自发性脑出血患者血清CXCL1、CXCR2表达水平及临床意义

张皓春，陈忠，文泽贤，刘春平，蒲国明，刘素君

自发性脑出血(spontaneous intracerebral hemorrhage，SICH)是由非外伤性脑实质血管破裂引起的最常见脑血管疾病之一，具有较高的病死率[1]。脑水肿是SICH发生后的重要继发性病变，脑水肿的形成会导致脑组织颅内压升高，造成患者神经功能障碍，威胁患者生命[2]。研究脑损伤相关机制，可能为SICH病情程度的判断和预后预测提供生物标志物。研究表明，炎性细胞因子在SICH后继发性损伤过程中有重要的作用[3]。趋化因子是一种抗炎细胞因子，CXC趋化因子配体1(CXCL1)是与SICH有关的中枢基因，在SICH中表达显著上调[4]。CXC趋化因子受体2(CXCR2)是CXCL1的受体，研究表明CXCL1/CXCR2可促进顺铂诱导肾损伤过程中的炎性反应[5]。目前还未见CXCL1、CXCR2在SICH中的临床研究，本研究通过检测CXCL1、CXCR2在SICH患者血清中的水平，并分析二者的临床意义，以期为SICH疾病严重程度判断和预后的预测提供理论基础，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年5月—2020年10月达州市中心医院脑血管病科和神经内科收治的125例SICH患者为研究对象(SICH组)，男69例，女56例，年龄45～74(60.35±7.14)岁；病程0.5～5.6(3.15±1.42)h；病因：高血压性脑出血42例，脑动脉硬化性脑出血59例，其他24例；出血部位：丘脑42例，基底节区75例，其他8例；基础疾病：高血压41例，糖尿病35例，高脂血症31例；用药史：服用他汀类药物35例，抗血小板药物42例。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分[6]评价SICH患者神经功能缺损程度：0～4分为轻度42例，5～20分为中度47例，>20分为重度36例[7]；根据脑出血量将患者分为小量出血(<15 ml)52例，中量出血(15～30 ml)41例，大量出血(>30 ml)32例。同期选取医院体检健康者130例为健康对照组，男71例，女59例，年龄43～75(59.48±7.83)岁。2组研究对象性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准(伦审字2019-0127号)，所有受试者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 SICH患者选择标准 (1)纳入标准：①符合“中国脑出血诊治指南(2019)”中关于SICH的诊断标准[8]；②经磁共振成像和头颅CT证实，且为首次发病；③发病时间<6 h；④临床资料完整。(2)排除标准：①继发性脑出血患者；②合并颅脑损伤等其他原因导致的脑出血；③心、肝、肾等重要脏器疾病患者；④合并免疫性疾病患者；⑤合并恶性肿瘤患者。

1.3 观测指标与方法

1.3.1 酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清CXCL1、CXCR2水平： SICH组于入院当日、健康对照组于体检当日清晨，采集2组研究对象肘静脉血5 ml于离心管中，4℃离心提取血清，于-80℃冰箱中保存待测。采用ELISA双抗体夹心法检测血清中CXCL1、CXCR2水平，严格按照试剂盒说明书进行试验操作。试剂盒均购自武汉菲恩生物科技有限公司。

1.3.2 随访： 对SICH患者出院90 d后采用门诊短期预后随访，随访开始日期为患者出院之日，随访截止日期为2021年2月28日。所有SICH患者均完成随访，无失访。根据改良Rankin量表(mRS)评分[9]评价患者预后，mRS评分0～2分为预后良好亚组78例，mRS评分3～6分为预后不良亚组47例。

2 结 果

2.1 2组受试者血清CXCL1、CXCR2水平比较 与健康对照组比较，SICH组血清CXCL1、CXCR2水平显著升高(P<0.01)，见表1。

表1 2组受试者血清CXCL1、CXCR2水平比较

2.2 SICH患者不同临床病理特征血清CXCL1、CXCR2水平比较 不同性别、年龄、病程、病因、出血部位及有无高血压史、糖尿病史、高脂血症SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；神经功能缺损程度轻度、中度、重度患者血清CXCL1、CXCR2水平依次升高(P<0.05)；脑出血量小量、中量、大量患者血清CXCL1、CXCR2水平依次升高(P<0.05)；预后不良亚组SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平显著高于预后良好亚组(P<0.01)，见表2。

