防治山东省特色小宗作物樱桃褐斑病试验研究

薛燕楠，张国福，信洪波，薛 雯，金 岩，夏晓明*

(1.山东农业大学植物保护学院，山东 泰安 271018；2.山东省农药检定所，山东 济南 250100)

樱桃(Prunusavium)属于蔷薇科落叶灌木果树，果实色泽亮丽，富含多种维生素，含铁量居于水果之首，素来深受广大消费者喜爱。在中国，樱桃的主要产地有辽宁、山东、浙江、河南、甘肃等地，种植地域广[1]。根据中国园艺学会樱桃分会统计，自2006年起，甜樱桃的栽培面积由4万hm2增长至18万hm2，平均每年增加1.4万hm2[2]。随着樱桃种植面积的不断扩大，樱桃病害呈现逐年加重的趋势，其中樱桃褐斑病成为了樱桃叶片的主要病害之一。樱桃褐斑病是一种真菌性病害，一般在5～6月份发病，7～9月份发病最为严重，甚至造成全树8～9月份二次开花，严重影响树势和安全越冬[3]。樱桃褐斑病在侵染初期叶表着生较小的紫色斑点，后扩大为褐色圆形斑，发病中后期斑点融合，造成叶片穿孔和早落，导致光合作用下降，树势衰弱，继而影响翌年的樱桃产量[4]。

目前，田间生产中对真菌性作物病害的防治主要以化学防治为主，但我国尚没有登记用来防治樱桃褐斑病的农药品种，农民用药存在安全隐患[5]。山东省农药检定所为解决这一问题，组织开展了10%苯醚甲环唑水分散粒剂和80%代森锰锌可湿性粉剂防治樱桃褐斑病的室内活性测定、安全性及田间药效试验，并组织企业开展联合登记工作，以期为筛选防治樱桃炭疽病的安全、有效的农药产品提供相关的防治技术依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料 供试菌种：樱桃褐斑病菌(Passaloracircumscissa)，采自山东泰安市郊区，采用常规方法分离。

供试植物品种：红灯、美早、早大果3个品种进行安全性试验，均在同一园，树龄9年，试验区果树生长基本一致。

试验地点：山东省蓬莱市北沟镇上朱潘村、河北省昌黎县两山乡梁各庄村、陕西省杨凌示范区五泉镇桶张村。

1.2 试验药剂 97%苯醚甲环唑原药；95%代森锰锌原药；98%多菌灵原药；10%苯醚甲环唑水分散粒剂；80%代森锰锌可湿性粉剂。

将97%苯醚甲环唑原药用丙酮配制成1×104mg/L苯醚甲环唑母液，备用，使用时用含有0.1%的吐温80水溶液稀释至合适浓度。将95%代森锰锌原药，以白炭黑作填料，实验室内用小型气流粉碎机将代森锰锌制成10%可湿性粉剂，其湿润剂含量5%，细度300目以上，备用。将98%多菌灵原药用少量5N盐酸溶解后，再用NaOH溶液中和，调节pH=5左右，最后加无菌水配制成1%多菌灵的盐酸盐水剂，备用。加工含有5%湿润剂的白碳黑可湿性粉剂，并配制1N NaCl溶液，作为助剂对照，备用。代森锰锌和多菌灵以及助剂对照在使用时用无菌水稀释至合适浓度。

1.3 试验方法

1.3.1 室内活性试验方法 采用菌丝生长速率法，测定3种杀菌剂对樱桃褐斑病菌的抑制作用。在无菌操作条件下，根据试验处理将预先融化、灭菌的72mL PSA培养基定量加入无菌锥形瓶中，从低浓度到高浓度依次定量吸取配好的浓度为设计浓度10倍的各处理药液8mL，分别加入上述锥形瓶中，充分摇匀。然后等量倒入4个直径为9cm的培养皿中，制成相应系列浓度的含药平板。试验设添加不含药剂的处理作空白对照，每处理4个重复。其中，苯醚甲环唑以最高浓度中含有丙酮的0.1%吐温80水溶液作为对照，代森锰锌和多菌灵以最高浓度中所含有的助剂的蒸馏水溶液作为对照。

