元宝枫油βCD包合物的制备工艺及质量评价研究

吴丽君 乔天兰 黄鑫康 马远涛

摘 要：目的：本研究优选元宝枫油β环糊精（βCD）包合物的包合方法，为元宝枫油的开发利用提供参考依据。方法：分别采用单因素考察和正交实验法，以元宝枫油和βCD投料比、包合时间、包合温度等为考察因素，以制剂外观、包封率、神经酸含量为评价指标，优选元宝枫油βCD包合物的最佳包合工艺。结果：元宝枫油βCD包合物的最优包合条件：元宝枫油：βCD=1∶8，包合温度50℃，包合时间80min。优选的最佳元宝枫油βCD包合物包封率均在70%以上，每1g包合物中含神经酸1.60mg左右。经紫外可见分光光谱法验证、显微成像观察，制剂外观形态符合要求。结论：元宝枫油β环糊精（βCD）包合物的包合工艺设计合理、制剂质量稳定，后期可开发元宝枫油βCD包合物的口服、外用制剂，为临床应用提供新制剂。

关键词：元宝枫油;βCD包合物;正交實验;气相色谱法;神经酸

元宝枫油源自槭树科槭属（Acer）植物元宝枫[1]（Acer truncatumBge）干燥种仁，2011年3月被原卫生部批准作为新资源食品[2，3]。元宝枫油中不饱和脂肪酸含量90%以上，亚油酸含量约37%，其中神经酸含量约5%[47]。β环糊精包合物（βCylodextrin inclusion）是将药物包于β环糊精大环形的分子空穴中形成分子包合物，可增加药物的溶解度、稳定性，掩盖不良气味，提高生物利用度。因此，本论文研究制备元宝枫油β环糊精包合物，并对其进行质量评价，发挥神经酸促进受损神经组织修复和再生，提高脑神经的活跃程度，防止脑神经衰老的作用[37]。

1 实验部分

1.1 试药与仪器

气相色谱仪：7890AGC;马尔文激光粒度仪：ZEN3600;倒置荧光显微镜：I×73;紫外可见分光光度计：Cary60;台式高速离心机：TG1650WS;数控超声波清洗器：KH7200DB;万分之一电子天平：ALC210.4。

元宝枫油;神经酸标准品：批号D2450010，纯度≥98%;β环糊精（βCD）;无水乙醇、正己烷、丙二醇、甲醇：分析纯;浓硫酸;纯化水等。

1.2 元宝枫油βCD包合物的制备

称取一定量βCD，按1∶20（g/mL）比例加入纯化水，于恒温水浴锅中加热、搅拌使溶解，制备βCD溶液。将其转移至超声仪中，逐滴加入0.5mL元宝枫油，设定超声温度、时间、功率，进行超声。待冷却后放入置于冰箱冷藏24h，减压抽滤得白色粉末，烘箱干燥60℃，5h，粉碎，即得元宝枫油βCD包合物。

1.3 含量测定方法

元宝枫油中神经酸药理活性最强，因此采用气相色谱法建立元宝枫包合物中神经酸的含量测定方法[8]。色谱柱：DB5（30m×0.25mm×0.25μm），载气：高纯氮气，进样器温度：270℃，氢火焰离子化检测器（FID）检测器温度：320℃，分流比：20∶1，程序升温：初始温度为200℃，以2℃/min升至230℃，再以8℃/min升至终温270℃，保持10min。神经酸标准曲线方程为y=29.1x0.18（r=0.9998），精密度、重复性和稳定性实验考察结果RSD<2%，加样回收率95%～105%，RSD<3%，符合要求。

1.4 元宝枫油包合物的质量评价

建立包合物质量评价体系：显微成像分析观察元宝枫油包合物的外观形态;紫外分光光度分析包合情况;气相色谱法测定元宝枫包合物中神经酸的含量;马尔文激光粒度仪测定粒径及Zeta电位;高速离心法考察物理稳定性。

2 结果与讨论

2.1 制备工艺的优化

2.1.1 单因素考察实验

取元宝枫油0.5mL，预设βCD与元宝枫油的配比为8∶1，包合温度50℃，包合时间60min，超声功率80W为包合工艺流程中相应的常规量，以元宝枫油与βCD的配比（4∶1、6∶1、8∶1、10∶1、12∶1）、包合温度（30℃、40℃、50℃、60℃、70℃）、包合时间（20min、40min、60min、80min、100min）及超声功率（40W、60W、80W、100W、120W）4个单因素变量替换工艺流程中相应的常规量，按照1.2.项下元宝枫油βCD包合物的制备方法制备包合物，并计算其包封率。

由图1、2、3、4可知，βCD与元宝枫油的配比（g/mL）、包合温度、包合时间及超声功率对包合物的包封率均具有一定影响，综合考虑影响大小、βCD的性质及实验条件，选用βCD与元宝枫油配比、包合温度和包合时间为影响因素设计正交实验，优选元宝枫油βCD包合物的制备工艺。

2.1.2 正交实验优化元宝枫油包合工艺

以βCD与元宝枫油配比、包合温度、包合时间为影响因素，以包封率为考察指标设计正交实验，实验因素水平见表1，正交实验结果见表2，方差分析结果见表3。

由表2、表3结果可知，5号包封率最高。βCD：元宝枫油配比对包封率影响显著（p<0.05），由各因素F值大小可知，各因素影响作用的主次顺序为A>B>C，即βCD：元宝枫油>包合温度>包合时间。

综上因素及包合物外观分析，确定元宝枫油βCD包合物最佳包合工艺为A2B2C3，即βCD与元宝枫油配比为8∶1，包合温度为50℃，包合时间为80min。

2.1.3 元宝枫油最优包合工艺参数的验证实验

为检验元宝枫油βCD包合物最佳包合工艺的可靠性，进行4组重复实验。元宝枫油βCD包合物包封率均在70%以上，产率约为75%。采用气相色谱法测定元宝枫油βCD包合物中神经酸含量，每1g元宝枫油βCD包合物含神经酸1.60mg。4组重复实验包封率、得率及神经酸含量均与正交实验最优结果一致，较为稳定。结果表明，正交实验优化获得的最佳工艺参数可靠有效。