表2 125例SICH患者不同临床病理特征血清CXCL1、CXCR2水平比较

2.3 SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平相关性分析 SICH患者血清CXCL1与CXCR2水平呈正相关(r=0.714，P=0.000)。

2.4 Logistic回归分析影响SICH患者预后不良的危险因素 以SICH患者预后情况为因变量，以表1、2中P<0.05指标(神经功能缺损程度、脑出血量及血清CXCL1、CXCR2水平)作为自变量进行多因素Logistic回归分析，结果显示脑出血量大及血清CXCL1、CXCR2升高是SICH患者预后不良的危险因素(P<0.01)，见表3。

表3 Logistic多因素回归分析影响SICH患者预后不良的危险因素

2.5 血清CXCL1、CXCR2水平对SICH患者预后不良的预测价值 ROC曲线结果显示，血清CXCL1水平预测SICH患者预后不良的AUC为0.712，血清CXCR2水平为0.714，二者联合为0.823，优于二者单独预测(Z=2.746、2.500，P=0.006、0.012)，见表4、图1。

表4 血清CXCL1、CXCR2水平对SICH患者预后不良的预测价值

注：SICH.自发性脑出血；CXCL1.CXC趋化因子配体1；CXCR2.CXC趋化因子受体2

3 讨 论

脑出血是临床上常见的脑卒中类型，发病机制复杂，高血压是最常见的系统性危险因素，与所有年龄段的发病率和病死率增加有关，随着人口老龄化的加剧及抗凝或抗血小板药物的大量使用，SICH发病率也逐年升高[10]。SICH发病急，且病情进展迅速，治疗不及时会导致患者发生脑损伤或脑死亡等，致死率高，预后差，幸存者可遗留偏瘫、失语等严重残疾，给患者家庭和生活带来沉重的负担[11]。SICH损伤主要包括原发性损伤和继发性损伤，原发性损伤是指SICH发生后，血液在脑组织中迅速聚集，导致颅内压升高，脑组织缺血、缺氧等造成脑组织损伤[12-14]。脑水肿是SICH继发性损伤主要病变类型，在SICH患者神经功能损伤过程中有重要的作用[15]。其损伤机制较为复杂，炎性反应在脑水肿引起神经损伤中占据重要作用，可能是导致SICH患者预后不良的主要因素之一[16]。因此，探讨炎性因子在SICH中的临床意义，可能为发掘SICH预后的生物标志物提供理论基础。

趋化因子是一种大小为8～14 kD，由细胞分泌的小细胞因子或信号蛋白，具有定向细胞趋化作用[17]。趋化因子的生物学效应是由G蛋白偶联的趋化因子受体介导的，CXCL1属于趋化因子中的促炎性细胞因子，CXCR2主要表达于中性粒细胞、单核细胞、CD8+T细胞等细胞表面，是CXCL1主要趋化因子受体，二者相互作用在炎性反应中起重要作用[18]。Fu等[19]研究表明，SICH模型大鼠中CXCL1水平显著高于假手术组。本研究结果表明，SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平显著高于健康对照组，提示CXCL1、CXCR2水平可能与SICH的发生有关。进一步研究表明，血清CXCL1、CXCR2水平升高是SICH发生的危险因素。血源性白细胞和中性粒细胞深入脑实质并破坏血脑屏障，会导致炎性反应、脑水肿及神经损伤的发生[20]。趋化因子和趋化因子受体共同促进免疫细胞募集到中枢神经系统，CXCL1是一种主要募集中性粒细胞的趋化因子，Wu等[21]研究表明，CXCL1、CXCR2对神经炎性反应期间大脑中性粒细胞的募集至关重要。Li等[22]研究表明，CXCL1表达降低会导致中性粒细胞向大脑的浸润减少，从而减少缺血性脑卒中模型小鼠炎性反应，减轻小鼠缺血性脑卒中后脑损伤。猜测CXCL1、CXCR2可能通过引起神经炎性反应，导致SICH患者脑水肿及神经损伤的发生，影响患者预后，具体机制有待进一步研究。本结果提示，血清CXCL1、CXCR2可能是反映SICH疾病严重程度的潜在生物标志物，提示通过动态检测血清CXCL1、CXCR2可能为临床上SICH患者预后的预测提供依据。

综上所述，SICH患者血清CXCL1、CXCR2水平显著升高，且与SICH患者疾病严重程度和预后有关，可能是临床上预测SICH预后的潜在生物标志物。然而本研究纳入病例数较少，结果可能存在一定的误差，下一步需扩大样本量，进一步研究二者在SICH中的临床意义。

利益冲突：所有作者声明无利益冲突

作者贡献声明

张皓春：设计研究方案，实施研究过程，论文撰写；陈忠、文泽贤：提出研究思路，分析试验数据，论文审核；刘春平：实施研究过程，资料搜集整理，论文修改；蒲国明：进行统计学分析；刘素君：课题设计，论文撰写