将在PSA培养基上转接活化后的樱桃褐斑病菌，在无菌条件下用内径为0.5cm的灭菌打孔器从菌落边缘切取菌柄，用接种器将菌饼接种于含药平板中央，菌丝面朝下，盖上皿盖，26±1℃恒温条件下培养7、14、21d，然后用十字交叉法量取菌落直径。通过菌丝生长抑制概率值和药剂浓度对数值之间的线性回归分析， 求出各药剂对菌株的有效抑制中浓度(EC50值)、置信区间及相关系数(r)。

1.3.2 安全性试验方法 试验设10%苯醚甲环唑水分散粒剂1 000、500、250倍液3个剂量，80%代森锰锌可湿性粉剂600、300、150倍液3个剂量。试验共计6个处理，每处理重复4次，每2株树为一个小区，随机区组排列。

试验共施药2次。于樱桃采摘后和雨季前分别对红灯、美早、早大果3个品种进行1次施药。全树均匀喷雾施药，以叶片、枝干均匀着药，稍有药滴下淌为度。

试验共调查2次。分别于第1次施药后1、3、5、7、10d和第2次施药后1、3、5、7、10、14、21d，定性观察对樱桃叶片和嫩稍的影响。

1.3.3 田间药效试验方法 按照(表1)中的试验药液设计浓度，使用机动喷雾器对全树喷雾，叶片正反两面均匀喷雾，施药后以叶片湿润、稍有药滴下滴为宜。每4株树为一小区，随机区组排列，重复4次。于樱桃褐斑病发病前(6月中旬)进行第1次施药，然后于7月中旬和8月中旬再各施药1次，总共施药3次。

表1 试验处理设计

于第3次药后14d调查病害发生情况。每小区调查2株果树，每株分东、南、西、北、中各挂牌1个大小基本一致的枝条(≥10叶片)，调查全部叶片，根据叶片上病斑面积占整个叶面积的百分率分级，调查记录各级病叶数及总叶数。

叶片分级方法：

0级：无病斑；

1级：病斑面积占整片叶面积的<5%；

3级：病斑面积占整片叶片面积6%～10%；

5级：病斑面积占整片叶片面积11%～20%；

7级：病斑面积占整片叶片面积21%～40%；

9级：病斑面积占整片叶片面积>41%或叶片脱落。

1.4 数据统计与分析 按以下公式计算抑菌率(%)：

采用Microsoft Excel 2003统计校正抑菌率，然后采用DPS数据处理软件分别求出试验药剂的毒力回归方程和EC50、EC90以及相关系数。

按下列公式计算安全系数：

按下列公式计算防治效果：

2 结果与分析

2.1 室内活性试验结果 苯醚甲环唑和代森锰锌对樱桃褐斑病菌具有较好的室内活性(表2)。7d调查结果表明，苯醚甲环唑和代森锰锌对樱桃褐斑病菌的EC50分别为0.000 12mg/L和0.79mg/L，EC90分别为0.59mg/L和5.83mg/L。14d调查结果表明，苯醚甲环唑和代森锰锌对樱桃褐斑病菌的EC50分别为0.054 36mg/L和1.32mg/L，EC90分别为0.33mg/L和12.71mg/L。21d调查结果表明，苯醚甲环唑和代森锰锌对樱桃褐斑病菌的EC50分别为0.019 65mg/L和6.41mg/L，EC90分别为0.15mg/L和44.06mg/L。但3次调查结果均表明，对照药剂多菌灵在供试浓度范围内对樱桃褐斑病菌抑制作用不明显，且与浓度变化无相关性。

表2 苯醚甲环唑及代森锰锌对樱桃褐斑病菌的毒力测定结果

续表

2.2 安全性试验结果 10%苯醚甲环唑水分散粒剂对樱桃树安全性试验结果表明(表3)，在对第1次施药后1、3、5、7、10d，第2次施药后1、3、5、7、10、14、21d的定性观察下，10%苯醚甲环唑水分散粒剂对红灯、美早和早大果3个品种的叶片和嫩稍均无变色、坏死、萎蔫、畸形、生长延缓、锈斑等药害症状。综合分析，10%苯醚甲环唑水分散粒剂在稀释1 000、500、250倍液3个高剂量试验浓度下喷雾对樱桃树安全，安全系数为400%。

