甲状腺乳头状癌组织中LAT1、VEGF水平与TNM分期的相关性

乔亮，葛东风

（河南科技大学第一附属医院 病理科，河南 洛阳 471000）

甲状腺乳头状癌（PTC）是一种恶性程度较低的甲状腺癌，早期主要采用手术方式进行治疗，但治疗方案的制定与PTC的TNM分期密切相关［1］。L型氨基酸转运体1（LAT1）可促进细胞增殖、血管生成，调控细胞周期；血管内皮生长因子（VEGF）可促进血管内皮细胞增殖、迁移、血管形成。研究［2］表明，LAT1、VEGF在PTC组织中呈异常高表达，由此推测LAT1、VEGF表达情况与PTC患者TNM分期具有一定联系。鉴于此，本研究旨在分析PTC组织中LAT1、VEGF水平与TNM分期的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2019年1月至2019年12月期间我院收治的PTC患者70例，其中男性29例、女性31例；年龄24~60岁，平均年龄（42.11±7.27）岁；BMI 16.50~26 kg／m2，平均BMI（21.25±1.46）kg／m2；肿瘤直径0.4~4.7 cm，平均肿瘤直径（2.55±1.04）cm。

1.2 入选标准纳入标准：①符合PTC诊断标准［3］，且经组织病理学确诊；②参与本研究前无相关疾病治疗史。排除标准：①合并甲状腺腺瘤；②合并甲状腺结节、甲状腺肿等其他类型的甲状腺疾病。

1.3 方法

1.3.1 LAT1、VEGF检测 收集患者的PTC组织标本，应用链霉菌抗生物素蛋白－过氧化物酶连结免疫组织化学染色法进行IHC染色，切片3～4μm，常规脱蜡、脱水，应用磷酸盐缓冲溶液（PBS）清洗后，抗原修复，以体积分数为3%的过氧化氢阻断内源性过氧化物酶，PBS清洗，滴加一抗，室温下孵育10 min后放置在湿盒中，并置于4℃冰箱中保存12 h，PBS清洗，DAB显色，苏木精复染、脱水、封片，置于镜下观察，以PBS代替一抗作阴性对照。

1.3.2 TNM分期TNM分期标准参照《常见肿瘤AJCC分期手册（第7版）》［4］： Ⅰ期：T1N0M0； Ⅱ期：T2N0M0； Ⅲ期：T3N0M0、T1N1aM0、T2N1aM0、T1N1aM0； Ⅳ期：T4aN0M0、T4aN1aM0、T1N1bM0、T2N1bM0、T3N1bM0、T4aN1bM0，T4b任何N、M0，任何T、任何N、M1。

1.3.3阳性判定标准 选取高倍镜下10个视野（每个视野至少包含200个细胞），LAT1细胞质或（和）细胞膜为棕黄色颗粒样为阳性，VEGF细胞质为棕黄色颗粒样为阳性。着色率：0分：无着色；1分：浅黄色；2分：黄色；3分：棕黄色。阳性率（阳性细胞数／总细胞数×100%）：0分：阴性；1分：阳性率＜10%；2分：阳性 率11%~50%；3分：阳 性率51%~75%；4分：阳性率＞75%。两项乘积为总评分。总评分＞9分为强阳性（＋＋＋）、3~9分为中阳性（＋＋）、1~2分为弱阳性（＋）、0分为阴性（－）。

1.4 统计学方法采用SPSS 18.0统计学软件处理数据。计数资料以百分比表示，等级资料采用秩和检验；两个有序分类变量之间采用Kendall＇s tau－b相关分析；P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 PTC患者TNM分期情况经组织病理学证实，70例患者TNM分 期 情 况 如 下：Ⅰ期11例（15.71%），Ⅱ期31例（44.29%），Ⅲ期22例（31.43%），Ⅳ期6例（8.57%）。

2.2 不同TNM分期的PTC组织中LAT1、VEGF表达情况比较TNM分期的PTC组织中LAT1、VEGF阳性表达强度：Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期，两两间比较有统计学差异（P＜0.05）。见表1、表2。

表1 不同TNM分期的PTC组织中LAT1表达情况（例）

表2 不同TNM分期的PTC组织中VEGF表达情况（例）

2.3 PTC组织中LAT1、VEGF表达与TNM分期的相关性相关性分析结果显示，PTC组织中LAT1、VEGF表达与TNM分期呈正相关（r＝0.860、0.798，P＝0.000、0.000）。

3 讨论

手术是PTC患者常用治疗方式，但不同TNM分期患者手术方案存在一定的差异性，TNM分期Ⅲ期、Ⅳ期患者往往单一手术治疗效果不甚理想，临床上多采取综合治疗方案，以有效改善患者预后。因此，及时明确PTC患者TNM分期，对其临床治疗方案的制定具有重要指导意义。

本研究显示，TNM分期越高，PTC组织中LAT1、VEGF阳性表达越强；且PTC组织中LAT1、VEGF表达与TNM分期呈正相关，提示PTC组织中的LAT1、VEGF表达情况与PTC患者TNM分期密切相关。分析原因如下：LAT1可转运大中型氨基酸和芳香族中性氨基酸，其可与CD98结合形成二聚体复合物，参与肿瘤转移、侵袭过程［5］；另外，LAT1可提供肿瘤细胞快速增殖过程中所需的氨基酸，其在肿瘤细胞中呈异常高表达，会促进肿瘤细胞不断增殖、分化、迁移，进而促进PTC病情进展［2］。VEGF在体内及体外均有较高生物活性，，VEGF在体外可促进血管内皮细胞生长，在体内可诱导血管增生，在低氧环境下可与内皮细胞膜上的VEGF受体结合，诱发受体自身磷酸化，激活有丝分裂原活化蛋白激酶，促进VEGF有丝分裂，诱导内皮细胞增生［6］。同时，VEGF可通过提高血浆酶原活化因子与血浆酶原活化因子抑制因子－1的mRNA表达，提高血浆酶原活化因子活性，促进细胞外蛋白水解，进一步促进新生血管形成［7］。另外，VEGF在肿瘤增殖、分化、迁移等过程中发挥重要作用，可通过新生血管供给肿瘤细胞增殖、分化过程中所需的氧气及营养物质，促进肿瘤细胞增殖、转移，增加TNM分期。

综上所述，PTC组织中LAT1、VEGF水平与TNM分期密切相关，临床上可通过测定PTC组织中LAT1、VEGF水平来评估TNM分期，为临床治疗方案的制定提供依据。