断其中153 例患者乙型流感的准确率、特异度、敏感度分别为92.81%、96.90%、70.83%。

3 讨论

流感是全球重点监测的急性传染病之一，具有起病急、传染性强、传播速度快等特点，可引起严重的公共卫生问题[4]。对流感病毒进行快速检测对于防控流感疫情至关重要。目前，临床上检测流感病毒的方法有病毒培养法、流感病毒抗原检测法、核酸检测法等。病毒培养法是临床上诊断流感最准确的方法，但采用该方法进行细胞培养鉴定的周期长达14 d 左右，在此期间难以为临床用药提供指导，故该检测法在临床应用中受限较为严重。用核酸检测法诊断流感的特异度和灵敏度较高，但需要使用昂贵的设备，且对实验室的条件要求严格，很多医疗机构和流感检测点都不具备相应的检测人员和检测设备[5]。采用流感病毒抗原检测法诊断流感具有操作简单、快捷、能在短时间（20 min）内快速作出定性诊断等优点[6]。本研究的结果显示，5442 例患者甲型流感病毒抗原的阳性检出率高于乙型流感病毒抗原的阳性检出率（P＜0.05）。究其原因主要是，2019 年11 月至2020 年9 月期间我中心的流感类型以甲型流感为主。与乙型流感病毒相比，甲型流感病毒具有更强的变异性，故甲型流感更易流行及造成严重的后果[7-8]。

本研究的结果证实，用流感病毒抗原检测诊断甲型流感和乙型流感的准确率、特异度、敏感度均较高，该方法可用于对患者进行流感筛查。