80%代森锰锌可湿性粉剂对樱桃树安全性试验结果表明(表3)，在600、300、150倍液3个试验浓度剂量下，在第1次施药后1、3、5、7、10d；第2次施药后1、3、5、7、10、14 、21d对叶片和嫩稍的定性观察中均发现，80%代森锰锌可湿性粉剂150倍液，药后3d在3个品种叶片边缘处均产生褐色锈斑现象，但10d后大部分叶片均能逐步恢复，仅个别叶片叶缘呈现焦枯。其他2个浓度处理未发现对红灯、美早和早大果3个品种有变色、坏死、萎蔫、锈斑等明显药害症状表现。综合分析认为：80%代森锰锌可湿性粉剂在稀释600、300、150倍液3个高剂量试验浓度下喷雾后，600、300倍液2个浓度处理对樱桃树安全。尽管150倍液在药后3d时，叶片呈现轻微药害症状，但在10d后大部分叶片均能逐步恢复。安全系数为200%。

2.3 田间药效试验结果分析 田间药效试验结果表明(表3～4)，试验药剂10%苯醚甲环唑水分散粒剂和80%代森锰锌可湿性粉剂在樱桃褐斑病发病前进行全树均匀喷雾处理，对樱桃褐斑病表现出较好的防治效果。且随着用药量和用药次数的增加，防效呈现升高趋势，表现出较好的保护和一定的治疗效果。

表3 10%苯醚甲环唑水分散粒剂防治樱桃褐斑病田间药效试验结果

续表

第3次药后14d，10%苯醚甲环唑水分散粒剂防治樱桃褐斑病的防效在64.77%～92.47%之间；80%代森锰锌可湿性粉剂防治樱桃褐斑病的防效在62.62%～90.61%之间。2种试验药剂的防效均高于对照药剂或与其相当。综合3地田间药效试验数据显示，10%苯醚甲环唑水分散粒剂和80%代森锰锌可湿性粉剂是防治樱桃褐斑病的高效药剂，能有效的防治樱桃褐斑病。

表4 80%代森锰锌可湿性粉剂防治樱桃褐斑病田间药效试验结果

3 结论与讨论

苯醚甲环唑是三唑类脱甲基抑制剂，具有良好的内吸性，兼具保护和治疗作用，在杀菌剂中安全性比较高，防病谱广，广泛应用于果树、蔬菜等作物，可以有效防治子囊菌门、半知菌门和担子菌门引起的病害。

代森锰锌属硫代氨基甲酸酯类高效、低毒、广谱的保护性杀菌剂。在杀菌剂中安全性比较高，防病谱广，广泛应用于果树、蔬菜和粮食等作物，可以有效防止卵菌、子囊菌门、半知菌门和担子菌门引起的病害，且不易产生抗性[6]。

本研究室内活性测定结果表明，苯醚甲环唑和代森锰锌对樱桃褐斑病菌具有较高的室内活性。安全性试验表明，10%苯醚甲环唑水分散粒剂对樱桃树安全性很高，安全系数为400%。80%代森锰锌可湿性粉剂对樱桃树的安全性也较高，除最高剂量150倍液在药后3d观察到叶片边缘部位产生褐色锈斑，到10d后逐步恢复外，其他两个浓度处理没有观察到变色、坏死、萎蔫、畸形、生长延缓、锈斑等药害症状。安全系数为200%。10%苯醚甲环唑水分散粒剂的安全性要>80%代森锰锌可湿性粉剂。田间在应用80%代森锰锌可湿性粉剂防治樱桃褐斑病时，不得超量使用。

田间药效试验结果表明，10%苯醚甲环唑水分散粒剂和80%代森锰锌可湿性粉剂在试验剂量下防效均可达到80%左右，且持效性较好。综合试验结果表明，10%苯醚甲环唑水分散粒剂和80%代森锰锌可湿性粉剂均可以做为田间防治樱桃褐斑病的药剂。于樱桃褐斑病发病前或发病初期，采用10%苯醚甲环唑水分散粒剂1 000～2 500倍液或80%代森锰锌可湿性粉剂600～1 200倍液对樱桃全树均匀喷雾，间隔20～30d施药1次，连续施药3次，可有效的防治樱桃褐斑病。同时，注意交替用药，延缓病菌抗药性的产生和发展。

樱桃被誉为早春第一果[7]，采摘完毕后随着气温升高病虫害随之而来，果农常常忽视摘后对果园的管理，使得病虫害逐年积累，树势衰弱，樱桃产量不佳。因此，应当大力开展防治樱桃病虫害的药剂筛选工作，强化对樱桃病虫害防治技术的宣传力度。